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1. (WO2018221685) 改変されたCas9タンパク質及びその用途
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国際公開番号: WO/2018/221685 国際出願番号: PCT/JP2018/021068
国際公開日: 06.12.2018 国際出願日: 31.05.2018
IPC:
C12N 15/09 (2006.01) ,C12N 9/22 (2006.01) ,C12N 15/55 (2006.01)
C 化学;冶金
12
生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
N
微生物または酵素;その組成物;微生物の増殖,保存,維持;突然変異または遺伝子工学;培地
15
突然変異または遺伝子工学;遺伝子工学に関するDNAまたはRNA,ベクター,例.プラスミド,またはその分離,製造または精製;そのための宿主の使用
09
組換えDNA技術
C 化学;冶金
12
生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
N
微生物または酵素;その組成物;微生物の増殖,保存,維持;突然変異または遺伝子工学;培地
9
酵素,例.リガーゼ(6.);酵素前駆体;その組成物;酵素の調製,活性化,阻害,分離または精製方法
14
加水分解酵素(3.)
16
エステル結合に作用するもの(3.1)
22
リボヌクレアーゼ
C 化学;冶金
12
生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
N
微生物または酵素;その組成物;微生物の増殖,保存,維持;突然変異または遺伝子工学;培地
15
突然変異または遺伝子工学;遺伝子工学に関するDNAまたはRNA,ベクター,例.プラスミド,またはその分離,製造または精製;そのための宿主の使用
09
組換えDNA技術
11
DNAまたはRNAフラグメント;その修飾物
52
酵素または酵素前駆体をコードする遺伝子
55
加水分解酵素(3)
出願人:
国立大学法人 東京大学 THE UNIVERSITY OF TOKYO [JP/JP]; 東京都文京区本郷七丁目3番1号 3-1, Hongo 7-chome, Bunkyo-ku, Tokyo 1138654, JP
発明者:
濡木 理 NUREKI, Osamu; JP
西増 弘志 NISHIMASU, Hiroshi; JP
平野 央人 HIRANO, Hisato; JP
代理人:
高島 一 TAKASHIMA, Hajime; JP
鎌田 光宜 KAMADA, Mitsunori; JP
優先権情報:
2017-10855631.05.2017JP
発明の名称: (EN) MODIFIED Cas9 PROTEIN AND USE THEREOF
(FR) PROTÉINE Cas9 MODIFIÉE, ET APPLICATION ASSOCIÉE
(JA) 改変されたCas9タンパク質及びその用途
要約:
(EN) The purpose of the present invention is to provide a modified Cas9 protein having relaxed restriction of the target sequence while maintaining the ability to bind with guide RNA and the use thereof. A protein or the like including an amino acid sequence in which the arginine 1335 in SEQ ID NO: 1 is mutated to alanine (R1335A), isoleucine (R1335I), methionine (R1335M), threonine (R1335T), or valine (R1335V), the leucine 1111 is mutated to arginine (L1111R), the aspartic acid 1135 is mutated to valine (D1135V), the glycine 1218 is mutated to arginine (G1218R), the glutamic acid 1219 is mutated to phenylalanine (E1219F), the alanine 1322 is mutated to arginine (A1322R), and the threonine 1337 is mutated to arginine (T1337R).
(FR) L'invention a pour objet de fournir une protéine Cas9 modifiée et une application associée. Tout en maintenant sa capacité de liaison avec un ARN guide, la protéine Cas9 modifiée de l'invention présente des restrictions de séquence cible atténuées. Notamment, l'invention concerne une protéine qui contient une séquence d'acides aminés dans laquelle une arginine de position 1335 de SEQ ID NO:1 a subi une mutation en alanine (R1335A), en isoleucine (R1335I), en méthionine (R1335M), en thréonine (R1335T) ou en valine (R1335V), une leucine de position 1111 a subi une mutation en arginine (L1111R), un acide aspartique de position 1135 a subi une mutation en valine (D1135V), une glycine de position 1218 a subi une mutation en arginine (G1218R), un acide glutamique de position 1219 a subi une mutation en phénylalanine (E1219F), une alanine de position 1322 a subi une mutation en arginine (A1322R), et une thréonine de position 1337 a subi une mutation en arginine (T1337R).
(JA) 本発明は、ガイドRNAとの結合能は維持しつつ標的配列の制限が緩和された改変されたCas9タンパク質及びその用途を提供することを目的とする。配列番号1において1335位のアルギニンがアラニン(R1335A)、イソロイシン(R1335I)、メチオニン(R1335M)、スレオニン(R1335T)又はバリン(R1335V)に、1111位のロイシンがアルギニンに(L1111R)、1135位のアスパラギン酸がバリンに(D1135V)、1218位のグリシンがアルギニンに(G1218R)、1219位のグルタミン酸がフェニルアラニンに(E1219F)、1322位のアラニンがアルギニンに(A1322R)、1337位のスレオニンがアルギニンに(T1337R)に変異したアミノ酸配列を含むタンパク質等。
指定国: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JO, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
アフリカ広域知的所有権機関(ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
ユーラシア特許庁(EAPO) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
欧州特許庁(EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
アフリカ知的所有権機関(OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
国際公開言語: 日本語 (JA)
国際出願言語: 日本語 (JA)