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1. WO2005003356 - ENDO-$G(B)-(1?6)-GALACTANASE

Numéro de publication WO/2005/003356
Date de publication 13.01.2005
N° de la demande internationale PCT/JP2004/000334
Date du dépôt international 16.01.2004
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 27.04.2005
CIB
C12N 9/24 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
9Enzymes, p.ex. ligases (6.); Proenzymes; Compositions les contenant; Procédés pour préparer, activer, inhiber, séparer ou purifier des enzymes
14Hydrolases (3.)
24agissant sur les composés glycosyliques (3.2)
C12N 15/82 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
63Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
79Vecteurs ou systèmes d'expression spécialement adaptés aux hôtes eucaryotes
82pour cellules végétales
CPC
C07K 2319/00
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
2319Fusion polypeptide
C12N 15/8289
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
82for plant cells ; , e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
8261with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
8287for fertility modification, e.g. apomixis
8289Male sterility
C12N 9/2471
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
14Hydrolases (3)
24acting on glycosyl compounds (3.2)
2402hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
2468acting on beta-galactose-glycoside bonds, e.g. carrageenases (3.2.1.83; 3.2.1.157); beta-agarase (3.2.1.81)
2471Beta-galactosidase (3.2.1.23), i.e. exo-(1-->4)-beta-D-galactanase
C12Y 302/01164
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
YENZYMES
302Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
01Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
01164Galactan endo-1,6-beta-galactosidase (3.2.1.164)
Déposants
  • JAPAN SCIENCE AND TECHNOLOGY AGENCY [JP/JP]; 1-8, Honcho 4-chome, Kawaguchi-shi, Saitama 3320012, JP (AllExceptUS)
  • 小竹 敬久 KOTAKE, Takahisa [JP/JP]; JP (UsOnly)
  • 円谷 陽一 TSUMURAYA, Yoichi [JP/JP]; JP (UsOnly)
Inventeurs
  • 小竹 敬久 KOTAKE, Takahisa; JP
  • 円谷 陽一 TSUMURAYA, Yoichi; JP
Mandataires
  • 廣田 雅紀 HIROTA, Masanori; 〒1070052 東京都港区赤坂二丁目8番5号若林ビル3階 Tokyo 3F, Wakabayashi Building, 8-5, Akasaka 2-chome Minato-ku Tokyo 1070052, JP
Données relatives à la priorité
2003-18829330.06.2003JP
Langue de publication japonais (JA)
Langue de dépôt japonais (JA)
États désignés
Titre
(EN) ENDO-&bgr;-(1→6)-GALACTANASE
(FR) ENDO-$G(B)-(1?6)-GALACTANASE
(JA) エンド-β-(1→6)-ガラクタナーゼ
Abrégé
(EN)
It is intended to provide a novel endo-&bgr;-(1→6)-galactanase, its gene, etc. which are expected as useful in clarifying the functions of AGP having various physiological functions such as regulation of pollen tube growth and regulation of reproduction of plants and, therefore, applicable to the construction of transformed plants (male sterility, etc.), food processing, drugs and enzymes for constructing protoplasts. &bgr;-(1→6)-galactanse is purified 57-fold from Onozuka R-10, which is a marketed cellulase preparation, and analyzed by using galactan originating in Prototheca zopfii. As a result, it shows the peak activity at pH 4.3 and specifically hydrolyzes &bgr;-(1→6)-galactooligosaccharides with degree of polymerization of 3 or higher and derivatives having a 4-O-methyl-glucosyluron or a glucosyluron group at the nonreducing end. Next, the full-length cDNA of this enzyme is prepared by the 3’- and 5’-RACE-PCR with the use of T.viride spore-origin RNA as a template.
(FR)
La présente invention concerne une nouvelle endo-$g(b)-(1?6)-galactanase, un gène codant pour celle-ci, etc. qui sont susceptibles d'être utiles pour clarifier les fonctions d'AGP ayant différentes fonctions physiologiques telles que la régulation de la croissance du tube pollinique et la régulation de la reproduction des végétaux, et de ce fait, susceptibles de s'appliquer à la production de végétaux modifiés (stérilité mâle, etc.), au traitement alimentaire, agents pharmaceutiques et enzymes pour la production de protoplastes. La $g(b)-(1?6)-galactanase est purifiée par repli 57 à partir de Onozuka R-10 qui est une préparation de cellulase marquée, et analysée par utilisation de galactane provenant de Prototheca zopfii. En conséquence, elle a une activité maximale à pH 4,3 et hydrolyse spécifiquement des $g(b)-(1?6)-galactooligosaccharides avec un degré de polarisation d'au moins 3 et des dérivés présentant un groupe 4-O-méthyl-glucosylurone ou glucosylurone à leur extrémité non réductrice. Ensuite, l'ADNc pleine longueur de cette enzyme est préparée par 3'- ou 5'-RACE-PCR avec utilisation d'ARN provenant des spores de T. viride en tant que matrice.
(JA)
花粉管の生長制御機能など植物の生長、生殖制御など多様な生理機能を有するAGPの機能解明に有用であり、雄性不稔などの形質転換植物への応用や食品加工、医薬品、プロトプラスト作製用酵素への応用が期待できる新規なエンド−β−(1→6)−ガラクタナーゼやその遺伝子等を提供するものである。市販のセルラーゼ調製物であるOnozuka R-10からβ−(1→6)−ガラクタナーゼを57倍に精製してPrototheca zopfii由来のガラクタンを用いて分析したところ、pH4.3で最大の活性を示し、重合度3以上のβ−(1→6)−ガラクトオリゴ糖類、及び4−O−メチル−グルコシルロン基又はグルコシルロン基を非還元末端に有する誘導体を特異的に加水分解した。次いで、T.viride胞子体由来のRNAを鋳型として、3'及び5'RACE−PCRにより本酵素の完全長のcDNAを作製した。
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