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1. (WO2011111775) 血液遊離核酸の抽出方法
国際事務局に記録されている最新の書誌情報   

Translation翻訳: 原文 > 日本語
国際公開番号:    WO/2011/111775    国際出願番号:    PCT/JP2011/055628
国際公開日: 15.09.2011 国際出願日: 10.03.2011
IPC:
C12N 15/00 (2006.01), C12N 15/09 (2006.01)
出願人: KONICA MINOLTA HOLDINGS, INC. [JP/JP]; 1-6-1, Marunouchi, Chiyoda-ku, Tokyo 1000005 (JP) (米国を除く全ての指定国).
TAMURA, Tsuruki [JP/JP]; (JP) (米国のみ)
発明者: TAMURA, Tsuruki; (JP)
代理人: SSINPAT PATENT FIRM; Gotanda Yamazaki Bldg. 6F, 13-6, Nishigotanda 7-chome, Shinagawa-ku, Tokyo 1410031 (JP)
優先権情報:
2010-055665 12.03.2010 JP
発明の名称: (EN) METHOD FOR EXTRACTION OF FREE NUCLEIC ACID IN BLOOD
(FR) MÉTHODE D'EXTRACTION D'ACIDES NUCLÉIQUES LIBRES DANS LE SANG
(JA) 血液遊離核酸の抽出方法
要約: front page image
(EN)Heretofore, for selectively extracting a nucleic acid encapsulated in microvesicles in blood, blood cells contained in a blood sample is separated by centrifugation and a supernatant is collected and homogenated. Centrifugation has complicated steps, and has disadvantages such as contamination of blood cells during the collection of a supernatant. If the supernatant is contaminated with blood cells, a nucleic acid derived from microvesicles cannot be quantified correctly. Thus, disclosed is a method for extracting a nucleic acid encapsulated in microvesicles in blood readily and rapidly, which does not have the above-mentioned disadvantages. Specifically disclosed is a method for extracting a nucleic acid encapsulated in microvesicles, which is characterized by applying a high-voltage pulse to a solution containing microvesicles having at least nucleated cells, platelets and the nucleic acid encapsulated therein and a nuclease to disrupt the nucleated cells and the platelets, thereby allowing the microvesicles to be left.
(FR)Jusqu'à présent, pour l'extraction sélective d'un acide nucléique encapsulé dans des microvésicules du sang, les cellules sanguines contenues dans un échantillon de sang étaient séparées par centrifugation et on récupérait et homogénéisait un surnageant. La centrifugation comporte des étapes compliquées, et présente des inconvénients tels que la contamination par des cellules sanguines pendant la collecte d'un surnageant. Si le surnageant est contaminé par des cellules sanguines, un acide nucléique dérivé de microvésicules ne peut être quantifié correctement. Ainsi, on divulgue une méthode d'extraction d'un acide nucléique encapsulé dans des microvésicules du sang aisément et rapidement, ne présentant pas les inconvénients susmentionnés. On divulgue spécifiquement une méthode d'extraction d'un acide nucléique encapsulé dans des microvésicules, qui est caractérisée par l'application d'une impulsion haute tension à une solution contenant les microvésicules ayant au moins des cellules nucléées, des plaquettes et l'acide nucléique y étant encapsulé, et une nucléase destinée à rompre les cellules nucléées et les plaquettes, permettant ainsi aux microvésicules d'être isolées.
(JA)[課題]従来、血液中のマイクロベシクル内の核酸を選択的に抽出するには、血液試料の血球細胞を遠心操作により分離し、上清を分取してホモジネート処理していた。遠心操作は工程が煩雑で、上清分取の際に血球が混入するなどの問題があった。血球細胞が混入すると、正確なマイクロベシクル由来核酸を定量することができない。本発明は、上記のような問題を排し、血液中のマイクロベシクルに内包されている核酸を簡易迅速に抽出する方法を提供することを目的とする。 [解決手段]本発明の、マイクロベシクルに内包された核酸の抽出方法は、少なくとも有核細胞,血小板,核酸を内包するマイクロベシクルおよびヌクレアーゼを含む溶液に、高電圧パルスを印加し、該有核細胞および該血小板を破砕し、該マイクロベシクルを残存させる工程を含むことを特徴とする。
指定国: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
アフリカ広域知的所有権機関(ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
ユーラシア特許庁(EAPO) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
欧州特許庁(EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
アフリカ知的所有権機関(OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
国際公開言語: Japanese (JA)
国際出願言語: Japanese (JA)