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1. (WO2016182022) 高分子を細胞と共に凝集させる技術
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Translation翻訳: 原文 > 日本語
国際公開番号:    WO/2016/182022    国際出願番号:    PCT/JP2016/064167
国際公開日: 17.11.2016 国際出願日: 12.05.2016
予備審査請求日:    13.10.2016    
IPC:
C12N 11/08 (2006.01)
出願人: PUBLIC UNIVERSITY CORPORATION YOKOHAMA CITY UNIVERSITY [JP/JP]; 22-2, Seto, Kanazawa-ku, Yokohama-shi, Kanagawa 2360027 (JP)
発明者: KOJIMA, Nobuhiko; (JP)
代理人: MAYAMA, Setsuko; (JP)
優先権情報:
2015-099064 14.05.2015 JP
発明の名称: (EN) TECHNIQUE FOR AGGREGATING MACROMOLECULES TOGETHER WITH CELLS
(FR) TECHNIQUE PERMETTANT D’AGRÉGER DES MACROMOLÉCULES À DES CELLULES
(JA) 高分子を細胞と共に凝集させる技術
要約: front page image
(EN)Provided is a technique for efficiently aggregating macromolecules such as ECM together with cells. A method for creating a cell or a cell aggregate loaded with macromolecules, the method comprising adding, to a medium containing a swellable material, a solution containing macromolecules and at least one cell to aggregate the macromolecules together with the cell. A method for controlling the function and/or the property of a cell or a cell aggregate, the method comprising culturing the cell or the cell aggregate loaded with the macromolecules created in the aforementioned method. A method for culturing a cell or a cell aggregate, the method comprising: adding, to a medium containing a swellable material, a solution containing macromolecules and at least one cell to aggregate the macromolecules together with the cell and to produce a macromolecule capsule encapsulating the cell or the cell aggregate; and culturing the cell or the cell aggregate in the capsule. For preparing a three-dimensional cell tissue, methods such as 96-well U-bottom plating and hanging drop technique are conventionally used. In the methods of the present invention, 2000 cells are mixed with 1 μl of the medium containing ECM, and the ECM and cells can be simultaneously aggregated. If the efficiency here is defined as 1, a calculation can be made that, when 96-well U-bottom plating or hanging drop technique is used, ECM can only be mixed in the three-dimensional cell tissue at an efficiency of about 1/12000 or about 1/2400, respectively. Thus, with the present invention, the cost for ECM can be reduced to about one several-thousandth to one hundred-thousandth, and it becomes possible to effectively use artificial ECM that cannot be synthesized in large quantity or rare ECM that can be extracted only at a very small amount because of reasons such as the subject being a small living organism.
(FR)Cette invention concerne une technique permettant d'agréger efficacement des macromolécules telles que des ECM à des cellules. Le procédé de création d'une cellule ou d'un agrégat de cellules chargé(e) de macromolécules selon l'invention comprend l'ajout, à un milieu contenant un matériau doué de gonflement, d'une solution contenant des macromolécules et au moins une cellule pour agréger les macromolécules à la cellule. L'invention concerne également un procédé de régulation de la fonction et/ou de la propriété d'une cellule ou un agrégat de cellules, le procédé comprenant la culture de la cellule ou de l'agrégat de cellules chargé(e) de macromolécules créé(e) dans le procédé précité. Un procédé de culture d'une cellule ou d'un agrégat de cellules est en outre décrit, ledit procédé comprenant : l'ajout, à un milieu contenant un matériau doué de gonflement, d'une solution contenant des macromolécules et au moins une cellule pour agréger les macromolécules à la cellule. et obtenir une capsule macromoléculaire encapsulant la cellule ou l'agrégat de cellules ; et la mise en culture de la cellule ou de l'agrégat de cellules dans la capsule. Pour préparer un tissu cellulaire tridimensionnel, des procédés tels que l'étalement sur plaque à fond en U 96 puits et la technique de la goutte suspendue sont généralement utilisés. Dans les procédés selon la présente invention, 2000 cellules sont mélangées à 1 μl du milieu contenant l'ECM, et l'ECM et les cellules peuvent être simultanément agrégées. Si ici l'efficacité est définie à 1, un calcul peut être effectué selon lequel, quand l'étalement sur plaque 96 puits, à fonds en U ou la technique de la goutte suspendue est utilisé, l'ECM ne peut être mélangée au tissu cellulaire tridimensionnel qu'à une efficacité d'environ 1/12000 ou d'environ 1/2400, respectivement. Par conséquent, la présente invention permet de réduire le coût de l'ECM à environ plusieurs millièmes à cent millièmes, et permet d'utiliser efficacement une ECM artificielle qui ne peut pas être synthétisée en grandes quantités ou une ECM rare qui ne peut être extraite qu'en une très petite quantité pour des raisons telles, par exemple, que le sujet est un petit organisme vivant.
(JA)効率良く、ECMなどの高分子を細胞と共に凝集させる技術を提供する。 膨潤性材料を含有する培地へ高分子と少なくとも1個の細胞とを含む溶液を添加して、高分子と細胞を共に凝集させることを含む、高分子が充填された細胞又は細胞凝集体を作製する方法。前記の方法で作製した、高分子が充填された細胞又は細胞凝集体を培養することを含む、細胞又は細胞凝集体の性状及び又は機能を制御する方法。膨潤性材料を含有する培地へ高分子と少なくとも1個の細胞とを含む溶液を添加して、高分子と細胞を共に凝集させることで、細胞又は細胞凝集体を封入した高分子のカプセルを作製し、このカプセル内で細胞又は細胞凝集体を培養することを含む、細胞又は細胞凝集体の培養方法。 三次元細胞組織の作製には、従来の方法であれば96穴U字ボトムプレート法やハンギングドロップ法が利用される。本発明の方法では、1 μlのECM含有培地に2000個の細胞を混ぜて、ECMと細胞とを同時に凝集させることができる。この場合の効率を1とすると、96穴U字ボトムプレート法では、1/12000程度、ハンギングドロップ法では、1/2400程度の効率でしか、ECMを三次元細胞組織に混ぜることができない計算になる。従って、本発明により、ECMにかかる費用を数千~1万分の1程度にできるほか、大量に合成できないような人工ECMや、対象が小さい生物であるなどの理由からごく少量しか抽出できない希少ECMを有効に使うことができる。
指定国: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
アフリカ広域知的所有権機関(ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
ユーラシア特許庁(EAPO) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
欧州特許庁(EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
アフリカ知的所有権機関(OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
国際公開言語: Japanese (JA)
国際出願言語: Japanese (JA)