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1. WO2020189581 - 核酸増幅方法

公開番号 WO/2020/189581
公開日 24.09.2020
国際出願番号 PCT/JP2020/011249
国際出願日 13.03.2020
IPC
C12M 1/00 2006.01
C化学;冶金
12生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
M酵素学または微生物学のための装置
1酵素学または微生物学のための装置
C12Q 1/686 2018.01
C化学;冶金
12生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
Q酵素,核酸または微生物を含む測定または試験方法;そのための組成物または試験紙;その組成物を調製する方法;微生物学的または酵素学的方法における状態応答制御
1酵素,核酸または微生物を含む測定または試験方法;そのための組成物;そのような組成物の製造方法
68核酸を含むもの
6844核酸増幅反応
686ポリメラーゼ連鎖反応[2018.01]
C12Q 1/6876 2018.01
C化学;冶金
12生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
Q酵素,核酸または微生物を含む測定または試験方法;そのための組成物または試験紙;その組成物を調製する方法;微生物学的または酵素学的方法における状態応答制御
1酵素,核酸または微生物を含む測定または試験方法;そのための組成物;そのような組成物の製造方法
68核酸を含むもの
6876核酸分析で使用される核酸産物,例.プライマーまたはプローブ
出願人
  • 国立研究開発法人産業技術総合研究所 NATIONAL INSTITUTE OF ADVANCED INDUSTRIAL SCIENCE AND TECHNOLOGY [JP]/[JP]
  • 杏林製薬株式会社 KYORIN PHARMACEUTICAL CO., LTD. [JP]/[JP]
発明者
  • 永井 秀典 NAGAI, Hidenori
  • 岩浪 哲 IWANAMI, Satoru
代理人
  • 特許業務法人三枝国際特許事務所 SAEGUSA & PARTNERS
優先権情報
2019-04900915.03.2019JP
公開言語 (言語コード) 日本語 (JA)
出願言語 (言語コード) 日本語 (JA)
指定国 (国コード)
発明の名称
(EN) NUCLEIC ACID AMPLIFICATION METHOD
(FR) PROCÉDÉ D'AMPLIFICATION D'ACIDE NUCLÉIQUE
(JA) 核酸増幅方法
要約
(EN)
A reciprocal flow-type nucleic acid amplification method which comprises performing thermal cycling by reciprocally moving a sample liquid between two temperature zones via micro flow channels, said temperature zones being spatially separated and connected by the micro flow channels, wherein: the two temperature zone include a denaturation temperature zone and an extension and annealing temperature zone; the micro flow channels at least comprise a curved flow channel corresponding to the denaturation temperature zone, a curved flow channel corresponding to the extension and annealing temperature zone, a linear or curved intermediate flow channel connecting the curved flow channel corresponding to the denaturation temperature zone and the curved flow channel corresponding to the extension and annealing temperature zone, and a connection part connectable to a liquid feeding mechanism for enabling the movement of the sample liquid; the sample liquid is moved in the micro flow channels by the liquid feeding mechanism which is released to the atmospheric pressure when the liquid feeding is stopped; and fluorescence intensity is measured in every thermal cycle at definite positions of the flow channel corresponding to the denaturation temperature zone and the flow channel corresponding to the extension and annealing temperature zone to thereby perform real-time PCR.
(FR)
Procédé d'amplification d'acide nucléique de type à écoulement réciproque qui comprend la réalisation d'un cyclage thermique par déplacement alternatif d'un échantillon liquide entre deux zones de température par l'intermédiaire de micro-canaux d'écoulement, lesdites zones de température étant spatialement séparées et reliées par les micro-canaux d'écoulement : les deux zones de température comprennent une zone de température de dénaturation et une zone de température d'extension et de recuit; les micro-canaux d'écoulement comprennent au moins un canal d'écoulement incurvé correspondant à la zone de température de dénaturation, un canal d'écoulement incurvé correspondant à la zone de température d'extension et de recuit, un canal d'écoulement intermédiaire linéaire ou incurvé reliant le canal d'écoulement incurvé correspondant à la zone de température de dénaturation et au canal d'écoulement incurvé correspondant à la zone de température d'extension et de recuit, et une partie de raccordement pouvant être reliée à un mécanisme d'alimentation en liquide pour permettre le mouvement du liquide échantillon; le liquide échantillon est déplacé dans les canaux de micro-écoulement par le mécanisme d'alimentation en liquide qui est libéré à la pression atmosphérique lorsque l'alimentation en liquide est arrêtée; et l'intensité de fluorescence est mesurée dans chaque cycle thermique à des positions définies du canal d'écoulement correspondant à la zone de température de dénaturation et au canal d'Écoulement correspondant à la zone de température d'extension et de recuit pour ainsi effectuer une PCR en temps réel.
(JA)
空間的に離れた2つの温度帯が微小流路で結ばれており、試料液を微小流路中前記2つの温度帯間を往復移動させサーマルサイクリングを行うレシプロカルフロー型の核酸増幅方法において、前記2つの温度帯は変性温度帯及び伸長・アニーリング温度帯であり、前記微小流路は変性温度帯に対応する曲線流路、伸長・アニーリング温度帯に対応する曲線流路、前記変性温度帯に対応する曲線流路と伸長・アニーリング温度帯に対応する曲線流路とをつなぐ直線状又は曲線状の中間流路、並びに、試料液の移動を実現するための送液用機構に接続可能な接続部を少なくとも備え、微小流路中での試料液の移動は送液停止時には大気圧開放される送液用機構により行われ、前記変性温度帯に対応する流路及び前記伸長・アニーリング温度帯に対応する流路の所定の位置でサーマルサイクル毎の蛍光強度の計測を行うことでリアルタイムPCRを行う、方法。
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