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1. (WO2018043546) 変異型酵素の製造方法及び変異型アルコールアシルトランスフェラーゼ
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国際公開番号: WO/2018/043546 国際出願番号: PCT/JP2017/031116
国際公開日: 08.03.2018 国際出願日: 30.08.2017
IPC:
C12P 21/02 (2006.01) ,C12N 9/10 (2006.01) ,C12N 15/09 (2006.01)
C 化学;冶金
12
生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
P
発酵または酵素を使用して所望の化学物質もしくは組成物を合成する方法またはラセミ混合物から光学異性体を分離する方法
21
ペプチドまたは蛋白質の製造
02
2以上のアミノ酸の結合順序が既知のもの,例.グルタチオン
C 化学;冶金
12
生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
N
微生物または酵素;その組成物;微生物の増殖,保存,維持;突然変異または遺伝子工学;培地
9
酵素,例.リガーゼ(6.);酵素前駆体;その組成物;酵素の調製,活性化,阻害,分離または精製方法
10
転移酵素(2.)
C 化学;冶金
12
生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
N
微生物または酵素;その組成物;微生物の増殖,保存,維持;突然変異または遺伝子工学;培地
15
突然変異または遺伝子工学;遺伝子工学に関するDNAまたはRNA,ベクター,例.プラスミド,またはその分離,製造または精製;そのための宿主の使用
09
組換えDNA技術
出願人:
三菱ケミカル株式会社 MITSUBISHI CHEMICAL CORPORATION [JP/JP]; 東京都千代田区丸の内一丁目1番1号 1-1, Marunouchi 1-chome, Chiyoda-ku, Tokyo 1008251, JP
発明者:
湯 不二夫 YU Fujio; JP
水無 渉 MIZUNASHI Wataru; JP
代理人:
梅田 慎介 UMEDA Shinsuke; JP
松任谷 優子 MATSUTOYA Yuko; JP
優先権情報:
2016-16819530.08.2016JP
発明の名称: (EN) METHOD FOR PRODUCING MUTANT ENZYME, AND MUTANT ALCOHOL ACYLTRANSFERASE
(FR) PROCÉDÉ DE PRODUCTION D’UNE ENZYME MUTANTE, ET ALCOOL ACYLTRANSFÉRASE MUTANTE
(JA) 変異型酵素の製造方法及び変異型アルコールアシルトランスフェラーゼ
要約:
(EN) Provided is a method for producing an enzyme having higher activity per recombinant than does the standard form, the method including the following steps, as an efficient method for causing a target protein to be expressed in a transformant as an active soluble recombinant protein. (1) A step for producing a recombinant that expresses a mutant having an amino acid sequence in which one or more cysteines have been substituted by other amino acid residues in the amino acid sequence of the standard form; (2) a step for selecting a plurality of mutants that show activity per recombinant of 50% or higher in comparison to 100% activity of the standard form; and (3) a step for inducing expression of a mutant in which corresponding amino acid residues are substituted at two or more sites among the sites at which amino acid residues were substituted in each of the mutants selected in step (2).
(FR) La présente invention concerne un procédé de production d’une enzyme présentant une activité supérieure par recombinant par rapport à la forme standard, le procédé comprenant les étapes suivantes, comme procédé efficace destiné à entraîner l’expression d’une protéine cible dans un transformant comme protéine recombinante soluble active. (1) Une étape de production d’un recombinant qui exprime un mutant présentant une séquence d’acides aminés dans laquelle une ou plusieurs cystéines ont été substituées par d’autres résidus d’acides aminés dans la séquence d’acides aminés de la forme standard ; (2) une étape de sélection d’une pluralité de mutants qui présentent une activité par recombinant de 50 % ou plus comparativement à 100 % d’activité de la forme standard ; et (3) une étape d’induction de l’expression d’un mutant dans lequel les résidus d’acides aminés correspondants sont substitués à au moins deux sites parmi les sites au niveau desquels les résidus d’acides aminés ont été substitués dans chacun des mutants sélectionnés dans l’étape (2).
(JA) 目的タンパク質を活性な可溶性組換タンパク質として形質転換体中で発現させるための効率的な方法として、以下の工程を含む、基準体に比して、組換体あたりの活性が向上した酵素を製造する方法を提供する。 (1)基準体のアミノ酸配列において1以上のシステインが他のアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列を有する変異体を発現する組換体を作成する工程、 (2)基準体の活性100%に比して50%以上の組換体あたりの活性を示す複数の変異体を選択する工程、 (3)工程(2)において選択されたそれぞれの変異体が有するアミノ酸残基が置換された部位のうち、2以上の部位において、それぞれ対応するアミノ酸残基が置換された変異体を発現させる工程。
指定国: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JO, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
アフリカ広域知的所有権機関(ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
ユーラシア特許庁(EAPO) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
欧州特許庁(EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
アフリカ知的所有権機関(OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
国際公開言語: 日本語 (JA)
国際出願言語: 日本語 (JA)