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1. (WO2002086088) POLYMERASES A ACTIVITE DE COMMUTATION DE CHARGES ET METHODES PERMETTANT DE PRODUIRE LESDITES POLYMERASES
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2002/086088    N° de la demande internationale :    PCT/US2002/013026
Date de publication : 31.10.2002 Date de dépôt international : 24.04.2002
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    15.11.2002    
CIB :
C12N 9/12 (2006.01), C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : LI-COR, INC. [US/US]; Biotechnology Division, 4308 Progressive Avenue, Lincoln, NE 68504 (US) (Tous Sauf US).
WILLIAMS, John, G., K. [US/US]; (US) (US Seulement)
Inventeurs : WILLIAMS, John, G., K.; (US)
Mandataire : SNYDER, Joseph, R.; Townsend and Townsend and Crew LLP, Two Embarcadero Center, Eighth Floor, San Francisco, CA 94111 (US)
Données relatives à la priorité :
60/286,238 24.04.2001 US
60/314,746 24.08.2001 US
Titre (EN) POLYMERASES WITH CHARGE-SWITCH ACTIVITY AND METHODS OF GENERATING SUCH POLYMERASES
(FR) POLYMERASES A ACTIVITE DE COMMUTATION DE CHARGES ET METHODES PERMETTANT DE PRODUIRE LESDITES POLYMERASES
Abrégé : front page image
(EN)This invention provides DNA polymerases with mutations in the charge-switch nucleotide interaction region that increase activity for charge-switch nucleotides. Such polymerases can be generated by introducing mutations in specific residues which are identified as being in the appropriate region through structural models, by homology to polymerases with known structures, or experimental analysis. In some embodiments, the mutant DNA polymerases have additional mutations that decrease activity for non-charge-switch nucleotides and mutations thatdecrease exonuclease activity. In another aspect, the invention provides methods of sequencing a target nucleic acid with the above described mutated DNA polymerases. In yet another aspect, the invention provides methods of generating polypeptides having charge-switch nucleotide polymerase activity by introducing 'random' mutations and selecting those mutated polypeptides that encode polypeptides having charge-switch nucleotide activity.
(FR)L'invention concerne des ADN polymérases qui présentent des mutations dans la région d'interaction des nucléotides à commutation de charges et qui renforcent l'activité pour les nucléotides à commutation de charges. Ces polymérases peuvent être générées par introduction de mutations dans des résidus spécifiques qui sont identifiés comme étant présents dans la région appropriée par des modèles structurels, par homologie avec des polymérases présentant des structures connues ou par analyse expérimentale. Dans certains modes de réalisation, les ADN polymérases mutantes présentent des mutations supplémentaires qui réduisent l'activité pour les nucléotides sans commutation de charges ainsi que des mutations qui réduisent l'activité des exonucléases. Dans un autre aspect, l'invention concerne des méthodes permettant de séquencer un acide nucléique cible avec les ADN polymérases décrites ci-dessus. Dans un autre aspect, l'invention concerne des méthodes permettant de générer des polypeptides qui présentent une activité de polymérase à nucléotides à commutation de charges par introduction de mutations 'aléatoires' et par sélection des polypeptides mutés qui codent pour des polypeptides ayant une activité de nucléotides à commutation de charges.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NO, NZ, OM, PH, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (GH, GM, KE, LS, MW, MZ, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)