此应用程序的某些内容目前无法使用。
如果这种情况持续存在,请联系我们反馈与联系
1. (WO2019066093) SCF-SPECIFIC ANTIBODY
Document

명세서

발명의 명칭

기술분야

1  

배경기술

2   3   4   5  

발명의 상세한 설명

기술적 과제

6   7   8  

과제 해결 수단

9   10   11  

발명의 효과

12  

도면의 간단한 설명

13   14   15   16   17   18   19   20   21   22  

발명의 실시를 위한 최선의 형태

23   24   25   26   27   28   29  

발명의 실시를 위한 형태

30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92  

산업상 이용가능성

93  

청구범위

1   2   3  

도면

1 (R91)   2 (R91)   3 (R91)   4 (R91)   5 (R91)   6a (R91)   6b (R91)   6c (R91)   6d (R91)   7 (R91)   8 (R91)   9 (R91)   10 (R91)  

명세서

발명의 명칭 : SCF 특이적 항체

기술분야

[1]
본 발명은 SCF에 특이적으로 결합하는 항체에 관한 것이다.

배경기술

[2]
줄기세포인자(Stem Cell Factor, SCF)는 골수스트로마, 선유아세포 등에 의해 생산되는 시토카인이며. 조혈발생, 조혈간세포의 증식에 가장 주요한 분자이다. cDNA을 통해 상기 SCF를 살펴보게 되면, 사람에서 25 잔기의 아미노산으로 구성되는 신호펩티드를 포함하는 273잔기의 아미노잔기로 구성된다.
[3]
상기 줄기세포인자는 막결합형과 분비형의 2개의 형이 존재하며, SCF 유전자에 이상이 있는 경우 생식세포, 멜라닌세포, 비만세포에 이상이 나타나거나, 고도의 빈혈을 나타낸다.
[4]
SCF의 신호는 티로신인산화효소형의 C-kit 수용체와 결합한 후 세포 내에 전달된다. SCF의 단독 적용은 약하지만, IL-I, IL-3, IL-4, IL-6, IL-7, IL-11, G-CSF, GM-CSF, EPO, IFM-γ 등 많은 시토카인과 현저한 상승작용을 나타내며, 조혈줄기세포, 여러 가지 조혈전구세포, 비만세포의 증식을 지탱한다. in vitro 투여는 조혈줄기세포나 전신적인 비만세포증가를 나타낸다.
[5]
한편, 이러한 SCF 유전자의 특성에 착안하여 SCF 단백질에 특이적 또는 효과적으로 결합하는 항체를 개발하지 못하는 실정이다.

발명의 상세한 설명

기술적 과제

[6]
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 본 발명자들은 SCF에 특이적인 결합능을 보이는 항체를 스크리닝하고, 이에 기초하여 본 발명을 완성하게 되었다.
[7]
이에, 본 발명의 목적은 SCF에 특이적으로 결합하는 항체를 제공하는 것이다.
[8]
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

과제 해결 수단

[9]
상기의 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 서열번호 1, 서열번호 2, 및 서열번호 3 으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 서열을 포함하는, 항체를 제공한다.
[10]
상기의 목적을 달성하기 위한 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 항체가 모노클로날 또는 폴리클로날인 것을 특징으로 하는, 항체를 제공한다.
[11]
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 항체가 SCF에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 항체를 제공한다.

발명의 효과

[12]
본 발명은 SCF에 특이적으로 결합하는 항체를 제공함으로써, 향후 SCF 의존성 질병의 진행을 막는 등, 다양하게 응용될 수 있다.

