Traitement en cours

Veuillez attendre...

Paramétrages

Paramétrages

Aller à Demande

1. RU2013111533 - СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ МУЛЬТИСПЕЦИФИЧНЫХ И МУЛЬТИВАЛЕНТНЫХ АНТИТЕЛ

Office Fédération de Russie
Numéro de la demande 2013111533/10
Date de la demande 16.08.2011
Numéro de publication 2013111533
Date de publication 27.09.2014
Type de publication A
CIB
C07K 16/00
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
07CHIMIE ORGANIQUE
KPEPTIDES
16Immunoglobulines, p.ex. anticorps monoclonaux ou polyclonaux
CPC
C07K 16/468
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
16Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
46Hybrid immunoglobulins
468Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
C07K 16/005
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
16Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
005constructed by phage libraries
C07K 16/248
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
16Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
18against material from animals or humans
24against cytokines, lymphokines or interferons
244Interleukins [IL]
248IL-6
C07K 16/249
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
16Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
18against material from animals or humans
24against cytokines, lymphokines or interferons
249Interferons
C07K 16/2866
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
16Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
18against material from animals or humans
28against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
2866against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
C07K2317/31
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
2317Immunoglobulins specific features
30characterized by aspects of specificity or valency
31multispecific
Déposants НОВИММУН С.А. (CH)
Inventeurs ФИШЕР Николас (CH)
МАДЖИСТРЕЛЛИ Джованни (FR)
ГЕНО Франк (FR)
РАФН Улла (CH)
ЭЛСОН Грег (FR)
Données relatives à la priorité 12415910 31.03.2009 US
61/443,008 15.02.2011 US
61/509,260 19.07.2011 US
Titre
(RU) СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ МУЛЬТИСПЕЦИФИЧНЫХ И МУЛЬТИВАЛЕНТНЫХ АНТИТЕЛ
Abrégé
(RU)
1. Выделенное моноклональное антитело, имеющее различную специфичность в каждом объединенном сайте и состоящее из двух копий полипептида одной тяжелой цепи и первой легкой цепи и второй легкой цепи, где первая и вторая легкие цепи различны. 2. Выделенное моноклональное антитело по п.1, где по меньшей мере часть первой легкой цепи относится к Каппа-типу и по меньшей мере часть второй цепи относится к Лямбда-типу. 3. Выделенное моноклональное антитело по п.2, где первая легкая цепь включает по меньшей мере константный участок Каппа. 4. Выделенное моноклональное антитело по п.3, где первая легкая цепь дополнительно включает вариабельный участок Каппа. 5. Выделенное моноклональное антитело по п.3, где первая легкая цепь дополнительно включает вариабельный участок Лямбда. 6. Выделенное моноклональное антитело по п.2, где вторая легкая цепь включает по меньшей мере константный участок Лямбда. 7. Выделенное моноклональное антитело по п.6, где вторая легкая цепь дополнительно включает вариабельный участок Лямбда. 8. Выделенное моноклональное антитело по п.6, где вторая легкая цепь дополнительно включает вариабельный участок Каппа. 9. Выделенное моноклональное антитело по п.2, где первая легкая цепь включает константный участок Каппа и вариабельный участок Каппа, и где вторая легкая цепь включает константный участок Лямбда и вариабельный участок Лямбда. 10. Выделенное моноклональное антитело по любому из предыдущих пп., где последовательности константного и вариабельного каркасных участков являются человеческими. 