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1. WO2020065338 - ESSAIS DE NEUROTOXINE CLOSTRIDIALE À BASE DE CELLULES

Numéro de publication WO/2020/065338
Date de publication 02.04.2020
N° de la demande internationale PCT/GB2019/052734
Date du dépôt international 27.09.2019
CIB
C12Q 1/37 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
QPROCÉDÉS DE MESURE OU DE TEST FAISANT INTERVENIR DES ENZYMES, DES ACIDES NUCLÉIQUES OU DES MICRO-ORGANISMES; COMPOSITIONS OU PAPIERS RÉACTIFS À CET EFFET; PROCÉDÉS POUR PRÉPARER CES COMPOSITIONS; PROCÉDÉS DE COMMANDE SENSIBLES AUX CONDITIONS DU MILIEU DANS LES PROCÉDÉS MICROBIOLOGIQUES OU ENZYMOLOGIQUES
1Procédés de mesure ou de test faisant intervenir des enzymes, des acides nucléiques ou des micro-organismes; Compositions à cet effet; Procédés pour préparer ces compositions
34faisant intervenir une hydrolase
37faisant intervenir une peptidase ou une protéinase
G01N 33/50 2006.01
GPHYSIQUE
01MÉTROLOGIE; TESTS
NRECHERCHE OU ANALYSE DES MATÉRIAUX PAR DÉTERMINATION DE LEURS PROPRIÉTÉS CHIMIQUES OU PHYSIQUES
33Recherche ou analyse des matériaux par des méthodes spécifiques non couvertes par les groupes G01N1/-G01N31/146
48Matériau biologique, p.ex. sang, urine; Hémocytomètres
50Analyse chimique de matériau biologique, p.ex. de sang ou d'urine; Test par des méthodes faisant intervenir la formation de liaisons biospécifiques par ligands; Test immunologique
G01N 33/542 2006.01
GPHYSIQUE
01MÉTROLOGIE; TESTS
NRECHERCHE OU ANALYSE DES MATÉRIAUX PAR DÉTERMINATION DE LEURS PROPRIÉTÉS CHIMIQUES OU PHYSIQUES
33Recherche ou analyse des matériaux par des méthodes spécifiques non couvertes par les groupes G01N1/-G01N31/146
48Matériau biologique, p.ex. sang, urine; Hémocytomètres
50Analyse chimique de matériau biologique, p.ex. de sang ou d'urine; Test par des méthodes faisant intervenir la formation de liaisons biospécifiques par ligands; Test immunologique
53Tests immunologiques; Tests faisant intervenir la formation de liaisons biospécifiques; Matériaux à cet effet
536avec formation d'un complexe immunologique en phase liquide
542avec inhibition stérique ou modification du signal, p.ex. extinction de fluorescence
G01N 33/569 2006.01
GPHYSIQUE
01MÉTROLOGIE; TESTS
NRECHERCHE OU ANALYSE DES MATÉRIAUX PAR DÉTERMINATION DE LEURS PROPRIÉTÉS CHIMIQUES OU PHYSIQUES
33Recherche ou analyse des matériaux par des méthodes spécifiques non couvertes par les groupes G01N1/-G01N31/146
48Matériau biologique, p.ex. sang, urine; Hémocytomètres
50Analyse chimique de matériau biologique, p.ex. de sang ou d'urine; Test par des méthodes faisant intervenir la formation de liaisons biospécifiques par ligands; Test immunologique
53Tests immunologiques; Tests faisant intervenir la formation de liaisons biospécifiques; Matériaux à cet effet
569pour micro-organismes, p.ex. protozoaires, bactéries, virus
CPC
A61K 47/02
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
47Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
02Inorganic compounds
A61K 47/183
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
47Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
06Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
16containing nitrogen, ; e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
18Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
183Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
A61K 9/0019
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
9Medicinal preparations characterised by special physical form
0012Galenical forms characterised by the site of application
0019Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
C12N 15/10
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
C12N 15/1086
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
1034Isolating an individual clone by screening libraries
1086Preparation or screening of expression libraries, e.g. reporter assays
C12N 2510/00
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
2510Genetically modified cells
Déposants
  • IPSEN BIOPHARM LIMITED [GB]/[GB]
  • INSTITUTE OF MOLECULAR AND CELL BIOLOGY, BIOMEDICAL SCIENCES INSTITUTES [SG]/[SG]
Inventeurs
  • FOSTER, Keith
  • BEARD, Matthew
  • YEO, Jeremy Changyu
  • BARD, Frederic Andre Jean
  • TAY, Pei Ling Felicia
Mandataires
  • HOBSON, David James
Données relatives à la priorité
1815870.928.09.2018GB
Langue de publication anglais (EN)
Langue de dépôt anglais (EN)
États désignés
Titre
(EN) CELL-BASED CLOSTRIDAL NEUROTOXIN ASSAYS
(FR) ESSAIS DE NEUROTOXINE CLOSTRIDIALE À BASE DE CELLULES
Abrégé
(EN)
The present invention is directed to a method for identifying a gene that regulates clostridial neurotoxin activity, the method comprising: a. providing a sample of human neuronal cells expressing a polypeptide that comprises a C-terminal detectable label, wherein the polypeptide is cleavable by a clostridial neurotoxin; b. altering expression of a target gene of the cells; c. contacting the cells with the clostridial neurotoxin; d. measuring an amount of C-terminal detectable label, thereby quantifying clostridial neurotoxin activity; and e. identifying the target gene as a regulator of clostridial neurotoxin activity when the quantified clostridial neurotoxin activity is different to the quantified clostridial neurotoxin activity when expression of the target gene is unaltered; or f. identifying that the target gene is not a regulator of clostridial neurotoxin activity when the quantified clostridial neurotoxin activity is equivalent to the quantified clostridial neurotoxin activity when expression of the target gene is unaltered. Also provided are related methods for identifying an agent that regulates clostridial neurotoxin activity, as well as human neuronal cells, nucleotides, vectors, polypeptides, kits, and compositions suitable for use in the methods of the invention.
(FR)
La présente invention concerne un procédé d'identification d'un gène qui régule l'activité d'une neurotoxine clostridiale, le procédé consistant à a. : utiliser un échantillon de cellules neuronales humaines exprimant un polypeptide qui comprend une étiquette détectable au niveau de l'extrémité C, le polypeptide étant clivable par une neurotoxine clostridiale ; b. modifier l'expression d'un gène cible des cellules ; c. mettre en contact les cellules avec la neurotoxine clostridiale ; d. mesurer une quantité d'étiquette détectable au niveau de l'extrémité C, ce qui permet de quantifier l'activité de la neurotoxine clostridiale ; et e. identifier le gène cible en tant que régulateur de l'activité de la neurotoxine clostridiale lorsque l'activité quantifiée de la neurotoxine clostridiale est différente de l'activité quantifiée de la neurotoxine clostridiale lorsque l'expression du gène cible est inchangée ; ou f. identifier le fait que le gène cible n'est pas un régulateur de l'activité de neurotoxine clostridiale lorsque l'activité quantifiée de la neurotoxine clostridiale est équivalente à l'activité quantifiée de la neurotoxine clostridiale lorsque l'expression du gène cible est inchangée. L'invention concerne également des procédés associés pour identifier un agent qui régule l'activité de la neurotoxine clostridiale, ainsi que des cellules neuronales humaines, des nucléotides, des vecteurs, des polypeptides, des kits et des compositions appropriés pour une utilisation dans les procédés de l'invention.
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