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1. (WO1993018146) PROTEINES FORMANT DES COMPLEXES AVEC DES CHAPERONES ET LEURS LIGANDS, LEURS FRAGMENTS, LEUR OBTENTION ET LEURS APPLICATIONS BIOLOGIQUES
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REVENDICATIONS

1/ Séquences de nucieotides, caractérisées en ce qu'elles comprennent ou qu'elles sont formées par un enchaînement de nucieotides capable de s'hybrider, dans des conditions stringentes, avec une ou plusieurs séquences d'un gène dont 1 'ADNc présente une séquence correspondant à 1 ' enchaînement ( I ) de nucieotides.
2/ Séquences de nucieotides, caractérisées en ce qu'elles contiennent l'information génétique pour coder pour tout ou partie de la protéine répondant à l'enchaînement II.
3/ Séquences de nucieotides, caractérisées en ce qu'elles sont formées, ou qu'elles comprennent, au moins une partie de l'enchaînement I.
4/ Séquences de nucieotides selon la revendication 3, constituées par une partie ou la totalité du cadre ouvert de lecture allant dans 1 'enchaînement ( I ) de la position 4 à la position 1380.
5/ Séquences de nucieotides selon la revendication 3, capables de coder pour une protéine potentielle de 458 acides aminés répondant à l'enchaînement II.
6/ Séquences de nucieotides selon l'une des revendications précédentes, caractérisées en ce qu'elles comportent l'information génétique pour coder pour une ou plusieurs séquences d'acides aminés de l'enchaînement II correspondant à une région capable de se lier avec un immunosuppresseur du type FK 506 et possédant les caractéristiques structurales pour une activité rotamase.
7/ Séquences de nucieotides selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisées en ce qu'elles comportent l'information génétique pour coder pour une ou plusieurs séquences d'acides aminés de l'enchaînement II, correspondant à une région capable de se lier à 1 'ATP/GTP.
8/ Séquences de nucieotides selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisées en ce qu'elles comportent l' information génétique pour coder pour une ou plusieurs séquences d'acides aminés de l'enchaînement II correspondant à une région capable de se lier à la calmoduline.
9/ Séquence recombinante comprenant l'une des séquences de nucieotides définies dans l'une quelconque des revendications 1 à 8, le cas échéant associée à un promoteur capable de contrôler la transcription de la séquence et une séquence d'ADN codant pour les signaux de terminaison de la transcription.
10/ Séquences de nucieotides selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisées en ce qu'elles renferment des séquences codantes pour des protéines chaperones, en particulier des séquences codantes pour la hsp90, notamment pour la région A hydrophile de cette protéine.
11/ Les ARN et les séquences complémentaires des différents enchaînements nucléotidiques définis dans l'une des revendications 1 à 10, ainsi que les protéines codées correspondantes.
12/ Vecteurs recombinants de clonage et d'expression capables de transformer une cellule hôte appropriée, comportant au moins une partie d'une séquence de nucieotides selon 1 'une quelconque des revendications 1 à 11, sous le contrôle d'éléments de régulation permettant son expression.
13/ Souches de microorganismes transformées ou transfectées, caractérisées en ce qu'elles comportent au moins 1 'une des séquences de nucieotides définies dans l'une des revendications 1 à 11, ou encore un vecteur recombinant tel que défini dans la revendication 12.
14/ Séquences d' acides aminés déduites, selon le code génétique universel, des séquences de nucieotides selon l'une des revendications 1 à 11 et les protéines exprimées par les gènes comportant ces séquences.
15/ Séquences d'acides aminés selon la revendication 14, caractérisées en ce qu'elles correspondent à des séquences capables de se lier à des protéines de choc thermique ou qu'elles possèdent les propriétés de ces protéines, et qu'en particulier elles sont des séquences codantes pour des protéines chaperones, en particulier des séquences codantes pour la hsp90, notamment pour la région A hydrophile de cette protéine.
16/ Séquences d'acides aminés selon l'une des revendications 14 ou 15, caractérisées en ce qu'elles possèdent un ou plusieurs domaines du type de la FKBP, identiques ou différents, en particulier qu'elles possèdent les caractéristiques structurales pour une liaison avec un immunosuppresseur du type FK506 et pour une activité rotamase, et/ou qu'elles comportent un site de liaison à l'ATP, et/ou une séquence consensus de liaison à la calmoduline, et/ou qu'elles correspondent aux régions charnières entre deux domaines.
17/ Séquences d'acides aminés selon l'une des revendications 10 à 16, caractérisées en ce qu'elles sont telles qu'obtenues par transformation de cellules hôtes au moyen d'un vecteur recombinant selon la revendication 12, mise en culture, dans un milieu approprié, des cellules hôtes transformées ou transfectées et récupération de la protéine à partir de ces cellules, ou directement à partir du milieu de culture.
18/ Les complexes des protéines des séquences d'acides aminés selon l'une des revendications 1, 4 à 17 avec la hsp90 ou avec d'autres protéines de choc thermique impliquées dans ces hétéro-oligomères, ou avec des régions de ces différentes protéines.
19/ Anticorps polyclonaux et monoclonaux capables de reconnaître spécifiquement les séquences d'acides aminés et les complexes selon l'une des revendications 14 à 18.
20/ Application des séquences de nucieotides selon l'une des revendications 1 à 11 pour l'élaboration de sondes de détection de gènes codant pour des protéines formant des complexes avec des chaperones et leurs ligands.
21/ Procédé de détection in vitro de la présence dans un échantillon biologique de séquences de nucieotides complémentaires de celles définies dans l'une des revendications 1 à 11, comprenant les étapes de
- mise en contact de l'échantillon à étudier avec une sonde nucléotidique élaborée à l'aide d'une séquence selon l'une des revendications 1 à 11, dans des conditions permettant une hybridation entre la sonde et la séquence de nucieotides recherchée, et
- détection du complexe d'hybridation.
22/ Kits pour la détection in vitro de la présence dans un échantillon biologique de séquences de nucieotides complémentaires de celles définies dans l'une des revendications 1 à 11, caractérisés en ce qu'ils comprennent
- une quantité déterminée d'une sonde nucléotidique élaborée à partir d'une séquence de nucieotides selon l'une des revendications 1 à 11,
- un milieu approprié à l'hybridation entre la sonde utilisée et la séquence à détecter, et avantageusement,
- des réactifs permettant la détection des complexes d'hybridation formés.
23/ Méthode de dépistage in vitro dans un échantillon biologique de la présence éventuelle des produits d'expression des séquences de nucieotides selon l'une des revendications 1 à 11 ou ceux des gènes codant pour une protéine de choc thermique, caractérisée en ce qu'elle comprend
- la mise en contact de l'échantillon à étudier avec un anticorps selon la revendication 19, dans des conditions permettant la formation d'un complexe immunologique entre tout ou partie des protéines exprimées par les séquences nucléotidiques et cet anticorps, et
- la détection du complexe immunologique.
24/ Kits pour la détection in vitro dans un échantillon biologique de la présence éventuelle des produits d'expression des séquences de nucieotides selon l'une des revendications 1 à 11 ou ceux des gènes codant pour une protéine de choc thermique, caractérisés en ce qu' ils comprennent :
une quantité déterminée d'un anticorps polyclonal ou monoclonal selon la revendication 19,
- un milieu approprié à la réalisation d' une réaction immunologique entre au moins une partie des produits exprimés et l'anticorps et, avantageusement,
des réactifs permettant la détection des complexes immunologiques formés.