도면의 간단한 설명

[13]
도 1은 1차 패닝 각 라운드에서 얻어진 양성 파아지 풀에 대한 폴리 파아지 ELISA의 결과를 나타낸 것이다.
[14]
도 2는 모노 파아지 192종의 SCF-His 및 ITGA6-Fc 단백질에 대한 결합능을 ELISA를 이용하여 나타낸 것이다.
[15]
도 3은 1차 패닝에 의해 선별된 모노 파아지에 대한 BstNI 핑거프린팅을 수행하여 그룹핑한 결과를 나타낸 것이다.
[16]
도 4는 1차 패닝에 의해 최종 선별된 5종의 양성 파아지 항체들의 다수의 항원에 대한 비특이적 결합 테스트를 실시한 결과를 나타낸 것이다.
[17]
도 5는 2차 패닝 각 라운드에서 얻어진 양성 파아지 풀에 대한 폴리 파아지 ELISA의 결과를 나타낸 것이다.
[18]
도 6은 모노 파아지 384종의 SCF-His 및 ITGA6-Fc 단백질에 대한 결합능을 ELISA를 이용하여 나타낸 것이다.
[19]
도 7은 2차 패닝에 의해 선별된 모노 파아지에 대한 BstNI 핑거프린팅을 수행하여 그룹핑한 결과를 나타낸 것이다.
[20]
도 8은 2차 패닝에 의해 최종 선별된 5종의 양성 파아지 항체들의 다수의 항원에 대한 비특이적 결합 테스트를 실시한 결과를 나타낸 것이다.
[21]
도 9는 단일클론 파아지 항체들을 단일 사슬 항체의 형태에서 human IgG의 형태로 전환하기 위한 모식도를 나타낸 것이다.
[22]
도 10은 human IgG 형태로 생산한 항체를 Agilent에 로딩하여 정제된 단백질의 순도 및 유동성(mobility) 상태를 나타낸 것이다.

발명의 실시를 위한 최선의 형태

[23]
본 발명을 보다 충분히 이해할 수 있도록 하기 위하여 하기의 상세한 설명을 기재한다. 달리 정의하지 않는 한, 본원에서 사용되는 모든 기술적 용어와 과학적 용어는 본 발명이 속하는 분야의 통상의 기술자가 보편적으로 이해하고 있는 것과 동일한 의미를 갖는다.
[24]
본 발명과 관련하여 본원에서 사용되는 "항체"라는 용어는 단리된 항체, 재조합 항체 또는 합성 항체, 항체 접합체 또는 항체 유도체를 포함한다. 용어 "항체"는 달리 명시되지 않거나, 문맥상 달리 이해되는 것이 아니라면, 항원 결합 단편을 비롯한 항체 단편을 포함하고자 한다. 본 발명의 "항체"는 전항체 및 그의 임의의 항원 결합 단편, 항체 접합체를 비롯한 하나 이상의 변형(예를 들면, 아미노산의 삽입, 결실, 치환, 번역후 변형 또는 그의 삭제 등)을 포함할 수 있는 항체 유도체 또는 변이체를 포함하며, 이는 통상의 기술자에게 자명한 것이다.
[25]
본원에서 사용되는 "항 SCF 항체"는 달리 명시되거나 문맥상 달리 제시되지 않는 한 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 인간 항체, 다량체 항체, 2가, 3가, 또는 4가 항체 등을 포함한다. 1가의 항체는 오직 하나의 면역글로불린 가변 도메인만을 포함하고, SCF에 특이적으로 결합하는 항체를 포함한다. 나아가, 본 발명의 항 SCF 항체는 SCF에 대해 1가, 2가, 또는 다가일 수 있다.
[26]
모노클로날 항체는 당업계에 공지되어 있는 임의의 방법, 예로서, 하이브리도마 기법([Kohler & Milstein, Nature, 1975, 256:495-497]), 트리오마 기법, 인간 B 세포 하이브리도마 기법([Kozbor et al, Immunology Today, 1983, 4, 72]) 및 EBV-하이브리도마 기법([Cole et al, "Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy", pp. 77-96, Alan R. Liss, Inc., 1985])에 의해 제조될 수 있다. 재조합 항체를 생성하고 제작하는 방법은 당 업계에 잘 알려져 있다(예를 들어, US 4,816,397; US 6,331,415; [Simmons et al, 2002, Journal of Immunological Methods, 263, 133-147]; WO 92/02551; [Orlandi et al., 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86, 3833]; [Riechmann et al., 1988, Nature, 322, 323]; US 5,585,089; WO 91/09967; [Mountain and Adair, 1992, Biotechnol Genet. Eng. Rev, 10, 1-142]; [Verma et al., 1998, J. Immunol. Methods, 216:165-181]; [Holliger and Hudson, 2005, Nature Biotech. 23(9): 1126-1136] 참조).
[27]
본 발명의 항체는 또한 당업계에 알려져 있는 다양한 파지 디스플레이 방법을 사용하여 생성될 수 있고, ([Brinkman et al., 1995, J. Immunol. Methods, 182:41-50]; [Ames et al., 1995, J. Immunol. Methods, 184, 177-186]; [Kettleborough et al. 1994, Eur. J. Immunol, 24, 952-958]; [Persic et al., 1997, Gene, 187, 9-18]; 및 [Burton et al., 1994, Advances in Immunol, 57, 191-280]; WO 90/02809; WO 91/10737; WO 92/01047; WO 92/18619; WO 93/11236; WO 95/15982; 및 WO 95/20401; 및 US 5,698,426; 5,223,409; 5,403,484; 5,580,717; 5,427,908; 5,750,753; 5,821,047; 5,571,698; 5,427,908; 5,516,637; 5,780,225; 5,658,727; 5,733,743; 및 5,969,108)에 개시된 것을 포함한다.
[28]
또한, 트랜스제닉(예를 들면, 유전공학처리된) 마우스, 또는 다른 포유동물을 비롯한 다른 유기체들이 본 발명의 결합 단백질 및 항체를 생산하는데 사용될 수 있다(예를 들어 US 6,300,129 참조). 예를 들어, 마우스 면역 유전자의 가변 영역(중쇄 V, D, 및 J 세그먼트, 및 경쇄 V 및 J 세그먼트)만을 상응하는 인간 가변 서열로 대체시켜 공학처리된 마우스가 인간 가변 서열을 갖는 고친화성 항체를 대량 생산하는데 사용될 수 있다는 것이 알려져 있다(예를 들면, US 6,586,251; US 6,596,541, 및 US 7,105,348 참조).
[29]
본 발명의 또 다른 실시 태양에서, "항 SCF 항체"는 영장류화된 또는 인간화된 항체, 항체 유도체 또는 접합체, 또는 항원 결합 단편을 지칭한다. 영장류화된 항체 및 인간화된 항체는 전형적으로 인간 이외의 영장류 또는 인간 항체 V 영역 프레임워크 내로 이식된, 일반적으로는 인간 불변 영역을 추가로 포함하는, 뮤린 항체로부터 유래된 중쇄 및/또는 경쇄 CDR을 포함한다. 예를 들면, [Riechmann et al. (1988) Nature 332:323-327]; US 6,054,297; 5,821,337; 5,770,196; 5,766,886; 5,821,123; 5,869,619; 6,180,377; 6,013,256; 5,693,761; 및 6,180,370을 참조한다.

