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1. (WO1993018138) NOUVELLE REDUCTASE D'ESTERS CETONIQUES, FABRICATION ET UTILISATION POUR DES REACTIONS REDOX ENZYMATIQUES
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international

N° de publication : WO/1993/018138 N° de la demande internationale : PCT/DE1993/000198
Date de publication : 16.09.1993 Date de dépôt international : 05.03.1993
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 : 06.09.1993
CIB :
C12N 9/04 (2006.01) ,C12P 7/62 (2006.01)
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
N
MICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
9
Enzymes, p.ex. ligases (6.); Proenzymes; Compositions les contenant; Procédés pour préparer, activer, inhiber, séparer ou purifier des enzymes
02
Oxydoréductases (1.), p.ex. luciférase
04
agissant sur des groupes CHOH comme donneurs, p.ex. oxydase de glucose, déshydrogénase lactique (1.1)
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
P
PROCÉDÉS DE FERMENTATION OU PROCÉDÉS UTILISANT DES ENZYMES POUR LA SYNTHÈSE D'UN COMPOSÉ CHIMIQUE DONNÉ OU D'UNE COMPOSITION DONNÉE, OU POUR LA SÉPARATION D'ISOMÈRES OPTIQUES À PARTIR D'UN MÉLANGE RACÉMIQUE
7
Préparation de composés organiques contenant de l'oxygène
62
Esters des acides carboxyliques
Déposants :
FORSCHUNGSZENTRUM JÜLICH GMBH [DE/DE]; Wilhelm-Johnen-Straße D-5170 Jülich, DE (AllExceptUS)
KULA, Maria-Regina [DE/DE]; DE (UsOnly)
PETERS, Jörg [DE/DE]; DE (UsOnly)
Inventeurs :
KULA, Maria-Regina; DE
PETERS, Jörg; DE
Représentant
commun :
FORSCHUNGSZENTRUM JÜLICH GMBH; Rechts- und Patentabteilung Postfach 1913 D-52425 Jülich, DE
Données relatives à la priorité :
P 42 07 921.713.03.1992DE
Titre (DE) NEUE KETOESTER-REDUKTASE, DEREN HERSTELLUNG UND VERWENDUNG FÜR ENZYMATISCHE REDOXREAKTIONEN
(EN) NEW KETONIC ESTER REDUCTASES, ITS PREPARATION AND USE FOR ENZYMATIC REDOX REACTIONS
(FR) NOUVELLE REDUCTASE D'ESTERS CETONIQUES, FABRICATION ET UTILISATION POUR DES REACTIONS REDOX ENZYMATIQUES
Abrégé :
(DE) Aus Stämmen von Candida parapsilosis, Yarrowinia cellobiosa, Rhodococcus erythropolis oder Pseudomonas acidovorans ist ein als Ketoester-Reduktase bezeichnetes Enzym isolierbar, das zur NADH-abhängigen enzymatischen Umsetzung von $g(b)-, $g(g)- und $g(d)-Ketocarbonsäureestern zu den entsprechenden optisch aktiven $g(b)-, $g(g)- und $g(d)-Hydroxycarbonsäureestern befähigt ist. Die Kultivierung erfolgt vorzugsweise auf einem längerkettige Alkane und/oder Alkansäuren enthaltenden Nährmedium, zweckmäßigerweise in Gegenwart eines Induktors. Aus dem Zellrohextrakt kann ein brauchbares Enzympräparat durch fraktionierte PEG-Fällung gewonnen werden; durch anschließende chromatographische Aufreinigung können hohe spezifische Aktivitäten (z.B. 1855 U/mg) erzielt werden. Das Enzym zeichnet sich durch ein breites Substratspektrum aus: so werden nicht nur die genannten (ggf. substituierten) Ketoester akzeptiert, sondern eine Vielzahl weiterer Oxo-Verbindungen, zu denen Diketone, (ggf. substituierte, insb. halogenierte) aliphatische, alicyclische und aromatische Ketone sowie Ketoacetale und Aldehyde gehören. Die Reduktion unter Bildung von S-Enantiomeren wird durch die Möglichkeit zur Gewinnung von R-Enantiomeren aus Racematen durch Oxidation des S-Enantiomeren und Abtrennung der Oxo-Verbindung ergänzt.
(EN) An enzyme designated as ketonic ester reductase capable of being used in the NADH-dependent enzymatic reaction of $g(b), $g(g) and $g(d) ketonic acid esters into the corresponding optically active $g(b), $g(g) and $g(d) hydroxycarboxylic acid esters can be isolated from strains of Candida parapsilosis, Yarrowinia cellobiosa, Rhodococcus erythropolis or Pseudomonas acidovorans, preferably cultivated on a long-chain alkane and/or alkane acid-containing culture medium, appropriately in the presence of an inductor. An usable enzyme preparation can be recovered by fractionated PEG-precipitation from the cell raw extract; high specific activities (for example 1855 U/mg) may then be obtained by chromatographic purification. The enzyme is characterized by a wide substrate spectrum. Not only (possibly substituted) so-called ketonic esters are accepted, but also a number of other oxo-compounds, among which diketones, (possibly substituted, in particular halogenated) aliphatic, alicyclic and aromatic ketones, as well as ketoacetals and aldehydes. The S-enantiomer-forming reduction is supplemented by the possibility to recover R-enantiomers from racemates by oxidizing the S-enantiomer and separating the oxo-compound.
(FR) Une enzyme qualifiée de réductase d'esters cétoniques peut être isolée de souches de Candida parapsilosis, de Yarrowinia cellobiosa, de Rhodococcus erythropolis et de Pseudomonas acidovorans. Cette enzyme est apte à faire réagir enzymatiquement en fonction du NADH, des esters d'acide cétonique $g(b), $g(g) et $g(d) pour les transposer en esters d'acide hydroxycarboxylique $g(b), $g(g) et $g(d). La culture s'effectue de préférence sur des alcanes à longue chaîne et/ou un milieu de culture contenant des acides alcaniques, de manière appropriée en présence d'un inducteur. Une préparation enzymatique utilisable peut être obtenue à partir de l'extrait cellulaire brut, par précipitation P.E.G. En procédant ensuite à une purification chromatographique, on peut obtenir des activités spécifiques élevées (par exemple 1855 U/mg). L'enzyme se caractérise par un large spectre de substrats. Outre les esters cétoniques précités (le cas échéant substitués), une pluralité d'autres composés oxo sont acceptés, dont les dicétones, les cétones aliphatiques, alicycliques et aromatiques (le cas échéant substituées et notamment halogénées), les acétals cétoniques et les aldéhydes. La réduction avec formation d'énantiomères de S peut être complétée par la possibilité d'obtenir des énantiomères de R à partir de racémates par oxydation de l'énantiomère de S et par séparation du composé oxo.
États désignés : CA, JP, KR, US
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
Langue de publication : Allemand (DE)
Langue de dépôt : Allemand (DE)
Également publié sous:
EP0630402US5523223JPH07505770CA2117482