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1. (WO1991004340) AMPLIFICATION ISOTHERMIQUE IN VITRO DE L'ACIDE NUCLEIQUE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1991/004340    N° de la demande internationale :    PCT/US1990/005321
Date de publication : 04.04.1991 Date de dépôt international : 19.09.1990
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    19.04.1991    
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : CAMBRIDGE BIOTECH CORPORATION [US/US]; 365 Plantation Street, Worcester, MA 01605 (US)
Inventeurs : OLSON, Jeffrey, C.; (US).
MULLIS, Kary, B.; (US)
Mandataire : GRANAHAN, Patricia; Hamilton, Brook, Smith & Reynolds, Two Militia Drive, Lexington, MA 02173 (US)
Données relatives à la priorité :
410,328 20.09.1989 US
Titre (EN) IN VITRO, ISOTHERMAL NUCLEIC ACID AMPLIFICATION
(FR) AMPLIFICATION ISOTHERMIQUE IN VITRO DE L'ACIDE NUCLEIQUE
Abrégé : front page image
(EN)An isothermal method for amplifying DNA of interest having a defined 3' end and contained in a target DNA sequence is disclosed. The method comprises combining, under appropriate conditions: the target DNA sequence, treated, if necessary, to render the DNA of interest available for hybridization with complementary nucleic acid sequences; a promoter primer; a reverse primer; at least one RNA-dependent DNA polymerase; at least one DNA-dependent DNA polymerase; at least one DNA-dependent RNA polymerase; an agent with RNase H activity; and appropriate nucleoside triphosphates. In addition, several embodiments of the amplification process are disclosed. For example, a restriction enzyme which recognizes and specifically cleaves either single-stranded DNA or double-stranded DNA at a selected site is also combined with the target DNA, to cleave the target DNA at a selected site, to produce DNA of interest having a defined 3' end.
(FR)L'invention concerne un procédé isothermique d'amplification de l'ADN d'intérêt ayant une extrémité 3' définie et contenue dans une séquence ADN cible. Le procédé consiste à combiner, dans des conditions appropriées: la séquence ADN cible traitée, si nécessaire, pour rendre l'ADN d'intérêt disponible à des fins d'hybridation avec des séquences d'acide nucléique complémentaire; Une amorce de promotion; une amorce d'inversion; au moins une polymérase d'ADN dépendante de l'ARN; au moins une polymérase d'ADN dépendante de l'ADN; au moins une polymérase d'ARN dépendante de l'ADN; un agent ayant une activité RNase H; et des triphosphates nucléosides appropriés. De plus, plusieurs modes de réalisation du procédé d'amplification sont décrits. Par exemple, une enzyme de restriction qui reconnait et effectue le clivage spécifiquement soit de l'ADN monobrin soit de l'ADN double brin dans un site sélectionné est également combinée avec l'ADN cible, pour effectuer le clivage de l'ADN cible au niveau d'un site sélectionné et produire l'ADN d'intérêt ayant une extrémité 3' définie.
États désignés : CA, JP.
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, IT, LU, NL, SE).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)