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1. (WO2016208466) PROCÉDÉ DE DÉTECTION D'UNE SUBSTANCE D'INTÉRÊT
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N° de publication : WO/2016/208466 N° de la demande internationale : PCT/JP2016/067765
Date de publication : 29.12.2016 Date de dépôt international : 15.06.2016
CIB :
G01N 33/533 (2006.01) ,G01N 21/64 (2006.01) ,G01N 33/542 (2006.01)
Déposants : USHIO DENKI KABUSHIKI KAISHA[JP/JP]; 1-6-5, Marunouchi, Chiyoda-ku, Tokyo 1008150, JP
Inventeurs : ABE Ryoji; JP
OHASHI Hiroyuki; JP
SAIKI Fujio; JP
Mandataire : HIRAKI Yusuke; JP
Données relatives à la priorité :
2015-12511922.06.2015JP
Titre (EN) METHOD FOR DETECTING SUBSTANCE OF INTEREST
(FR) PROCÉDÉ DE DÉTECTION D'UNE SUBSTANCE D'INTÉRÊT
(JA) 検出対象物質の検出方法
Abrégé :
(EN) Provided is a method for measuring a substance of interest in a test sample rapidly using a small fluorescence detection device that can be used on-site. A method for detecting a substance of interest, i.e., an antigen, using an antibody reagent for antigen-antibody reactions, wherein the antibody reagent comprises a complex of a polypeptide containing an antibody light-chain variable region and a polypeptide containing an antibody heavy-chain variable region, the polypeptide containing the antibody light-chain variable region and/or the polypeptide containing the antibody heavy-chain variable region is labeled with a fluorescent dye, and the antibody reagent for antigen-antibody reactions can detect the antigen, i.e., the substance of interest, by employing a matter that the concentration of the antigen, i.e., the substance of interest, in a liquid phase has a positive or negative correlation with the fluorescence intensity of the fluorescent dye as a measure. The method comprises: carrying out a fluorescence intensity measurement at predetermined intervals after the initiation of an antigen-antibody reaction; comparing fluorescent intensities obtained in the measurements to calculate the amount or ratio of increase in fluorescence or the amount or ratio of decrease in fluorescence with one another; comparing the amount or ratio of increase in fluorescence or the amount or ratio of decrease in fluorescence with a predetermined criterion value; and determining that the substance of interest is present when the amount or ratio of increase in fluorescence is larger than the criterion value or the amount or ratio of decrease in fluorescence is smaller than the criterion value and determined that the substance of interest is absent when the amount or ratio of increase in fluorescence does not become higher than the criterion value or the amount or ratio of decrease in fluorescence does not become smaller than the criterion value within a predetermined determination period. The criterion value is an amount or ratio of increase in fluorescence or an amount or ratio of decrease in fluorescence as measured when the complex is reacted with a substance of interest which is not desired to detect and has the largest concentration for a predetermined determination period.
(FR) L'invention concerne un procédé permettant de mesurer rapidement une substance d'intérêt dans un échantillon d'essai à l'aide d'un petit dispositif de détection fluorimétrique qui peut être utilisé sur site. L'invention concerne un procédé permettant de détecter une substance d'intérêt, c'est-à-dire, un antigène, à l'aide d'un réactif formant anticorps pour réactions antigène-anticorps, ledit réactif formant anticorps comprenant un complexe d'un polypeptide contenant une région variable à chaîne légère d'anticorps et d'un polypeptide contenant une région variable à chaîne lourde d'anticorps, le polypeptide contenant la région variable à chaîne légère d'anticorps et/ou le polypeptide contenant la région variable à chaîne lourde d'anticorps étant marqué avec un colorant fluorescent, et le réactif formant anticorps pour réactions antigène-anticorps pouvant détecter l'antigène, c'est-à-dire, la substance d'intérêt, en utilisant une matière que la concentration de l'antigène, c'est-à-dire, la substance d'intérêt, dans une phase liquide a une corrélation positive ou négative avec l'intensité de fluorescence du colorant fluorescent en tant que mesure. Le procédé comprend les étapes consistant à : mettre en œuvre une mesure d'intensité fluorimétrique à des intervalles prédéterminés après l'initiation d'une réaction antigène-anticorps ; comparer les intensités de fluorescence obtenues dans les mesures pour calculer la quantité ou le rapport d'augmentation de la fluorescence ou la quantité ou le rapport de diminution de la fluorescence des unes avec les autres ; comparer la quantité ou le rapport d'augmentation de la fluorescence ou la quantité ou le rapport de diminution de la fluorescence avec une valeur de critère prédéterminée ; et déterminer que la substance d'intérêt est présente lorsque la quantité ou le rapport d'augmentation de la fluorescence est plus grand que la valeur de critère ou que la quantité ou le rapport de diminution de la fluorescence est plus petit que la valeur de critère et déterminer que la substance d'intérêt est absente lorsque la quantité ou le rapport d'augmentation de la fluorescence ne devient pas supérieur à la valeur de critère ou la quantité ou le rapport de diminution de la fluorescence ne devient pas plus petit que la valeur de critère à l'intérieur d'une période de détermination prédéterminée. La valeur de critère est une quantité ou un rapport d'augmentation de la fluorescence ou une quantité ou un rapport de diminution de la fluorescence mesurée lorsque le complexe est mis à réagir avec une substance d'intérêt dont la détection n'est pas souhaitée et qui a la plus grande concentration pendant une période de détermination prédéterminée.
(JA) オンサイトで用い得る小型の蛍光検出装置を用いて迅速に検査試料中の検出対象物質を測定する方法の提供。 抗体軽鎖可変領域を含むポリペプチドと抗体重鎖可変領域を含むポリペプチドのいずれか一方又は両方が蛍光色素により標識された、前記抗体軽鎖可変領域を含むポリペプチドと抗体重鎖可変領域を含むポリペプチドからなる複合体を含む抗原抗体反応用抗体試薬であって、液相中の検出対象物質である抗原濃度と上記蛍光色素の蛍光強度とが正又は負の相関関係にあることを指標として、該検出対象物質である抗原を検出する抗原抗体反応用抗体試薬を用いる検出対象物質の検出方法において、抗原抗体反応が開始されてから所定の周期で蛍光強度測定を行い、各測定ごとの蛍光強度を比較し蛍光増加量若しくは蛍光増加率、又は蛍光減少量若しくは蛍光減少率を算出し、その蛍光増加量若しくは蛍光増加率、又は蛍光減少量若しくは蛍光減少率を予め設定した判定値と比較し、蛍光増加量若しくは蛍光増加率が判定値より大きくなったとき、又は蛍光減少量若しくは蛍光減少率が判定値より小さくなったときに検出対象物質が存在すると判定し、所定の判定時間以内に蛍光増加量若しくは蛍光増加率が判定値より大きくならないとき、又は蛍光減少量若しくは蛍光減少率が判定値より小さくならないときに検出対象物質が存在しないと判定することを含み、前記判定値が、前記複合体と検出を希望しない最大濃度の検出対象物質を所定の判定時間反応させたときの蛍光増加量若しくは蛍光増加率、又は蛍光減少量若しくは蛍光減少率である、検出対象物質の検出方法。
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Langue de publication : japonais (JA)
Langue de dépôt : japonais (JA)