발명의 실시를 위한 형태

[30]
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
[31]
[32]
실시예 1. SCF에 특이적인 항체의 1차 스크리닝
[33]
1-1. 바이오패닝
[34]
항원 준비 : ANRT사에서 생산한 SCF-His 항원 50 ㎍ 을 가지고 실험을 수행하였다.
[35]
라이브러리 파아지의 준비 : 2.7 X10 10의 다양성을 가진 1 세트의 인간 단일 사슬 항체 라이브러리 셀을 파지 감염시킨 후, 30℃에 16 시간 배양하고 폴리에틸렌글리콜로 농축한 다음, PBS 완충용액에 부유시켜 준비하였다.
[36]
패닝 : 일반적으로 파아지 디스플레이 기법을 통한 바이오패닝을 실시할 경우 목적하는 타깃과 강한 결합능력을 가지는 파지 개체수가 패닝 횟수를 거듭할수록 증가하기 때문에, 패닝 횟수에 따른 파지 역가의 증가 현상은 파지 디스플레이 실험에 있어서 실험이 의도한 방향으로 진행되고 있는지를 결정하는 기본적인 파라미터이다.
[37]
Immunotube에 라이브러리 파아지를 넣어, 실온에서 2시간 반응시킨 후에, 1XPBS/T와 1XPBS 로 세척한 후 항원에 특이적으로 결합한 단일 사슬 항체-파아지들만 추출하였다. 상기 추출된 파아지를 다시 대장균에 감염시켜 증폭시키는 패닝과정을 통해 양성 파아지의 풀을 얻었다. 1회차의 패닝에서 증폭된 파아지를 가지고 세척 단계에서 횟수만 늘리고, 나머지는 동일한 방법으로 2회차와 3회차의 패닝을 수행하여, 이를 표 1에 나타내었다.
[38]
[표1]
타겟 항원 패닝 라운드 초기 파아지 수 패닝 후의 파아지 수
SCF-His 1회차 2.0 X 1012 3.0 X 106
2회차 2.0 X 1013 3.0 X 107
3회차 5.0 X 1012 1.7 X 107

