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1. (WO2018195593) PROCÉDÉ DE CULTURE DE CELLULES DE FIBROSE KYSTIQUE ET PROCÉDÉ DE CRIBLAGE BASÉ SUR CE DERNIER ET TRAITEMENT DE LA FIBROSE KYSTIQUE

Pub. No.:    WO/2018/195593    International Application No.:    PCT/AU2018/050373
Publication Date: Fri Nov 02 00:59:59 CET 2018 International Filing Date: Wed Apr 25 01:59:59 CEST 2018
IPC: C12N 5/071
C12N 5/10
C12N 15/63
Applicants: TELETHON KIDS INSTITUTE
Inventors: GARRATT, Luke Wisely
KICIC, Anthony
TREND, Stephanie
Title: PROCÉDÉ DE CULTURE DE CELLULES DE FIBROSE KYSTIQUE ET PROCÉDÉ DE CRIBLAGE BASÉ SUR CE DERNIER ET TRAITEMENT DE LA FIBROSE KYSTIQUE
Abstract:
La présente invention concerne des procédés de criblage de cellules de patient atteint de fibrose kystique pour identifier des agents thérapeutiques convenant au traitement de la fibrose kystique et/ou des infections bactériennes associées à la fibrose kystique. En particulier, la présente invention concerne un procédé de culture de cellules provenant d’un patient atteint de fibrose kystique comprenant : (i) la préparation de cellules épithéliales des voies aériennes primaires (pAEC) provenant dudit patient atteint de fibrose kystique ; et (ii) la co-culture desdites pAEC avec une cellule nourricière de fibroblaste exposée à un rayonnement en présence d’un milieu de culture tissulaire et d’au moins un inhibiteur de kinase associé à Rho (ROCK) pour accroître le nombre de pAEC dans la culture. De plus, l’invention concerne une construction d’expression comprenant une séquence nucléique codant pour un polypeptide rapporteur fonctionnellement lié à une séquence d’acides nucléiques codant pour CFTR ou son mutant, qui facilite l’expression de 150 000 copies du CFTR ou du polypeptide CFTR mutant sur la membrane cytoplasmique d’une cellule.