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1. (WO1993017127) AMPLIFICATION DE L'ADN EN BOOMERANG
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international

N° de publication : WO/1993/017127 N° de la demande internationale : PCT/US1993/001578
Date de publication : 02.09.1993 Date de dépôt international : 19.02.1993
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 : 20.09.1993
CIB :
C07K 14/415 (2006.01) ,C12N 15/10 (2006.01) ,C12Q 1/68 (2006.01)
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
07
CHIMIE ORGANIQUE
K
PEPTIDES
14
Peptides ayant plus de 20 amino-acides; Gastrines; Somatostatines; Mélanotropines; Leurs dérivés
415
provenant de végétaux
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
N
MICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15
Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09
Technologie d'ADN recombinant
10
Procédés pour l'isolement, la préparation ou la purification d'ADN ou d'ARN
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
Q
PROCÉDÉS DE MESURE, DE RECHERCHE OU D'ANALYSE FAISANT INTERVENIR DES ENZYMES OU DES MICRO-ORGANISMES; COMPOSITIONS OU PAPIERS RÉACTIFS À CET EFFET; PROCÉDÉS POUR PRÉPARER CES COMPOSITIONS; PROCÉDÉS DE COMMANDE SENSIBLES AUX CONDITIONS DU MILIEU DANS LES PROCÉDÉS MICROBIOLOGIQUES OU ENZYMOLOGIQUES
1
Procédés de mesure, de recherche ou d'analyse faisant intervenir des enzymes ou des micro-organismes; Compositions à cet effet; Procédés pour préparer ces compositions
68
faisant intervenir des acides nucléiques
Déposants :
THE STATE OF OREGON acting by and through THE OREGON STATE BOARD OF HIGHER EDUCATION on behalf of OREGON STATE UNIVERSITY [US/US]; Corvallis, OR 97331-2140, US
Inventeurs :
AHERN, Kevin, G.; US
Mandataire :
STEPHENS, Donald, L., Jr. ; Klarquist, Sparkman, Campbell, Leigh & Whinston One World Trade Center Suite 1600 121 S.W. Salmon Street Portland, OR 97204, US
Données relatives à la priorité :
841,32020.02.1992US
Titre (EN) BOOMERAND DNA AMPLIFICATION
(FR) AMPLIFICATION DE L'ADN EN BOOMERANG
Abrégé :
(EN) Methods for amplifying DNA sequences of interest are disclosed. The methods can be performed using only one primer and are also useful in cloning protocols and for sequencing large DNAs. The methods comprise cleaving a sample DNA using an agent, such as a restriction endonuclease, that produces discrete DNA fragments; ligating the fragments to ''adapter'' polynucleotides having a ligatable end and first and second self-complementary sequences separated by a spacer sequence, thereby forming ligated duplexes; denaturing the ligated duplexes to form templates; annealing molecules of an oligonucleotide primer to the templates, the primers being homologous to a primer target site associated with the sequence of interest; extending the primers using a DNA polymerizing agent to form duplex products; and denaturing the duplex products. Subsequent multiple cycles of annealing primers, extending the primers, and denaturing duplex products are usually performed so as to achieve the desired degree of amplification. Sequencing of large DNAs is performed using multiple rounds of DNA amplification, each round employing a primer homologous with a primer target site in the sequence of interest previously amplified. Cloning is facilitated by including a replication origin and selectable marker in the adapters.
(FR) L'invention décrit des procédés servant à effectuer l'amplification de séquences d'ADN présentant un intérêt. On peut mettre lesdits procédés en application au moyen d'une amorce uniquement et ceux-ci sont également efficaces dans des protocoles de clonage et dans des mises en séquences d'ADN présentant une dimension importante. Les procédés comprennent le clivage d'un ADN échantillon au moyen d'un agent, telle qu'une endonucléase de restriction produisant des fragments d'ADN discrets; le couplage enzymatique desdits fragments à des polynucléotides ''adaptateurs'' possédant une extrémité pouvant se coupler enzymatiquement, ainsi qu'une première et une deuxième séquences présentant une complémentarité autonome et séparé par une séquence d'espacement, ce qui permet d'obtenir des doubles hélices couplées enzymatiquement; la dénaturation desdites doubles hélices couplés enzymatiquement, de façon à obtenir des matrices; l'hybridation de molécules d'une amorce d'oligonucléotides auxdites matrices, les amorces étant homologues à un site de cible d'amorce associé à la séquence présentant un intérêt; l'extension des amorces au moyen d'un agent de polymérisation de l'ADN, de façon à constituer des produits à double hélice; la dénaturation desdits produits. On effectue habituellement des cycles multiples subséquents d'hybridation des amorces, d'extension desdites amorces et de dénaturation des produits à double hélice, de façon à réaliser le degré d'amplification souhaité. On effectue la mise en séquence d'ADN à dimensions importantes au moyen de cycles multiples d'amplification de l'ADN, chaque cycle utilisant un homologue d'amorce à un site de cible d'amorce dans la séquence amplifiée précédemment et présentant un intérêt. On facilite le clonage en incluant une origine de réplication et un marqueur sélectionnable dans les adaptateurs.
États désignés : AU, CA, JP, NZ
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
Langue de publication : Anglais (EN)
Langue de dépôt : Anglais (EN)
Également publié sous:
AU1993037293