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1. CN101307316 - Secretion expression of antibiotic peptide CAD in bacillus subtilis and expression system of recombination bacillus subtilis

Office
Chine
Numéro de la demande 200810132258.1
Date de la demande 22.07.2008
Numéro de publication 101307316
Date de publication 19.11.2008
Numéro de délivrance 101307316
Date de délivrance 16.03.2011
Type de publication B
CIB
C12N 15/12
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
11Fragments d'ADN ou d'ARN; Leurs formes modifiées
12Gènes codant pour des protéines animales
C12N 15/62
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
11Fragments d'ADN ou d'ARN; Leurs formes modifiées
62Séquences d'ADN codant pour des protéines de fusion
C12N 15/75
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
63Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
74Vecteurs ou systèmes d'expression spécialement adaptés aux hôtes procaryotes autres que E. coli, p.ex. Lactobacillus, Micromonospora
75pour Bacillus
C07K 14/435
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
07CHIMIE ORGANIQUE
KPEPTIDES
14Peptides ayant plus de 20 amino-acides; Gastrines; Somatostatines; Mélanotropines; Leurs dérivés
435provenant d'animaux; provenant d'humains
C12N 1/21
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
1Micro-organismes, p.ex. protozoaires; Compositions les contenant; Procédés de culture ou de conservation de micro-organismes, ou de compositions les contenant; Procédés de préparation ou d'isolement d'une composition contenant un micro-organisme; Leurs milieux de culture
20Bactéries; Leurs milieux de culture
21modifiés par l'introduction de matériel génétique étranger
C12R 1/125
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
RSCHÉMA D'INDEXATION ASSOCIÉ AUX SOUS-CLASSES C12C-C12Q77
1Micro-organismes
01Bactéries ou actinomycètes
07Bacillus
125Bacillus subtilis
CPC
C07K 14/43563
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
14Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
435from animals; from humans
43504from invertebrates
43563from insects
C12N 15/75
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
74Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
75for Bacillus
Déposants Beijing Longke Fangzhou Biological Engineering Technology Center
北京中农颖泰生物技术有限公司
中农颖泰林州生物科园有限公司
Inventeurs Zhu Faming
谯仕彦
Qiao Shiyan
祝发明
Ji Shengyue
郭文江
Song Qinglong
Ming Yaohua
Pan Baohai
Zhang Jiandong
Yue Longyao
Wang Chunping
Mandataires xuguo wen
北京安博达知识产权代理有限公司 11271
Titre
(EN) Secretion expression of antibiotic peptide CAD in bacillus subtilis and expression system of recombination bacillus subtilis
(ZH) 抗菌肽CAD在枯草杆菌中的分泌表达及重组枯草杆菌表达系统
Abrégé
(EN) The invention relates to a method for expressing cecropin CAD antibacterial peptide by means of a recombined bacillus subtilis expression system. Through carrying out artificial synthesis of sumo protease expression operon, saccharomyces cerevisiae micromolecular ubiquitin-like protein and cecropin AD fused protein expression operon gene, the method clones cecropin AD matrix gene bacillus subtilis expression vector pNF11 and converts recombined expression vector pNF 11-CAD, thereby ensuring the induced expression of recombined bacillus subtilis in a shake flask. The method has the advantages of a simple expression system, large-scale production, low production cost, strong biological activity and no toxic and harmful substance, etc; moreover, the method provides a medicine with low price and strong antibacterial capacity for clinic disease prevention and cure, and the medicine can also be used as feedstuff additive.
(ZH)

本发明涉及一种以重组枯草杆菌表达系统表达天蚕素CAD抗菌肽的方法,通过人工合成sumo蛋白酶的表达操纵子、酿酒酵母小分子泛素样蛋白与天蚕素AD的融合蛋白表达操纵子基因,克隆天蚕素AD母体基因枯草杆菌表达载体pNF11,转化重组表达载体pNF 11-CAD,从而使重组枯草杆菌在摇瓶中诱导表达;本发明具有表达系统简单,用于大规模生产,生产成本低,生物活性强,无毒害物质等优点;为临床上的疾病防治和治疗提供一种价格便宜、抗菌力强的药物,也可作为饲料添加剂。


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