11. Способ получения биспецифичного антитела по п.1, включающий: a. выделение антитела или участка фрагмента антитела, имеющего специфичность, определяемую вариабельным доменом тяжелой цепи вместе с вариабельным доменом первой легкой цепи; b. выделение антитела или участка фрагмента антитела, имеющего другую специфичность, определяемую вариабельным доменом той же тяжелой цепи, как у антитела стадии a) вместе с вариабельным доменом второй легкой цепи; c. ко-экспрессию в клетке: i. вариабельного домена общей тяжелой цепи, сшитого с константным участком тяжелой цепи иммуноглобулина; ii. вариабельного домена первой легкой цепи, сшитого с константным доменом легкой цепи Каппа-типа или сшитого с константным доменом легкой цепи Лямбда-типа; и iii. вариабельного домена второй легкой цепи, сшитого с константным доменом легкой цепи другого типа, чем у константного домена первой легкой цепи. 12. Способ по п.11, где вариабельный домен легкой цепи Каппа сшит с константным участком Каппа-типа. 13. Способ по п.11, где вариабельный домен легкой цепи Каппа сшит с константным участком Лямбда-типа. 14. Способ по п.11, где вариабельный домен легкой цепи Лямбда сшит с константным участком Каппа-типа. 15. Способ по п.11, где вариабельный домен легкой цепи Лямбда сшит с константным участком Лямбда-типа. 16. Способ по любому из пп.11-15, дополнительно включающий стадию (d) очистки биспецифичных антител, полученных на стадии c), от моноспецифичных антител, полученных на стадии c). 17. Способ по п.16, где стадия d) представляет собой стадию очистки с помощью аффинной хроматографии. 18. Способ по п.17, в котором стадию очистки осуществляют с использованием аффинного хроматографического материала, специфичного к константному домену Каппа, специфичного к константному домену Лямбда или специфичного к ним обоим - константному домену Каппа и константному домену Лямбда. 19. Способ по п.11, в котором стадия a) и b) облегчаются применением библиотек антител, имеющих общую тяжелую цепь, и многообразие ограничивается вариабельным доменом легкой цепи. 20. Способ по п.19, где библиотека антител представлена на нитевидном бактериофаге, на поверхности дрожжей, бактерий или клеток млекопитающих или используется для рибосом или другого типа in vitro-дисплея. 21. Способ получения биспецифичного антитела, которое специфично связывается с первым антигеном и со вторым антигеном, где первый и второй антигены различны, причем способ включает: (a) предоставление молекулы первой нуклеиновой кислоты, кодирующей первый полипептид, включающий вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулинового пептида или его фрагмента, который связывается с первым антигеном, соединенный с константным участком иммуноглобулина; (b) предоставление молекулы второй нуклеиновой кислоты, кодирующей второй полипептид, включающий вариабельный участок легкой цепи иммуноглобулинового полипептида или его фрагмент, который связывается с первым антигеном, соединенный с константым участком первой легкой цепи Каппа-типа или Лямбда-типа; (c) предоставление молекулы третьей нуклеиновой кислоты, кодирующей третий полипептид, включающий вариабельный участок легкой цепи иммуноглобулинового полипептида или его фрагмент, который имеет такой же вариабельный участок тяжелой цепи иммуноглобулинового полипептида или его фрагмент стадии (a) и связывается с вторым антигеном, соединенный с константным участком второй легкой цепи Каппа-типа или Лямбда-типа, где константные домены первой легкой цепи и второй легкой цепи относятся к различным типам; и (d) культивирование клетки-хозяина, включающей молекулы первой, второй и третьей нуклеиновых кислот при условиях, которые дают возможность экспрессии первого, второго и третьего полипептидов. 22. Способ по п.21, дополнительно включающий стадию (e) извлечения биспецифичного антитела. 