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1. WO2016148307 - MÉTHODE D'INDUCTION DE LA DIFFÉRENCIATION DES CELLULES ÉPITHÉLIALES DES VOIES AÉRIENNES

Numéro de publication WO/2016/148307
Date de publication 22.09.2016
N° de la demande internationale PCT/JP2016/059786
Date du dépôt international 18.03.2016
CIB
C12N 5/22 2006.1
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
5Cellules non différenciées humaines, animales ou végétales, p.ex. lignées cellulaires; Tissus; Leur culture ou conservation; Milieux de culture à cet effet
10Cellules modifiées par l'introduction de matériel génétique étranger, p.ex. cellules transformées par des virus
12Cellules fusionnées, p.ex. hybridomes
22Cellules humaines
C12N 5/0735 2010.1
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
5Cellules non différenciées humaines, animales ou végétales, p.ex. lignées cellulaires; Tissus; Leur culture ou conservation; Milieux de culture à cet effet
07Cellules animales ou tissus animaux
071Cellules ou tissus de vertébrés, p.ex. cellules humaines ou tissus humains
073Cellules ou tissus embryonnaires; Cellules fœtales ou tissus fœtaux
0735Cellules souches embryonnaires; Cellules germinales embryonnaires
CPC
C12N 2500/38
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
2500Specific components of cell culture medium
30Organic components
38Vitamins
C12N 2501/11
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
2501Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
10Growth factors
11Epidermal growth factor [EGF]
C12N 2501/119
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
2501Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
10Growth factors
119Other fibroblast growth factors, e.g. FGF-4, FGF-8, FGF-10
C12N 2501/148
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
2501Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
10Growth factors
148Transforming growth factor alpha [TGF-a]
C12N 2501/15
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
2501Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
10Growth factors
15Transforming growth factor beta (TGF-β)
C12N 2501/155
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
2501Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
10Growth factors
155Bone morphogenic proteins [BMP]; Osteogenins; Osteogenic factor; Bone inducing factor
Déposants
  • 国立大学法人京都大学 KYOTO UNIVERSITY [JP]/[JP]
Inventeurs
  • 後藤 慎平 GOTOH, Shimpei
  • 山本 佑樹 YAMAMOTO, Yuki
  • 小西 聡史 KONISHI, Satoshi
  • 三嶋 理晃 MISHIMA, Michiaki
Mandataires
  • 平木 祐輔 HIRAKI, Yusuke
Données relatives à la priorité
2015-05679119.03.2015JP
Langue de publication japonais (JA)
Langue de dépôt japonais (JA)
États désignés
Titre
(EN) METHOD FOR INDUCING DIFFERENTIATION OF AIRWAY EPITHELIAL CELLS
(FR) MÉTHODE D'INDUCTION DE LA DIFFÉRENCIATION DES CELLULES ÉPITHÉLIALES DES VOIES AÉRIENNES
(JA) 気道上皮細胞の分化誘導法
Abrégé
(EN)
The purpose of the present invention is to provide a method for stably producing airway epithelial cells from pluripotent stem cells. Specifically, the present invention pertains to a method for producing airway epithelial cells from pluripotent stem cells, the method including: (1) a step for culturing pluripotent stem cells in a medium containing activin A and GSK 3β inhibitor; (2) a step for culturing the cells obtained in step (1) in a medium containing BMP inhibitor and TGFβ inhibitor; (3) a step for culturing the cells obtained in step (2) in a medium containing BMP4, retinoic acid, and GSK 3β inhibitor; (5) a step for three-dimensionally culturing the cells obtained after step (3) in a medium containing a GSK 3β inhibitor, FGF10, and ROCK inhibitor; and (6) a step for three-dimensionally culturing the central airway epithelial progenitor cells obtained in step (5) in a medium containing an ROCK inhibitor.
(FR)
La présente invention concerne une méthode permettant de produire de façon stable des cellules épithéliales des voies aériennes à partir de cellules souches pluripotentes. Plus particulièrement, la présente invention concerne une méthode de production de cellules épithéliales des voies aériennes à partir de cellules souches pluripotentes, la méthode comprenant : (1) une étape constituant à cultiver des cellules souches pluripotentes dans un milieu contenant de l'activine A et un inhibiteur de GSK 3β ; (2) une étape constituant à cultiver les cellules obtenues dans l'étape (1) dans un milieu contenant un inhibiteur de BMP et un inhibiteur de TGFβ ; (3) une étape constituant à cultiver les cellules obtenues dans l'étape (2) dans un milieu contenant de la BMP4, de l'acide rétinoïque et un inhibiteur de GS 3β ; (5) une étape constituant à cultiver en trois dimensions les cellules obtenues après l'étape (3) dans un milieu contenant un inhibiteur de GSK 3β, du FGF10 et un inhibiteur de ROCK ; et (6) une étape constituant à cultiver en trois dimensions les cellules progénitrices épithéliales des voies aériennes centrales obtenues dans l'étape (5) dans un milieu contenant un inhibiteur de ROCK.
(JA)
 本発明は、多能性幹細胞から安定して気道上皮細胞を製造する方法を提供することを目的とし、具体的には、(1)多能性幹細胞をアクチビンA及びGSK3β阻害剤を含む培地で培養する工程;(2)(1)の工程で得られた細胞をBMP阻害剤及びTGFβ阻害剤を含む培地で培養する工程;(3)(2)の工程で得られた細胞をBMP4、レチノイン酸及びGSK3β阻害剤を含む培地で培養する工程;(5)(3)の工程後、得られた細胞をGSK3β阻害剤、FGF10及びROCK阻害剤を含む培地で3次元培養する工程;及び(6)(5)の工程で得られた中枢側気道上皮前駆細胞をROCK阻害剤を含む培地で3次元培養する工程を含む、多能性幹細胞から気道上皮細胞を製造する方法に関する。
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