[39]
[40]
1-2. 폴리 파아지 ELISA
[41]
상기 패닝을 통하여 얻어진 양성 폴리 ScFv-파아지 항체 풀에 대한 항원과의 특이성을 알아보기 위해 폴리 파아지 ELISA를 수행하였다. 하나의 플레이트는 항원인 인간SCF-His(hSCF-His) 또는 쥐SCF-His(mSCF-His) 로 코팅하였고, 다른 하나의 플레이트는 Fc 단백질 및 ITGA6-Fc 단백질로 코팅하여, 각 라운드에서 얻어진 파아지 풀로 동시에 ELISA를 수행하였다. 한편, 항원이 제시되지 않은 M13 파아지의 #38 및 BL(blank)이 ELISA의 음성 대조군으로 사용되었다.
[42]
상기 폴리 파아지 ELISA 의 결과를 도 1에 나타내었으며, 3회차의 패닝에서 인간SCF-His(hSCF-His) 또는 쥐SCF-His(mSCF-His) 항원에 대한 결합능이 증가함을 확인할 수 있었다.
[43]
[44]
1-3. 모노 파아지 ELISA
[45]
폴리 파아지 ELISA 에서 결합능이 큰 3회차의 패닝으로부터 각 192개의 단일 클론들을 선별하였고, 이들을 96-웰 플레이트에 접종하여 헬퍼 파아지를 감염시켜 배양하였다, 이후, 상층액에 존재하는 단일사슬-파아지를 항원이 코팅된 플레이트에 접종하여 ELISA를 수행하였다.
[46]
인간SCF-His(hSCF-His) 또는 쥐SCF-His(mSCF-His) 항원에 대한 모노 파아지 ELISA와 대조군인 비특이적 항원 ITGA6-Fc 단백질에 대한 ELISA를 동시에 수행하였다.
[47]
그 결과를 도 2에 나타내었으며, 인간SCF-His(hSCF-His) 및 쥐SCF-His(mSCF-His) 항원에만 결합능을 갖는 다수의 예비 항체 클론을 선별하였다.
[48]
[49]
1-4. 그룹핑
[50]
상기 선별한 양성 파아지 클론들을 그룹핑 하기 위하여 단일 사슬 항체를 증폭할 수 있는 프라이머 세트를 이용하여 PCR을 수행하였다. PCR 절편을 BstNI 으로 처리한 후 8% DNA 폴리아크릴아마이드 젤에서 BstNI 에 의해 잘려진 단일 클론 파아지 항체들의 단편들을 도 3에 나타내었다. 도 3에 나타낸 바와 같이 크게 8가지 그룹으로 나뉘었다.
[51]
[52]
1-5. 염기서열 분석 및 최종 양성 파아지 항체 선별
[53]
상기 그룹핑에서 8가지 그룹으로 나뉜 것과 달리, 염기서열 분석 결과에서는 서로 다른 5종의 염기서열을 갖는 클론으로 밝혀졌고, 이를 하기의 표 2에 나타내었다. 이는 BstNI 의 불충분한 다이제스쳔(digestion)에 의한 것으로 추정된다. 최종 양성 파아지 항체로 선별된 5종의 중쇄와 경쇄의 가변영역에 대한 아미노산 서열을 인간항체 germline 서열과 비교한 결과, 비교적 높은 상동성을 나타내었다.
[54]
[표2]
파아지 클론 중쇄 영역 인간항체 germline 과의 상동성 경쇄 영역 인간항체 germline 과의 상동성 중쇄 영역(CDR3-아미노산 서열) 경쇄 영역(CDR3-아미노산 서열)
SCF-1B8 VH3-73 91.8% V1-17 97.9% SGSGLAYW AAWDDSLSGWV
SCF-1F10 VH3-49 94.0% V2-14 81.9% RVPVADGYNHRVYYYYGLDVW QVWDTNSVV
B-1G12 VH3-33 92.9% L5 94.7% RKAVYYGMDVW QQANSFPLT
B-2F10 VH1-2 89.8% A23 98.0% KNIISFGELNYFDS MQLTQFPLT
SCF-1A8 VH6-1 98.0% V1-17 94.9% YCARGGGRYGLDV ASWDDSLSGVV

