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1. WO2007125146 - MÉTODO DE PRODUCCIÓN DE VECTORES ADENOVIRUS PARA TERAPIA GÉNICA Y SECUENCIAS DE ADN ÚTILES PARA ELLO

N.º de publicación WO/2007/125146
Fecha de publicación 08.11.2007
Nº de la solicitud internacional PCT/ES2007/000260
Fecha de presentación internacional 27.04.2007
CIP
C12N 7/02 2006.1
CQUIMICA; METALURGIA
12BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
NMICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO
7Virus, p. ej. bacteriófagos; Composiciones que los contienen; Su preparación o purificación
02Aislamiento o purificación
C12N 15/861 2006.1
CQUIMICA; METALURGIA
12BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
NMICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO
15Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello
09Tecnología del ADN recombinante
63Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión
79Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a huéspedes eucariotas
85para células animales
86Vectores virales
861Vectores adenovirales
CPC
A61K 48/0091
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
48Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
0091Purification or manufacturing processes for gene therapy compositions
C12N 15/86
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
85for animal cells
86Viral vectors
C12N 2710/10343
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
2710dsDNA Viruses
00011dsDNA Viruses
10011Adenoviridae
10311Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
10341Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
10343viral genome or elements thereof as genetic vector
C12N 7/00
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
7Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
Solicitantes
  • UNIVERSITAT AUTONOMA DE BARCELONA [ES]/[ES] (AllExceptUS)
  • INSTITUCIÓ CATALANA DE RECERCA I ESTUDIS AVANÇATS (ICREA) [ES]/[ES] (AllExceptUS)
  • CHILLÓN RODRÍGUEZ, Miguel [ES]/[ES] (UsOnly)
  • ALBA FERNÁNDEZ, Raúl [ES]/[ES] (UsOnly)
  • BOSCH MERINO, Assumpció [ES]/[ES] (UsOnly)
Inventores
  • CHILLÓN RODRÍGUEZ, Miguel
  • ALBA FERNÁNDEZ, Raúl
  • BOSCH MERINO, Assumpció
Representante común
  • UNIVERSITAT AUTONOMA DE BARCELONA
Datos de prioridad
P20060113628.04.2006ES
Idioma de publicación Español (es)
Idioma de solicitud Español (ES)
Estados designados
Título
(EN) METHOD FOR PRODUCING ADENOVIRUS VECTORS FOR GENE THERAPY AND DNA SEQUENCES USED THEREFOR
(ES) MÉTODO DE PRODUCCIÓN DE VECTORES ADENOVIRUS PARA TERAPIA GÉNICA Y SECUENCIAS DE ADN ÚTILES PARA ELLO
(FR) PROCÉDÉ DE PRODUCTION DE VECTEURS ADÉNOVIRUS DESTINÉS A LA THÉRAPIE GÉNIQUE ET SÉQUENCES D'ADN UTILISÉES À CES FINS
Resumen
(EN) Method for producing adenovirus vectors for gene therapy and auxiliary vectors used therefor. The method is based on the multiplication of gutless adenoviruses that lack adenovirus-coding sequences by cotransfecting them with an auxiliary or helper adenovirus that has an attB sequence of the &phis;C31 bacteriophage inserted between the adenovirus packaging signal and the ITR closest to it and/or utilizing the delay arising at the time of packaging the helper adenovirus with respect to that of the gutless adenovirus owing to the presence of the atttB sequence in order to recover the gutless adenovirus from the culture before the helper adenovirus completes its viral cycle. This gives rise to high gutless adenovirus titres that are essentially free from helper adenovirus, thereby allowing them to be used in gene therapy, minimizing the likelihood of the appearance of a cellular immune response on the part of the treated individual against cells transduced by the adenovirus vector produced.
(ES) Método de producción de vectores adenovirus para terapia génica y vectores auxiliares útiles para ello. El método se basa en la multiplicación de adenovirus gutless, que carecen de secuencias codificantes de adenovirus, cotransfectándolos con un adenovirus auxiliar o helper que posee una secuencia attB del bacteriófago &phis;C31 insertada entre la señal de empaquetamiento del adenovirus y la ITR más próxima a ella y en aprovechar el retraso que se produce en el momento del empaquetamiento del adenovirus helper respecto al del adenovirus gutless debido a la presencia de la secuencia attB para recuperar el adenovirus gutless del cultivo antes de que el adenovirus helper finalice su ciclo viral. Así se obtienen títulos altos de adenovirus gutless esencialmente libres de adenovirus helper, lo que posibilita su utilización en terapia génica minimizando el riesgo de aparición de una respuesta inmune celular del individuo tratado contra células transducidas por el vector adenovirus producido.
(FR) L'invention décrit un procédé de production de vecteurs adénovirus destinés à la thérapie génique et des vecteurs auxiliaires utilisés à ces fins. Le procédé consiste à multiplier des adénovirus n'exprimant plus de gènes viraux privés de séquences codantes d'adénovirus et à les co-transférer avec un adénovirus auxilaire ou assistant qui possède une séquence attB du bactériophage &phis;C31, introduite entre le signal d'encapsidation de l'adénovirus et l'ITR la plus proche du signal, et à utiliser le retard qui se produit au moment de l'encapsidation de l'adénovirus assistant par rapport à l'adénovirus n'exprimant plus de gènes viraux en raison de la présence de la séquence attB, pour récupérer l'adénovirus n'exprimant plus de gènes viraux de la culture avant que l'adénovirus assistant ne réalise son cycle viral. De cette manière, on peut obtenir des titres élevés d'adénovirus n'exprimant plus de gènes viraux qui sont essentiellement exempts d'adénovirus assistant, ce qui rend possible sont utlisation en thérapie génique en minimisant le risque d'apparition d'une réponse immune cellulaire de l'individu traité contre des cellules transduites par le vecteur adénovirus produit.
Documentos de patente conexos:
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