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1. (WO2017207844) PRODUCTION DE STÉROÏDES 11Α HYDROXYLÉS AU MOYEN D’UNE BIOTRANSFORMATION AVEC DES BACTÉRIES RECOMBINANTES
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N° de publication : WO/2017/207844 N° de la demande internationale : PCT/ES2017/070363
Date de publication : 07.12.2017 Date de dépôt international : 29.05.2017
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01) ,C12N 15/77 (2006.01)
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
Q
PROCÉDÉS DE MESURE, DE RECHERCHE OU D'ANALYSE FAISANT INTERVENIR DES ENZYMES OU DES MICRO-ORGANISMES; COMPOSITIONS OU PAPIERS RÉACTIFS À CET EFFET; PROCÉDÉS POUR PRÉPARER CES COMPOSITIONS; PROCÉDÉS DE COMMANDE SENSIBLES AUX CONDITIONS DU MILIEU DANS LES PROCÉDÉS MICROBIOLOGIQUES OU ENZYMOLOGIQUES
1
Procédés de mesure, de recherche ou d'analyse faisant intervenir des enzymes ou des micro-organismes; Compositions à cet effet; Procédés pour préparer ces compositions
68
faisant intervenir des acides nucléiques
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
N
MICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15
Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09
Technologie d'ADN recombinant
63
Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs: Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
74
Vecteurs ou systèmes d'expression spécialement adaptés aux hôtes procaryotes autres que E. coli, p.ex. Lactobacillus, Micromonospora
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pour Corynebacterium; pour Brevibacterium
Déposants :
CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS (CSIC) [ES/ES]; C/ Serrano, 117 28006 Madrid, ES
Inventeurs :
FELPETO SANTERO, Carmen; ES
GALÁN SICILIA, Beatriz; ES
GARCÍA LÓPEZ, José Luis; ES
Mandataire :
PONS ARIÑO, Ángel; ES
Données relatives à la priorité :
P 20163070130.05.2016ES
Titre (EN) PRODUCTION OF 11Α-HYDROXYLATED STEROIDS BY BIOTRANSFORMATION WITH RECOMBINANT BACTERIA
(FR) PRODUCTION DE STÉROÏDES 11Α HYDROXYLÉS AU MOYEN D’UNE BIOTRANSFORMATION AVEC DES BACTÉRIES RECOMBINANTES
(ES) PRODUCCIÓN DE ESTEROIDES 11α HIDROXILADOS MEDIANTE BIOTRANSFORMACIÓN CON BACTERIAS RECOMBINANTES
Abrégé :
(EN) The present invention provides a method for producing 11α-hydroxylated steroid compounds or derivatives thereof by fermentation of natural sterols or by biotransformation of various steroidal synthons with recombinant bacteria, preferably Mycobacterium smegmatis or Corynebacterium glutamicum. Said recombinant bacteria carry a plasmid comprising a synthetic operon containing the genes cyp509C12 and roCPR1 from Rhizopus oryzae, which code for cytochrome CYP509C12 with 11α-hydroxylase activity, and the cytochrome reductase (RoCPR1) needed for activity of the cytochrome. Using the method described in the present invention, 11α OH-ADD or 11α-OH-AD can be produced from natural sterols such as cholesterol or phytosterols, and 1α-OH-PROG, 11α-OH-DOC, 11α-OH-TEST, 11α-OH-DHEA, 11α-OH-AD and/or 11α-OH-ADD can be produced from the corresponding non-hydroxylated synthons, amongst others.
(FR) La présente invention concerne un procédé servant à produire des stéroïdes 11α hydroxylés ou des dérivés de ceux-ci par fermentation de stérols naturels ou par biotransformation de synthons stéroïdes distincts avec des bactéries recombinantes, de préférence de Mycobacterium smegmatis ou de Corynebacterium glutamicum. Lesdites bactéries recombinantes portent un plasmide qui comprend un opéron synthétique qui contient les gènes cyp509C12 et roCPR1 de Rhizopus oryzae, qui codent pour le cytochrome CYP509C12 avec une activité 11α-hydroxylase et la cytochrome réductase (RoCPR1) nécessaire à l’activité du cytochrome. Au moyen du procédé décrit dans la présente invention, il est possible de produire sans toutefois s’y limiter, 1α OH-ADD ou 11α-OH-AD à partir de stérols naturels tels que le cholestérol ou les phytostérols, ou 1α-OH-PROG, 11α-OH-DOC, 11α-OH-TEST, 11α-OH-DHEA, 11α-OH-AD et/ou 11α-OH-ADD à partir de leurs synthons correspondants non hydroxylés.
(ES) La presente invención proporciona un procedimiento para producir compuestos esteroideos 11α hidroxilados o derivados de los mismos por fermentación de esteroles naturales o por biotransformación de distintas sintonas esteroideas con bacterias recombinantes, preferiblemente de Mycobacterium smegmatis o de Corynebacterium glutamicum. Dichas bacterias recombinantes portan un plásmido que comprende un operón sintético que contiene los genes cyp509C12 y roCPR1 de Rhizopus oryzae, que codifican el citocromo CYP509C12 con actividad 11α-hidroxilasa y la citocromo reductasa (RoCPR1) necesaria para la actividad del citocromo. Mediante el método descrito en la presente invención se pueden producir, aunque sin limitarnos, 11α OH-ADD o 11α-OH-AD a partir de esteroles naturales como colesterol o fitoesteroles, o 1α-OH-PROG, 11α-OH-DOC, 11α-OH-TEST, 11α-OH-DHEA, 11α-OH-AD y/o 11α-OH-ADD a partir de sus correspondientes sintonas no hidroxiladas.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Langue de publication : espagnol (ES)
Langue de dépôt : espagnol (ES)