[55]
[56]
1-6. 다수의 항원에 대한 비특이적 결합 테스트
[57]
상기 선별된 5개의 파아지 클론들은 SCF-His 에 강하게 결합하였고, 대조군인 ITGA6-Fc에는 그렇지 않음을 확인하였다. 나아가, 좀 더 많은 불특정 단백질에 대한 특이성 확인을 위하여 다수의 항원에 대하여 비특이적 결합을 테스트 하였으며, 이를 도 4에 나타내었다.
[58]
도 4에 나타낸 바와 같이, 3종의 양성 파아지 항체들-(1A8, 1B8, 1F10)은 불특정 항원에 대해 상대적으로 낮은 결합력을 나타내었고, 2종의 양성 파아지 항체들-(1G12, 2F10)은 다른 항원에도 다소 결합력이 있음을 확인하였다. 따라서 불특정 항원에 결합하지 않고 SCF 항원에 대해 특이적인 결합을 하는 양성 파아지는 총 3종-(1A8, 1B8, 1F10)임을 확인하였다.
[59]
[60]
실시예 2. SCF에 특이적인 항체의 2차 스크리닝
[61]
2-1. 바이오패닝
[62]
항원 준비 : ANRT사에서 생산한 SCF-His 항원 50 ㎍ 을 가지고 실험을 수행하였다.
[63]
라이브러리 파아지의 준비 : 2.7 X10 10의 다양성을 가진 2 세트의 인간 단일 사슬 항체를 1차 시도와 동일하게 준비하였다.
[64]
패닝 : 1차 시도와 동일하게 패닝을 수행하였으며, 이를 표 3에 나타내었다.
[65]
[표3]
타겟 항원 패닝 라운드 초기 파아지 수 패닝 후의 파아지 수
SCF-His 1회차 2.0 X 1012 3.0 X 106
2회차 2.0 X 1013 1.0 X 107
3회차 3.0 X 1012 3.7 X 107

