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1. WO2000031101 - PROCEDE DE DETECTION ELECTROCHIMIQUE D'HYBRIDES D'ACIDES NUCLEIQUES-OLIGOMERES

Numéro de publication WO/2000/031101
Date de publication 02.06.2000
N° de la demande internationale PCT/EP1999/008888
Date du dépôt international 19.11.1999
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 08.06.2000
CIB
C07H 21/00 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
07CHIMIE ORGANIQUE
HSUCRES; LEURS DÉRIVÉS; NUCLÉOSIDES; NUCLÉOTIDES; ACIDES NUCLÉIQUES
21Composés contenant au moins deux unités mononucléotide comportant chacune des groupes phosphate ou polyphosphate distincts liés aux radicaux saccharide des groupes nucléoside, p.ex. acides nucléiques
C12Q 1/68 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
QPROCÉDÉS DE MESURE OU DE TEST FAISANT INTERVENIR DES ENZYMES, DES ACIDES NUCLÉIQUES OU DES MICRO-ORGANISMES; COMPOSITIONS OU PAPIERS RÉACTIFS À CET EFFET; PROCÉDÉS POUR PRÉPARER CES COMPOSITIONS; PROCÉDÉS DE COMMANDE SENSIBLES AUX CONDITIONS DU MILIEU DANS LES PROCÉDÉS MICROBIOLOGIQUES OU ENZYMOLOGIQUES
1Procédés de mesure ou de test faisant intervenir des enzymes, des acides nucléiques ou des micro-organismes; Compositions à cet effet; Procédés pour préparer ces compositions
68faisant intervenir des acides nucléiques
CPC
C07H 21/00
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
HSUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
21Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
C12Q 1/6825
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS
1Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms
68involving nucleic acids
6813Hybridisation assays
6816characterised by the detection means
6825Nucleic acid detection involving sensors
Déposants
  • FRIZ BIOCHEM GMBH [DE]/[DE] (AllExceptUS)
  • HARTWICH, Gerhard [DE]/[DE] (UsOnly)
  • HELLER, Adam [US]/[US] (UsOnly)
Inventeurs
  • HARTWICH, Gerhard
  • HELLER, Adam
Mandataires
  • GRAPE, Knut
Données relatives à la priorité
198 53 957.623.11.1998DE
199 21 940.029.04.1999DE
Langue de publication allemand (DE)
Langue de dépôt allemand (DE)
États désignés
Titre
(DE) VERFAHREN ZUR ELEKTROCHEMISCHEN DETEKTION VON NUKLEINSÄUREOLIGOMERHYBRIDEN
(EN) METHOD FOR THE ELECTROCHEMICAL DETECTION OF NUCLEIC ACID OLIGOMER HYBRIDS
(FR) PROCEDE DE DETECTION ELECTROCHIMIQUE D'HYBRIDES D'ACIDES NUCLEIQUES-OLIGOMERES
Abrégé
(DE)
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur elektrochemischen Detektion von sequenzspezifischen Nukleinsäure-Oligomer-Hybridisierungsereignissen. Dabei dienen DNA-/RNA-/PNA-Oligomer-Einzelstränge, die mit einem Ende kovalent auf einer Trägeroberfläche angebunden und am anderen, freien Ende kovalent mit einem Redoxpaar verknüpft sind, als Hybridisierungsmatrix ('Sonde'). Durch Behandlung mit der zu untersuchenden Oligonukleotid-Lösung ('Target') wird die ursprünglich nicht oder nur schwach vorhandene elektrische Kommunikation zwischen der leitfähigen Trägeroberfläche und dem über Einzelstrang-Oligonukleotid verbrückten Redoxpaar verändert. Im Falle der Hybridisierung wird die elektrische Kommunikation zwischen der Trägeroberfläche und dem nunmehr über hybridisiertes Doppelstrang-Oligonukleotid verbrückten Redoxpaar verstärkt. Somit wird die Detektion eines Hybridisierungsereignisses durch elektrochemische Verfahren wie cyclische Voltametrie, Amperometrie oder Leitfähigkeitsmessung ermöglicht.
(EN)
The invention relates to a method for the electrochemical detection of sequence-specific nucleic acid oligomer hybridization events. To this end single DNA/RNA/PNA oligomer strands which at one end are covalently joined to a support surface and at the other, free end, covalently linked to a redox pair, are used as hybridization matrix (probe). As a result of treatment with the olignucleotide solution (target) to be examined, the electric communication between the conductive support surface and the redox pair bridged by the single-strand oligonucleotide, which communication initially is either absent or very weak, is modified. In case of hybridization, electric communication between the surface support and the redox pair, which is now bridged by a hybridized double-strand oligonucleotide, is increased. This permits the detection of a hybridization event by electrochemical methods such as cyclic voltametry, amperometry or conductivity measurement.
(FR)
La présente invention concerne un procédé de détection électrochimique d'événements d'hybridation d'acides nucléiques-oligomères spécifiques à des séquences. A cet effet on utilise des brins simples d'ADN/ARN/APN-oligomères, qui sont liés, à une extrémité, de façon covalente sur une surface porteuse, et, à l'autre extrémité, qui est libre, sont rattachés de façon covalente avec une paire redox, comme matrice d'hybridation ('sonde'). A cause du traitement avec la solution oligonucléotidique ('cible') à analyser, la communication électrique entre la surface porteuse conductrice et la paire redox pontant l'oligonucléotide à brin simple, laquelle, à l'origine, est inexistante ou seulement faible, est modifiée. En cas d'hybridation, la communication électrique entre la surface porteuse et l'oligonucléotide et la paire redox pontant maintenant l'oligonucléotide double brin hybridé est amplifiée. Ainsi, il est possible de procéder à la détection d'un événement d'hybridation selon un procédé électrochimique tel que la voltamétricyclique, l'ampérométrie ou la mesure de la conductivité.
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