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1. (WO2018050835) CONTRÔLE INTERNE D'AMPLIFICATION

Pub. No.:    WO/2018/050835    International Application No.:    PCT/EP2017/073304
Publication Date: Fri Mar 23 00:59:59 CET 2018 International Filing Date: Sat Sep 16 01:59:59 CEST 2017
IPC: C12Q 1/68
Applicants: QIAGEN GMBH
Inventors: VRANES, Miroslav
PEIST, Ralf
SCHERER, Mario
CORNELIUS, Stefan Otto
Title: CONTRÔLE INTERNE D'AMPLIFICATION
Abstract:
La présente invention concerne la PCR qui permet aux chercheurs d'amplifier un ADN souhaité en ne nécessitant que de minuscules quantités d'échantillon. Ces réactions d'amplification sont techniquement difficiles et se heurtent souvent à plusieurs problèmes pratiques, tels que la présence d'inhibiteurs de PCR, la dégradation des échantillons et de faibles quantités dudit échantillon. L'invention aborde ces problèmes avec un procédé d'évaluation de l'efficacité d'amplification et/ou de la présence d'inhibiteurs et/ou de dégradation et/ou de réalisation d'une quantification d'un acide nucléique dans une réaction d'amplification en temps réel comprenant : éventuellement l'amplification dans une composition de réaction d'un premier acide nucléique cible à l'aide d'une première paire d'amorces dans une réaction d'amplification en temps réel, (i) l'amplification dans ladite composition de réaction d'un ou plusieurs seconds modèles de contrôle interne d'acide nucléique (IC) avec une longueur comprise entre 50 et 2 000 nucléotides, le second acide nucléique ayant une séquence choisie dans le groupe comprenant : i) SEQ ID NO : 1 ou une séquence qui ne diffère pas de plus de 15 % de celle-ci, ii) un complément inverse de SEQ ID NO : 1 ou une séquence qui ne diffère pas de plus de plus de 15 % de celle-ci, iii) une séquence ou un complément inverse de celle-ci comprenant les 18 à 30 nucléotides finaux en 3' de SEQ ID NO : 1 au niveau de son extrémité 3' et les 18 à 30 nucléotides finaux en 5' de SEQ ID NO : 1 au niveau de son extrémité 5', ou des extrémités terminales qui ne diffèrent pas de plus de 5 % de SEQ ID NO : 1, l'acide nucléique entre ces extrémités 3' et 5' terminales pouvant avoir toute séquence nucléotidique et étant d'une longueur comprise entre environ 30 et environ 1 950 nucléotides.