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1. JP2013216660 - CDRのアミノ酸置換により抗体の等電点を改変する方法

官庁 日本
出願番号 2013110004
出願日 24.05.2013
公開番号 2013216660
公開日 24.10.2013
特許番号 5731573
特許付与日 17.04.2015
公報種別 B2
IPC
C07K 16/00
C化学;冶金
07有機化学
Kペプチド
16免疫グロブリン,例.モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体
C07K 1/14
C化学;冶金
07有機化学
Kペプチド
1ペプチドの製造のための一般方法
14抽出;分離;精製
C12N 15/09
C化学;冶金
12生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学
N微生物または酵素;その組成物;微生物の増殖,保存,維持;突然変異または遺伝子工学;培地
15突然変異または遺伝子工学;遺伝子工学に関するDNAまたはRNA,ベクター,例.プラスミド,またはその分離,製造または精製;そのための宿主の使用
09組換えDNA技術
CPC
A61K 39/39591
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
39Medicinal preparations containing antigens or antibodies
395Antibodies
39591Stabilisation, fragmentation
C07K 16/00
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
16Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
C07K 2317/565
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
2317Immunoglobulins specific features
50characterized by immunoglobulin fragments
56variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
565Complementarity determining region [CDR]
C07K 2317/732
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
2317Immunoglobulins specific features
70characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
73Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
732Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
C07K 2317/94
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
2317Immunoglobulins specific features
90characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
94Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
A61P 37/02
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
37Drugs for immunological or allergic disorders
02Immunomodulators
出願人 CHUGAI PHARMACEUT CO LTD
中外製薬株式会社
発明者 IGAWA TOMOYUKI
井川 智之
TSUNODA HIROYUKI
角田 浩行
TACHIBANA TATSUHIKO
橘 達彦
KURAMOCHI TAICHI
倉持 太一
代理人 清水 初志
春名 雅夫
山口 裕孝
刑部 俊
井上 隆一
佐藤 利光
新見 浩一
小林 智彦
大関 雅人
五十嵐 義弘
川本 和弥
優先権情報 2007250165 26.09.2007 JP
2007256063 28.09.2007 JP
発明の名称
(EN) METHOD OF MODIFYING ISOELECTRIC POINT OF ANTIBODY VIA AMINO ACID SUBSTITUTION IN CDR
(JA) CDRのアミノ酸置換により抗体の等電点を改変する方法
要約
(EN)

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a purification method of a multispecific polypeptide including a first polypeptide and a second polypeptide, each of which includes an antibody variable region.

SOLUTION: In a purification method of a multispecific polypeptide including a first polypeptide and a second polypeptide, each of which includes an antibody variable region, a nucleic acid encoding a polypeptide including at least one amino acid residue is modified in such a way that a charge of the amino acid residue which can be exposed on a surface of a CDR region of the polypeptide is modified, the modification of the nucleic acid modifies both or any one of a nucleic acid encoding the amino acid residues of the first polypeptide and a nucleic acid encoding the amino acid residues of the second polypeptide so that the difference between the isoelectric points of the first polypeptide and the second polypeptide is increased when compared to before modification, a host cell including the nucleic acids, obtained by modifying both or any one of the nucleic acids, is cultured so as to express the nucleic acids, and a multispecific polypeptide is purified from the culture by chromatography.

COPYRIGHT: (C)2014,JPO&INPIT

(JA)

【課題】抗体の可変領域を有する第1のポリペプチドおよび第2のポリペプチドを含む多重特異性ポリペプチドの精製方法を提供する。
【解決手段】抗体の可変領域を有する第1のポリペプチドおよび第2のポリペプチドを含む多重特異性ポリペプチドの精製方法であって、当該ポリペプチドのCDR領域の表面に露出し得る少なくとも1つのアミノ酸残基の電荷が改変するように、当該アミノ酸残基を含むポリペプチドをコードする核酸を改変し、当該核酸の改変が、改変前と比較して、第1のポリペプチドと第2のポリペプチドの等電点の差が増大するように第1のポリペプチドのアミノ酸残基をコードする核酸および第2のポリペプチドのアミノ酸残基をコードする核酸の両方またはいずれかを改変し、前記いずれかの核酸が改変された核酸を含む宿主細胞を、該核酸が発現するように培養し、培養物からクロマトグラフィーにより多重特異性ポリペプチドを精製する方法。
【選択図】なし