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Paramétrages

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1. WO2007138148 - ENZYME PÉNICILLINE G ACYLASE MUTÉE, IMMOBILISÉE ET STABILISÉE, SON PROCÉDÉ D'OBTENTION ET SES APPLICATIONS

Numéro de publication WO/2007/138148
Date de publication 06.12.2007
N° de la demande internationale PCT/ES2007/070104
Date du dépôt international 30.05.2007
CIB
C12N 11/08 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
11Enzymes fixées sur un support ou immobilisées; Cellules microbiennes fixées sur un support ou immobilisées; Leur préparation
02Enzymes ou cellules microbiennes immobilisées sur ou dans un support organique
08le support étant un polymère synthétique
C12N 9/84 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
9Enzymes, p.ex. ligases (6.); Proenzymes; Compositions les contenant; Procédés pour préparer, activer, inhiber, séparer ou purifier des enzymes
14Hydrolases (3.)
78agissant sur les liaisons carbone-azote autres que les liaisons peptidiques (3.5)
80agissant sur les liaisons amides des amides aliphatiques
84Penicillinamidase
C12P 37/04 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
PPROCÉDÉS DE FERMENTATION OU PROCÉDÉS UTILISANT DES ENZYMES POUR LA SYNTHÈSE D'UN COMPOSÉ CHIMIQUE DONNÉ OU D'UNE COMPOSITION DONNÉE, OU POUR LA SÉPARATION D'ISOMÈRES OPTIQUES À PARTIR D'UN MÉLANGE RACÉMIQUE
37Préparation de composés comportant un système cyclique thia-4 aza-1 bicyclo heptane, p.ex. pénicilline
04par acylation du substituant en position 6
CPC
C07K 2299/00
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
2299Coordinates from 3D structures of peptides, e.g. proteins or enzymes
C12N 11/08
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
11Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
08the carrier being a synthetic polymer
C12N 9/84
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
14Hydrolases (3)
78acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
80acting on amide bonds in linear amides ; (3.5.1)
84Penicillin amidase ; (3.5.1.11)
C12P 37/04
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
37Preparation of compounds having a 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring system, e.g. penicillin
04by acylation of the substituent in the 6 position
Déposants
  • CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS [ES/ES]; C/ Serrano 117 E-28006 Madrid, ES (AllExceptUS)
  • GRAZU BONAVIA, Valeria [UY/ES]; ES (UsOnly)
  • GUISAN SEIJAS, Jose Manuel [ES/ES]; ES (UsOnly)
  • FERNÁNDEZ LAFUENTE, Roberto [ES/ES]; ES (UsOnly)
  • ABIAN FRANCO, Olga [ES/ES]; ES (UsOnly)
  • MONTES FERNÁNDEZ, Tamara [ES/ES]; ES (UsOnly)
  • MATEO GONZALEZ, Cesar [ES/ES]; ES (UsOnly)
  • GONZALEZ GARCÍA, Ramón [ES/ES]; ES (UsOnly)
  • HERMOSO DOMÍNGUES, Juan Antonio [ES/ES]; ES (UsOnly)
  • GARCIA LOPEZ, Jose Luis [ES/ES]; ES (UsOnly)
Inventeurs
  • GRAZU BONAVIA, Valeria; ES
  • GUISAN SEIJAS, Jose Manuel; ES
  • FERNÁNDEZ LAFUENTE, Roberto; ES
  • ABIAN FRANCO, Olga; ES
  • MONTES FERNÁNDEZ, Tamara; ES
  • MATEO GONZALEZ, Cesar; ES
  • GONZALEZ GARCÍA, Ramón; ES
  • HERMOSO DOMÍNGUES, Juan Antonio; ES
  • GARCIA LOPEZ, Jose Luis; ES
Données relatives à la priorité
P20060142430.05.2006ES
Langue de publication espagnol (ES)
Langue de dépôt espagnol (ES)
États désignés
Titre
(EN) IMMOBILIZED AND STABILIZED MUTATED PENICILLIN G ACYLASE ENZYME, PROCESS FOR OBTAINING IT AND ITS APPLICATIONS
(ES) ENZIMA PENICILINA G ACILASA MUTADA INMOVILIZADA Y ESTABILIZADA, PROCEDIMIENTO DE OBTENCIÓN Y SUS APLICACIONES
(FR) ENZYME PÉNICILLINE G ACYLASE MUTÉE, IMMOBILISÉE ET STABILISÉE, SON PROCÉDÉ D'OBTENTION ET SES APPLICATIONS
Abrégé
(EN)
The present invention describes different PGA enzyme mutants prepared by inserting one (1) Cys (in each mutant) in a different region of the surface of the enzyme which was relatively rich in lysine residues as well as immobilized forms on disulphide/epoxide supports and with additional mutations which increase their stability with respect to the effect of heat and organic solvents (300,000 times more stable than the corresponding soluble enzyme). The excellent stability of these enzymatic derivatives makes them very useful for catalysing different industrial processes of interest in organic and pharmaceutical chemistry: hydrolysis of penicillin, synthesis reactions in the presence or absence of solvents and enantioselective hydrolysis and synthesis reactions.
(ES)
En la presente invención se describen diferentes mutantes de la enzima PGA preparados mediante la inserción de una (1) Cys (en cada mutante) en una región diferente de la superficie de la enzima que fuese relativamente rica en residuos lisina, así como formas inmovilizadas sobre soportes disulfuro-epóxido, y con mutaciones adicionales que incrementan su estabilidad frente al efecto del calor y los disolventes orgánicos (300.000 veces más estables que la correspondiente enzima soluble). La excelente estabilidad de estos derivados enzimáticos los hace muy útiles para catalizar diferentes procesos industriales de interés en química orgánica y farmacéutica: hidrólisis de penicilina, reacciones de síntesis en presencia o ausencia de disolventes y reacciones de hidrólisis y síntesis enantioselectivas.
(FR)
La présente invention concerne différents mutants de l'enzyme PGA préparés par insertion d'une (1) Cys (dans chaque mutant) dans une région différente de la surface de l'enzyme relativement riche en résidus lysine, ainsi que des formes immobilisées sur des supports de disulfure/époxyde, et avec des mutations supplémentaires qui augmentent leur stabilité par rapport à la chaleur et aux dissolvants organiques (300 000 fois plus stables que l'enzyme correspondante soluble). Grâce à leur excellente stabilité, ces dérivés enzymatiques sont très utiles pour catalyser différents processus industriels présentant un intérêt en chimie organique et pharmaceutique: l'hydrolyse de la pénicilline, des réactions de synthèse en présence ou non de dissolvants et des réactions d'hydrolyse et de synthèse énantiosélectives.
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