23. Способ по п.21, где вторая нуклеиновая кислота кодирует вариабельный домен легкой цепи Каппа-типа. 24. Способ по п.23, где вторая нуклеиновая кислота кодирует константный участок легкой цепи Каппа-типа. 25. Способ по п.23, где вторая нуклеиновая кислота кодирует константный участок легкой цепи Лямбда-типа. 26. Способ по п.21, где вторая нуклеиновая кислота кодирует вариабельный домен легкой цепи Лямбда-типа. 27. Способ по п.26, где вторая нуклеиновая кислота кодирует константный участок легкой цепи Каппа-типа. 28. Способ по п.26, где вторая нуклеиновая кислота кодирует константный участок легкой цепи Лямбда-типа. 29. Способ по п.21, где третья нуклеиновая кислота кодирует вариабельный домен легкой цепи Каппа-типа. 30. Способ по п.29, где третья нуклеиновая кислота кодирует константный участок легкой цепи Каппа-типа 31. Способ по п.29, где третья нуклеиновая кислота кодирует константный участок легкой цепи Лямбда-типа. 32. Способ по п.21, где третья нуклеиновая кислота кодирует вариабельный домен легкой цепи Лямбда-типа. 33. Способ по п.32, где третья нуклеиновая кислота кодирует константный участок легкой цепи Каппа-типа. 34. Способ по п.32, где третья нуклеиновая кислота кодирует константный участок легкой цепи Лямбда-типа. 35. Способ по любому из пп.21-34, где биспецифичное антитело извлекают на стадии (e) с использованием стадии очистки с помощью аффинной хроматографии. 36. Способ по п.35, где стадию очистки осуществляют с использованием аффинного хроматографического материала, специфичного константному домену Каппа, специфичному к константному домену Лямбда или специфичному к ним обоим - константному домену Каппа и константному домену Лямбда. 37. Смесь антител, включающая два моноспецифичных антитела и одно биспецифичное антитело, которые имеют общую тяжелую цепь. 38. Способ получения смеси антител по п.37, включающий: a. выделение антитела или участка фрагмента антитела, имеющего специфичность, определяемую вариабельным доменом тяжелой цепи вместе с вариабельным доменом первой легкой цепи; b. выделение антитела или участка фрагмента антитела, имеющего другую специфичность, определяемую вариабельным доменом той же тяжелой цепи, как у антитела стадии a) вместе с вариабельным доменом второй легкой цепи; c. ко-экспрессия в клетке: i. вариабельного домена общей тяжелой цепи, сшитого с константным участком тяжелой цепи иммуноглобулина; ii. вариабельного домена первой легкой цепи, сшитого с константным доменом легкой цепи Каппа-типа или сшитого с константным доменом легкой цепи Лямбда-типа; и iii. вариабельного домена второй легкой цепи, сшитого или с константным доменом легкой цепи Каппа-типа, или с константным доменом легкой цепи Лямбда-типа. 39. Способ по п.38, дополнительно включающий стадию (d) очистки смеси антител, получаемой на стадии c), из надосадочной жидкости клеточной культуры. 40. Смесь антител, включающая три или более моноспецифичных антитела и три или более биспецифичных антитела, имеющих общую тяжелую цепь. 41. Способ получения смеси антител по п.40, включающий: a. выделение антитела или участка фрагмента антитела, имеющего специфичность, определяемую вариабельным доменом тяжелой цепи вместе с вариабельным доменом первой легкой цепи; b. выделение нескольких антител или участков фрагментов антител, имеющих другую специфичность, определяемую вариабельным доменом той же тяжелой цепи, как у антитела стадии a) вместе с вариабельным доменом другой легкой цепи; c. ко-экспрессию в клетке: i. вариабельного домена общей тяжелой цепи, сшитого с константным участком тяжелой цепи иммуноглобулина; ii. всех легких цепей антитела, выделенных на стадии a) и b), сшитых или с константным доменом легкой цепи Каппа-типа, или с константным доменом легкой цепи Лямбда-типа. 42. Способ по п.41, дополнительно включающий стадию (d) очистки смеси антител, полученной на стадии c), из надосадочной жидкости клеточной культуры. 43. Способ по п.16, в котором стадии а) и b) облегчаются применением библиотек антител, имеющих общую тяжелую цепь, и многообразие ограничивается вариабельным доменом легкой цепи. 44. Способ по п.17 или 18, в котором стадии а) и b) облегчаются применением библиотек антител, имеющих общую тяжелую цепь, и многообразие ограничивается вариабельным доменом легкой цепи.