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1. WO2022045927 - PROCÉDÉ DE CHARGEMENT D'EXOSOMES AVEC DES ARN NON CODANTS

Numéro de publication WO/2022/045927
Date de publication 03.03.2022
N° de la demande internationale PCT/RU2021/000333
Date du dépôt international 05.08.2021
CIB
C12N 15/113 2010.1
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
11Fragments d'ADN ou d'ARN; Leurs formes modifiées
113Acides nucléiques non codants modulant l'expression des gènes, p.ex. oligonucléotides anti-sens
A61K 35/14 2015.1
ANÉCESSITÉS COURANTES DE LA VIE
61SCIENCES MÉDICALE OU VÉTÉRINAIRE; HYGIÈNE
KPRÉPARATIONS À USAGE MÉDICAL, DENTAIRE OU POUR LA TOILETTE
35Préparations médicinales contenant des substances ou leurs produits de réaction de constitution non déterminée
12Substances provenant de mammifères; Compositions comprenant des tissus ou des cellules non spécifiés; Compositions comprenant des cellules souches non embryonnaires; Cellules génétiquement modifiées
14Sang; Sang artificiel
A61K 35/22 2015.1
ANÉCESSITÉS COURANTES DE LA VIE
61SCIENCES MÉDICALE OU VÉTÉRINAIRE; HYGIÈNE
KPRÉPARATIONS À USAGE MÉDICAL, DENTAIRE OU POUR LA TOILETTE
35Préparations médicinales contenant des substances ou leurs produits de réaction de constitution non déterminée
12Substances provenant de mammifères; Compositions comprenant des tissus ou des cellules non spécifiés; Compositions comprenant des cellules souches non embryonnaires; Cellules génétiquement modifiées
22Urine; Appareil urinaire, p.ex. rein ou vessie; Cellules mésangiales intraglomérulaires; Cellules mésenchymateuses rénales; Glande surrénale
A61P 35/00 2006.1
ANÉCESSITÉS COURANTES DE LA VIE
61SCIENCES MÉDICALE OU VÉTÉRINAIRE; HYGIÈNE
PACTIVITÉ THÉRAPEUTIQUE SPÉCIFIQUE DE COMPOSÉS CHIMIQUES OU DE PRÉPARATIONS MÉDICINALES
35Agents anticancéreux
CPC
A61K 31/00
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
31Medicinal preparations containing organic active ingredients
C12N 15/10
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
Déposants
  • ГОРДЕЙЧУК, Владимир Евгеньевич GORDEYCHUK, Vladimir Evgenevich [RU]/[RU]
  • РУБЦОВ, Сергей Владимирович RUBTSOV, Sergey Vladimirovich [RU]/[RU]
  • БАРСУКОВ, Александр Павлович BARSUKOV, Aleksandr Pavlovich [RU]/[RU]
  • ПОСПЕЛОВ, Вадим Игоревич POSPELOV, Vadim Igorevich [RU]/[RU]
Inventeurs
  • ПОСПЕЛОВ, Вадим Игоревич POSPELOV, Vadim Igorevich
  • АБРАМОВ, Александр Андреевич ABRAMOV, Aleksandr Andreevich
  • ПЕТКЕВИЧ, Алиса Антоновна PETKEVICH, Alisa Antonovna
Données relatives à la priorité
202012854227.08.2020RU
Langue de publication Russe (ru)
Langue de dépôt russe (RU)
États désignés
Titre
(EN) METHOD FOR LOADING EXOSOMES WITH SMALL NON-CODING RNAS
(FR) PROCÉDÉ DE CHARGEMENT D'EXOSOMES AVEC DES ARN NON CODANTS
(RU) СПОСОБ ЗАГРУЗКИ ЭКЗОСОМ МАЛЫМИ НЕКОДИРУЮЩИМИ РНК
Abrégé
(EN) The invention relates to molecular biology, more particularly to methods for loading (filling) exosomes with small non-coding RNAs to enable the subsequent targeted delivery thereof to individual tissues of living organisms. The technical effect achieved through realising the claimed method is the possibility of maximising the load of small non-coding microRNAs in the exosomes obtained from biological fluids of a human, thus making it possible to subsequently use the loaded exosomes as carrier constructs for delivery of therapeutic agents into tumour cells of living organisms. The above-mentioned technical result is achieved by mixing exosomes, obtained from urine or peripheral venous blood of a human, and a small non-coding RNA in phosphate-buffered saline (PBS) in the following quantities per mL of solution: 1*10^10 - 5*10^10 exosomes and 10*10^12 - 50*10^12 copies of the small non-coding RNA; the mixture produced is then placed in a thermostat at 35-40°C for 14-18 hours.
(FR) L'invention se rapporte au domaine de la biologie moléculaire, et concerne notamment des procédés de chargement (remplissage) d'exosomes avec de petits ARN non codants afin de pouvoir ensuite les administrer de manière ciblée dans des tissus distinct d'organismes vivants. Le résultat technique obtenu par la mise en oeuvre de ce procédé consiste en la possibilité de charger des exosomes obtenus à partir de liquides biologiques d'une personne avec de petits micro-ARN non codants, ce qui permet ensuite d'utiliser les exosomes chargés en qualité de structures de transport pour administrer des agents thérapeutiques dans des cellules tumorales d'organismes vivants. Ce résultat technique est obtenu en mélangeant, dans une solution physiologique tampon à base de phosphate (PBS), des exosomes obtenus à partir d'urine ou de sang veineux périphérique d'une personne et de petits ARN non codants dans une proportion pour 1 ml de solution de 1*10^10÷5*10^10 d'exosomes et de 10*10^12÷50*10^12 de copies de petit ARN non codant, après quoi le mélange obtenu est maintenu thermostaté à 35-40°C pendant 14-18 heures.
(RU) Изобретение относится к молекулярной биологии, в частности, к способам загрузки (заполнения) экзосом малыми некодирующими РНК, для возможности их последующей таргетной доставки в отдельные ткани живых организмов. Техническим эффектом, достигаемом при реализации заявленного способа является возможность максимальной загрузки экзосом, полученных из биологических жидкостей человека малыми некодирующими микроРНК, что в дальнейшем позволит использовать загруженные экзосомы в качестве транспортных структур для доставки терапевтических агентов в опухолевые клетки живых организмов. Вышеприведенный технический результат достигается тем, что в забуференном фосфатом физиологическом растворе (PBS), смешивают экзосомы, полученные из мочи или периферической венозной крови человека и малую некодирующую РНК в соотношении на 1 мл раствора 1*10^10÷5*10^10 экзосом и 10*10^12÷50*10^12 копий малой некодирующей РНК, далее полученную смесь выдерживают в термостате при 35-40°С в течение 14-18 часов.
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