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1. (WO2010131645) RNAに対応する二本鎖DNAの合成方法及び増幅方法
国際事務局に記録されている最新の書誌情報   

Translation翻訳: 原文 > 日本語
国際公開番号:    WO/2010/131645    国際出願番号:    PCT/JP2010/057942
国際公開日: 18.11.2010 国際出願日: 11.05.2010
IPC:
C12N 15/09 (2006.01)
出願人: WAKO PURE CHEMICAL INDUSTRIES, LTD. [JP/JP]; 1-2, Doshomachi 3-chome, Chuo-ku, Osaka-shi, Osaka 5408605 (JP) (米国を除く全ての指定国).
HAYASHIDA Yukinobu [JP/JP]; (JP) (米国のみ)
発明者: HAYASHIDA Yukinobu; (JP)
優先権情報:
2009-117151 14.05.2009 JP
発明の名称: (EN) METHOD FOR SYNTHESIS OF DOUBLE-STRANDED DNA CORRESPONDING TO RNA, AND METHOD FOR AMPLIFICATION OF THE DNA
(FR) PROCÉDÉ POUR LA SYNTHÈSE D'ADN BICATÉNAIRE CORRESPONDANT À UN ARN, ET PROCÉDÉ POUR L'AMPLIFICATION DE L'ADN
(JA) RNAに対応する二本鎖DNAの合成方法及び増幅方法
要約: front page image
(EN)Disclosed are: a method for synthesizing double-stranded DNA from corresponding specific RNA at low cost and in a simple manner; and a method for amplifying the double-stranded DNA. Specifically disclosed are: a method for synthesizing double-stranded DNA having a nucleotide sequence corresponding to template RNA having a poly-A attached thereto, which is characterized by comprising step 1 of carrying out a reverse transcription reaction of the template RNA having a poly-A attached thereto using an oligo (dT) primer having, added to the 5'-terminal thereof, a DNA fragment having a known sequence to thereby obtain single-stranded DNA and step 2 of carrying out a double-strand formation reaction of the single-stranded DNA obtained in step 1 using a random primer having, added to the 5'-terminal thereof, a DNA fragment having a known sequence in the presence of a polymerase that does not have a 3'→5' exonuclease activity and a chain substitution activity to thereby obtain double-stranded DNA; and a method for amplifying double-stranded DNA having a nucleotide sequence corresponding to template RNA having a poly-A attached thereto, which is characterized by comprising step 3 of carrying out a PCR reaction using the double-stranded DNA.
(FR)La présente invention concerne : un procédé pour synthétiser un ADN bicaténaire à partir d'un ARN spécifique correspondant à faible coût et d'une manière simple ; et un procédé pour amplifier l'ADN bicaténaire. La présente invention concerne spécifiquement : un procédé pour synthétiser un ADN bicaténaire ayant une séquence nucléotidique correspondant à un ARN de matrice ayant un poly-A lié à celui-ci, qui est caractérisé en ce qu'il comprend l'étape 1 de conduite d'une réaction de transcription inverse de l'ARN de matrice ayant un poly-A lié à celui-ci utilisant une amorce d'oligo (dT) ayant, ajouté à l'extrémité 5'-terminale de celle-ci, un fragment d'ADN ayant une séquence connue de manière à obtenir un ADN monocaténaire et l'étape 2 consistant à conduire une réaction de formation de double brin de l'ADN monocaténaire obtenu dans l'étape 1 en utilisant une amorce aléatoire ayant, ajouté à l'extrémité 5'-terminale de celle-ci, un fragment d'ADN ayant une séquence connue en présence d'une polymérase qui n'a pas une activité exonucléase 3'→5' et une activité de substitution de chaîne de manière à obtenir un ADN bicaténaire ; et un procédé pour amplifier un ADN bicaténaire ayant une séquence nucléotidique correspondant à un ARN de matrice ayant un poly-A lié à celui-ci, qui est caractérisé en ce qu'il comprend l'étape 3 de conduite d'une réaction de PCR utilisant l'ADN bicaténaire.
(JA) 本発明は、安価で且つ簡便に特定のRNAから対応する二本鎖DNAを合成する方法及び該二本鎖DNAを増幅する方法の提供を課題とし、既知配列のDNA断片を5'末端に付加したオリゴ(dT)プライマーを用いて、polyAを有する鋳型RNAの逆転写反応を行い、一本鎖DNAを取得する工程1、及び、3'→5'エキソヌクレアーゼ活性及び鎖置換活性を有さないポリメラーゼの存在下、既知配列のDNA断片を5'末端に付加したランダムプライマーを用いて、工程1で得られた一本鎖DNAの二本鎖化反応を行い、二本鎖DNAを取得する工程2を含むことを特徴とする、polyAを有する鋳型RNAに対応する塩基配列を有する二本鎖DNAの合成方法、並びに、得られた二本鎖DNAを用いて、更にPCR反応を行う工程3を含むことを特徴とする、polyAを有する鋳型RNAに対応する塩基配列を有する二本鎖DNAの増幅方法に関する。
指定国: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
アフリカ広域知的所有権機関(ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
ユーラシア特許庁(EAPO) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
欧州特許庁(EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, SE, SI, SK, SM, TR)
アフリカ知的所有権機関(OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
国際公開言語: Japanese (JA)
国際出願言語: Japanese (JA)