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1. WO2004039989 - 非天然型アミノ酸組み込みタンパク質の発現方法

公開番号 WO/2004/039989
公開日 13.05.2004
国際出願番号 PCT/JP2003/014028
国際出願日 31.10.2003
予備審査請求日 12.07.2004
IPC
C12N 9/00 2006.01
C化学;冶金
12生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
N微生物または酵素;その組成物;微生物の増殖,保存,維持;突然変異または遺伝子工学;培地
9酵素,例.リガーゼ(6.);酵素前駆体;その組成物;酵素の調製,活性化,阻害,分離または精製方法
CPC
A61K 48/00
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
48Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
C12N 9/93
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
93Ligases (6)
出願人
  • RIKEN [JP]/[JP] (AllExceptUS)
  • JAPAN SCIENCE AND TECHNOLOGY AGENCY [JP]/[JP] (AllExceptUS)
  • YOKOYAMA, Shigeyuki [JP]/[JP] (UsOnly)
  • SHIROUZU, Mikako [JP]/[JP] (UsOnly)
  • SAKAMOTO, Ayako [JP]/[JP] (UsOnly)
  • SAKAMOTO, Kensaku [JP]/[JP] (UsOnly)
発明者
  • YOKOYAMA, Shigeyuki
  • SHIROUZU, Mikako
  • SAKAMOTO, Ayako
  • SAKAMOTO, Kensaku
代理人
  • SHIGA, Masatake
優先権情報
2002-31884631.10.2002JP
公開言語 (言語コード) 日本語 (JA)
出願言語 (言語コード) 日本語 (JA)
指定国 (国コード)
発明の名称
(EN) METHOD OF EXPRESSING PROTEIN HAVING UNNATURAL AMINO ACID INTEGRATED THEREINTO
(FR) PROCEDE PERMETTANT L'EXPRESSION D'UNE PROTEINE CONTENANT UN ACIDE AMINE NON NATUREL
(JA) 非天然型アミノ酸組み込みタンパク質の発現方法
要約
(EN)
A method of expressing a protein having an unnatural amino acid integrated thereinto characterized by comprising expressing (A) a mutant tyrosyl tRNA synthase which is a mutant of Escherichia coli-origin tyrosyl tRNA synthase and has an elevated specificity for a unnatural tyrosine derivative compared with the specificity for tyrosine, (B) a suppressor tRNA originating in an eubacterium belonging to the genus Bacillus, Mycoplasma or Staphylococcus which is capable of binding to the above tyrosine derivative in the presence of the above mutant TyrRS, and (C) a desired protein gene having a nonsense mutation at a desired site in animal cells to thereby incorporate the above tyrosine derivative into the nonsense mutation site in the above protein.
(FR)
L'invention concerne un procédé permettant l'expression d'une protéine contenant un acide aminé non naturel. Ce procédé est caractérisé par l'expression (A) d'une tyrosyl-ARNt synthétase mutante qui est une forme mutante d'une tyrosyl-ARNt synthétase de Escherichia coli et présente une spécificité élevée vis-à-vis d'un dérivé de tyrosine non naturel par comparaison à sa spécificité vis-à-vis de la tyrosine, (B) d'un ARNt suppresseur provenant d'une eubactérie des genres bacille, mycoplasme ou staphylocoque, qui est capable de se lier avec ces dérivés de tyrosine, en présence du mutant TyRS décrit, et (C) du gène d'une protéine souhaitée comprenant une mutation non-sens dans un site donné, dans des cellules animales, afin d'incorporer les dérivé de tyrosine décrit dans le site de mutation non-sens de cette protéine.
(JA)
(A)大腸菌由来のチロシルtRNA合成酵素の変異体であって、チロシンに対する特異性に比べて非天然型のチロシン誘導体に対する特異性が高められた変異チロシルtRNA合成酵素と、(B)上記変異TyrRSの存在下で上記チロシン誘導体と結合可能な、バチルス属、マイコプラズマ属、又はスタフィロコッカス属真性細菌由来のサプレッサーtRNAと、(C)所望の位置にナンセンス変異を受けた所望のタンパク質遺伝子とを動物細胞中で発現させて、上記タンパク質のナンセンス変異の位置に上記チロシン誘導体を取りこませることを特徴とする、非天然型アミノ酸組み込みタンパク質の発現方法である。
関連公開情報:
国際事務局に記録されている最新の書誌情報