[66]
[67]
2-2. 폴리 파아지 ELISA
[68]
상기 패닝을 통하여 얻어진 양성 폴리 ScFv-파아지 항체 풀에 대한 항원과의 특이성을 알아보기 위해 폴리 파아지 ELISA를 2 세트에 대하여 1차 시도와 동일하게 수행하였다. 그 결과 1차 시도의 패닝 결과와 유사하게 2 라이브러리 세트에서도 SCF-His 항원에 대한 결합능이 3회차의 패닝에서만 주로 증가하였고 non-specific binding의 지표인 CD58-Fc의 결합도 증가하였지만 SCF에 비해 다소 낮은 결합력을 보여주었다. 상기 폴리 파아지 ELISA 의 결과를 도 5에 나타내었으며, 3회차의 패닝에서 양성 파아지 pool에 항-SCF 파아지 항체가 성공적으로 enrich 되었음을 확인할 수 있었다.
[69]
[70]
2-3. 모노 파아지 ELISA
[71]
1차 시도와 동일하게 수행하였으며, 폴리 파아지 ELISA 에서 결합능이 큰 3회차의 패닝으로부터 각 384개의 단일 클론들을 선별하였고, 이들을 96-웰 플레이트에 접종하여 헬퍼 파아지를 감염시켜 배양하였다, 이후, 상층액에 존재하는 단일사슬-파아지를 항원이 코팅된 플레이트에 접종하여 ELISA를 수행하였다.
[72]
인간SCF-His(hSCF-His) 또는 쥐SCF-His(mSCF-His) 항원에 대한 모노 파아지 ELISA와 대조군인 비특이적 항원 ITGA6-Fc 단백질에 대한 ELISA를 동시에 수행하였다.
[73]
그 결과를 도 6에 나타내었으며, SCF-His 항원에만 결합능을 갖는 다수의 예비 항체 클론 17종을 선별하였다.
[74]
[75]
2-4. 그룹핑
[76]
상기 선별한 17종의 양성 파아지 클론들을 그룹핑 하기 위하여 1차 시도와 동일하게 수행하였으며 이를 도 7에 나타내었다. 도 7에 나타낸 바와 같이 크게 6가지 그룹 - 3C4, 3C9, 5E2, 5H1, 5A7 및 5B8으로 나뉘었다.
[77]
[78]
2-5. 염기서열 분석 및 최종 양성 파아지 항체 선별
[79]
6개의 양성 파아지 클론에 대한 DNA 염기서열 분석 결과, 2종 (5H1, 5A7)의 파아지는 기존의 1차 패닝에서 선별했던 1그룹과 동일한 클론들이었고, 그 외 4종의 파아지는 새로운 항체임을 확인하였다.
[80]
[81]
2-6. 다수의 항원에 대한 비특이적 결합 테스트
[82]
선별된 4개의 양성 파아지 클론들의 경우 항원인 SCF-His에는 강하게 결합하였고 non-specific binding의 control로 사용되었던 ITGA6-Fc에는 결합하지 않음을 확인하였다. 그러나 좀 더 많은 불특정 단백질에 대한 특이성이 없는지를 최종 확인하기 위하여, 당사에서는 좀 더 다양한 control 항원들인 mFc, B7H4-mFc, hRA-Fc, IT-Fc 를 확인하였다. 그 결과 3C4의 양성 파아지 클론은 불특정 항원들에 다소 높게 결합하였고 나머지 3종의 양성 파아지 항체들은 불특정 항원에 대한 결합이 아주 낮게 나왔다. 상기 결과는 도 8에 나타내었다.
[83]
[84]
실시예 3. SCF에 특이적이고, IgG 형태인 항체 생산
[85]
3-1. IgG 형태로의 전환
[86]
상기 실시예를 통하여 최종 선별된 단일클론 파아지 항체들을 단일 사슬 항체에서 human IgG로 전환하기 위하여, 중쇄 및 경쇄의 가변영역 부분을 PCR하여 중쇄 및 경쇄의 불변영역이 포함되어 있는 발현벡터에 서브 클로닝(sub-cloning)하였다(도 9). 최종 선별된 항체 중쇄와 경쇄 두 종의 플라스미드를 HEK 293F 세포에 동시-형질주입시켜(co-transfeciton) 6일간 배양하였다.
[87]
[88]
3-2. IgG 항체 생산
[89]
6일간 임시발현 시스템을 이용하여 생산된 항체들은 세포 배양액에서 세포와 세포 파괴물들(cell debris)을 제거한 후, 단백질 A 친화도 크로마토그래피(protein A affinity chromatography)를 수행하여 IgG 항체를 정제하였다. 정제 후 글라이신 버퍼를 이용해 항체를 분리하고, 최종 재부유 버퍼는 PBS로 교환하였다. 정제된 항체를 BCA Assay 및 Nano Drop을 통해 정량하였고, 상기 항체를 환원 및 비-환원 조건에서 Agilent에 로딩하여 정제 단백질의 순도 및 유동성(mobility) 상태를 확인하였으며, 이를 도10에 나타내었다.
[90]
도 10에 나타낸 바와 같이, 비-환원 조건에서는 150 kDa이상의 크기에서 검출되었고 11E의 항체는 발현이 되지 않음을 알 수 있다. 최종 선별된 3종의 SCF 특이적 항체를 표 4에 나타내었다.
[91]
[표4]
SCF-his
파아지 클론 중쇄영역 인간항체germline과의상동성 경쇄영역 인간항체germline과의상동성 중쇄 영역(CDR3-아미노산 서열) 경쇄 영역(CDR3-아미노산 서열) 서열번호 S/NS
SCF-1F10 VH3-49 94.0% V2-14 81.9% RVPVADGYNHRVYYYYGLDVW QVWDTNSVV 1 S
SCF-1A8 VH6-1 98.0% V1-17 94.9% YCARGGGRYGLDV ASWDDSLSGVV 2 S
SCF-5E2 VH3-49 88.8% A18b 97.0% SGGDY MQGIHLPLT 3 S

[92]

산업상 이용가능성

[93]
본 발명은 SCF에 특이적으로 결합하는 항체를 제공함으로써, 향후 SCF 의존성 질병의 진행을 막는 등, 다양하게 응용될 수 있어 산업상 이용가능성이 우수하다.

청구범위

[청구항 1]
서열번호 1, 서열번호 2, 및 서열번호 3 으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산 서열을 포함하는, 항체.
[청구항 2]
제1항에 있어서, 상기 항체는 모노클로날 또는 폴리클로날인 것을 특징으로 하는, 항체.
[청구항 3]
제2항에 있어서, 상기 항체는 SCF에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 항체.

도면

[도1]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도2]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도3]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도4]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도5]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도6a]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도6b]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도6c]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도6d]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도7]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도8]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도9]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017] 

[도10]   [규칙 제91조에 의한 정정08.12.2017]