Die Erfindung betrifft eine Methode zur Identifizierung und Darstellung interindividueller DNA-Sequenzunterschiede. Sie ist dadurch gekennzeichnet, daß man die genomische DNA der zu untersuchenden Individuen isoliert, Segmente der zu vergleichenden Gene, genomischen Regionen, Genome definiert, diese Segmente mittels PCR unter Verwendung hochspezifischer Oligonukleotide gezielt isoliert und in einer ausreichenden Anzahl von Kopien herstellt, eine simultane Sequenzierung aller gewonnenen Gensegmente, die nun als PCR-Produkte vorliegen, durchführt, das dadurch entstehende Gemisch von Terminationsreaktionen, das die individuellen Sequenzen aller Gensegmente enthält, anschliessend auf einem Sequenziergel elektrophoretisch trennt und mittels direkter Transferelektrophorese auf eine Membran überträgt, anschliessend durch Hybridisierung der Membran mit einem markierten, hochspezifischen Oligonukleotid die individuellen Sequenzen eines bestimmten Gensegmentes aus dem ursprünglichen Gemisch sichtbar macht, diesen Vorgang so oft wiederholt, bis alle Gensegmente aus dem ursprünglichen Pool detektiert sind, und anschliessend durch Image-Analyse interindividuelle DNA-Sequenzunterschiede detektiert, und durch mathematische Aufarbeitung ein Genprofilmuster erstellt und auswertet.

The invention relates to a method for identifying and representing interindividual differences of DNA sequences. The invention is characterized in that; the genomic DNA of the individuals to be examined are isolated; segments of the genes to be compared, genomic regions, and genomes are defined; these segments are isolated in a targeted manner by means of PCR while using highly specific oligonucleotides and are produced in a sufficient number of copies; a simultaneous sequencing of all obtained gene segments is carried out, said gene segments now being available as PCR products; afterwards, the mixture of termination reactions which is produced thereby and which contains the individual sequences of all gene segments is electrophoretically separated on a sequencing gel; the mixture is transferred onto a membrane by means of direct transfer electrophoresis; afterwards, the individual sequences of a determined gene segment from the original mixture are made visible by hybridizing the membrane with a marked, highly specific oligonucleotide; this process is repeated unit all gene segments from the common pool are detected; afterwards, interindividual differences of DNA sequences are detected by image analysis, and a genetic profile model is established and evaluated by mathematical processing.

L'invention concerne une méthode pour l'identification et la représentation de différences interindividuelles de séquences d'ADN. Elle est caractérisée en ce que l'on isole l'ADN génomique des individus à analyser, on définit des segments des gènes, des régions génomiques et des génomes à comparer, on isole de manière ciblée ces segments au moyen de l'amplification en chaîne par polymérase en utilisant des oligonucléotides très spécifiques, et on en fabrique un nombre suffisant de copies, on réalise un séquençage simultané de tous les segments géniques obtenus qui se présentent désormais sous la forme de produits d'amplification en chaîne par polymérase, on sépare ensuite par voie électrophorétique sur un gel de séquençage le mélange ainsi formé issu des réactions de terminaison et contenant les séquences individuelles de tous les segments géniques, et on le transfère sur une membrane par électrophorèse directe de transfert, puis on met en évidence, par hybridation de la membrane avec un oligonucléotide très spécifique marqué, les séquences individuelles d'un segment génique déterminé provenant du mélange initial, on répète cette opération jusqu'à ce que tous les segments géniques provenant du groupe initial soient détectés, et on détecte ensuite par analyse d'image les différences interindividuelles de séquences d'ADN, et on établit et on évalue par traitement mathématique un modèle de profil génique.