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1. (WO2002019594) MICROSCOPE DE DETERMINATION DE LA DUREE DE VIE DE FLUORESCENCE A BALAYAGE A INTERFACE INFORMATIQUE UTILISE DANS LES TECHNIQUES D'EVOLUTION DIRIGEE ET METHODES DE STRUCTURATION PHOTO-INDUITE UTILISEES DANS LA SELECTION CELLULAIRE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2002/019594    N° de la demande internationale :    PCT/US2001/024365
Date de publication : 07.03.2002 Date de dépôt international : 02.08.2001
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    17.01.2002    
CIB :
G02B 21/16 (2006.01)
Déposants : ARIZONA BOARD OF REGENTS, acting on behalf of ARIZONA STATE UNIVERSITY [US/US]; Box 873511, Tempe, AZ 85287-3511 (US) (Tous Sauf US).
WOODBURY, Neal, T. [US/US]; (US) (US Seulement).
BOWEN, Benjamin, P. [US/US]; (US) (US Seulement).
SCRUGGS, Allan [US/US]; (US) (US Seulement)
Inventeurs : WOODBURY, Neal, T.; (US).
BOWEN, Benjamin, P.; (US).
SCRUGGS, Allan; (US)
Mandataire : BONNER, Cynthia, A.; Christie, Parker & Hale LLP, Post Office Box 7068, Pasadena, CA 91109-7068 (US)
Données relatives à la priorité :
60/222,691 02.08.2000 US
Titre (EN) SCANNING FLUORESCENCE LIFETIME MICROSCOPE: DIRECTED EVOLUTION
(FR) MICROSCOPE DE DETERMINATION DE LA DUREE DE VIE DE FLUORESCENCE A BALAYAGE A INTERFACE INFORMATIQUE UTILISE DANS LES TECHNIQUES D'EVOLUTION DIRIGEE ET METHODES DE STRUCTURATION PHOTO-INDUITE UTILISEES DANS LA SELECTION CELLULAIRE
Abrégé : front page image
(EN)This invention provides a method for screening large numbers of individual cells or colonies of cells using scanning microscopy coupled with fluorescence lifetime measurement and analysis, using time-correlated single photon counting. This invention further provides an automated method for selecting cells that exhibit desired characteristics. The method uses the scanning microscope system to focus a laser beam onto a surface upon which cells immobilized on the timescale of the procedure. The cells that are illuminated in this way are killed or their growth is inhibited. The focused laser beam is scanned across the surface and turned on and off during the scanning process such that only non-irradiated cells survive, resulting in a patterned cell growth. This invention further provides a computer-controlled projection device, such as micro-mirror array or a liquid crystal display system which is used to project an image onto the cells.
(FR)L'invention concerne une méthode de criblage d'un grand nombre de cellules individuelles ou de colonies de cellules par microscopie à balayage couplée à la mesure et à l'analyse de la durée de vie de fluorescence, par comptage des photons à corrélation dans le temps. La mise en image des données de durée de la fluorescence des cellules et/ou des colonies sur une surface et l'analyse de ces données sont commandées et exécutées rapidement et de manière automatique par ordinateur. Cette méthode de criblage, ou toute technique d'imagerie à résolution adaptée, peut être utilisée soit avec des méthodologies de croissance cellulaire structurée photo-induite, également proposées par l'invention, soit avec des méthodes mécaniques de sélection de cellules individuelles ou de colonies à partir de leurs propriétés fluorescentes. L'invention concerne également une méthode automatique de sélection de cellules présentant des caractéristiques désirées. On utilise dans cette méthode un système de microscope à balayage commandé par ordinateur pour orienter un faisceau laser sur une surface sur laquelle les cellules sont immobilisées selon le déroulement temporel de la méthode. Les cellules illuminées de cette manière sont tuées ou leur croissance est inhibée. Le faisceau laser focalisé est balayé sur la surface puis activé et désactivé au cours du processus de balayage de manière que puissent survivre uniquement les cellules non irradiées, générant une croissance cellulaire structurée. Dans un autre mode de réalisation de cette méthode de sélection de cellules à croissance structurée, un dispositif de projection commandé par ordinateur, par exemple un réseau de micro-miroirs ou un système d'affichage à cristaux liquides, est utilisé pour projeter une image sur les cellules. Les cellules sur lesquelles cette image est projetée sont tuées ou leur croissance est inhibée, produisant encore une fois une croissance structurée des cellules. Grâce à cette invention, les cellules peuvent être sélectionnées avec une haute résolution spatiale, et un grand nombre de cellules peut être traité. L'invention permet de sélectionner les cellules désirées dans les techniques d'évolution dirigée, étant donné que les cellules peuvent être sélectionnées avec une haute résolution à des dimensions sous visuelles, permettant de traiter un grand nombre de cellules à la fois, sans nécessiter de marqueurs de résistance antibiotique ou de croissance sur les milieux sélectifs dépourvus des nutriments nécessaires. De plus, la structuration cellulaire peut être essentiellement utilisée avec tout type de cellule, y compris des cellules de levure et de mammifères, à l'aide de sensibilisateurs chimiques modifiés ou sélectionnés de manière appropriée.
États désignés : CA, JP, US.
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, TR).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)