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1. WO2020094005 - PRÉPARATION, CARACTÉRISATION ET UTILISATION D'UNE MARTENTOXINE DE RECOMBINAISON

Numéro de publication WO/2020/094005
Date de publication 14.05.2020
N° de la demande internationale PCT/CN2019/115709
Date du dépôt international 05.11.2019
CIB
C07K 19/00 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
07CHIMIE ORGANIQUE
KPEPTIDES
19Peptides hybrides
C12N 15/62 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
11Fragments d'ADN ou d'ARN; Leurs formes modifiées
62Séquences d'ADN codant pour des protéines de fusion
C12N 1/21 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
1Micro-organismes, p.ex. protozoaires; Compositions les contenant; Procédés de culture ou de conservation de micro-organismes, ou de compositions les contenant; Procédés de préparation ou d'isolement d'une composition contenant un micro-organisme; Leurs milieux de culture
20Bactéries; Leurs milieux de culture
21modifiés par l'introduction de matériel génétique étranger
C12P 21/06 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
PPROCÉDÉS DE FERMENTATION OU PROCÉDÉS UTILISANT DES ENZYMES POUR LA SYNTHÈSE D'UN COMPOSÉ CHIMIQUE DONNÉ OU D'UNE COMPOSITION DONNÉE, OU POUR LA SÉPARATION D'ISOMÈRES OPTIQUES À PARTIR D'UN MÉLANGE RACÉMIQUE
21Préparation de peptides ou de protéines
06préparés par hydrolyse d'une liaison peptidique, p.ex. hydrolysats
C12Q 1/02 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
QPROCÉDÉS DE MESURE OU DE TEST FAISANT INTERVENIR DES ENZYMES, DES ACIDES NUCLÉIQUES OU DES MICRO-ORGANISMES; COMPOSITIONS OU PAPIERS RÉACTIFS À CET EFFET; PROCÉDÉS POUR PRÉPARER CES COMPOSITIONS; PROCÉDÉS DE COMMANDE SENSIBLES AUX CONDITIONS DU MILIEU DANS LES PROCÉDÉS MICROBIOLOGIQUES OU ENZYMOLOGIQUES
1Procédés de mesure ou de test faisant intervenir des enzymes, des acides nucléiques ou des micro-organismes; Compositions à cet effet; Procédés pour préparer ces compositions
02faisant intervenir des micro-organismes viables
CPC
C07K 14/43522
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
14Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
435from animals; from humans
43504from invertebrates
43513from arachnidae
43522from scorpions
C07K 2319/00
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
2319Fusion polypeptide
C12P 21/06
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
21Preparation of peptides or proteins
06produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
G01N 27/26
GPHYSICS
01MEASURING; TESTING
NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
27Investigating or analysing materials by the use of electric, electro-chemical, or magnetic means
26by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
G01N 33/502
GPHYSICS
01MEASURING; TESTING
NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
48Biological material, e.g. blood, urine
50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
5005involving human or animal cells
5008for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
502for testing non-proliferative effects
Déposants
  • 中国科学院上海有机化学研究所 SHANGHAI INSTITUTE OF ORGANIC CHEMISTRY, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES [CN]/[CN]
Inventeurs
  • 曹春阳 CAO, Chunyang
  • 刘新莲 LIU, Xinlian
  • 陶杰 TAO, Jie
  • 吉永华 JI, Yonghua
  • 蓝文贤 LAN, Wenxian
Mandataires
  • 上海一平知识产权代理有限公司 XU & PARTNERS, LLC.
Données relatives à la priorité
201811308401.805.11.2018CN
Langue de publication chinois (ZH)
Langue de dépôt chinois (ZH)
États désignés
Titre
(EN) PREPARATION, CHARACTERIZATION AND USE OF RECOMBINANT MARTENTOXIN
(FR) PRÉPARATION, CARACTÉRISATION ET UTILISATION D'UNE MARTENTOXINE DE RECOMBINAISON
(ZH) 重组Martentoxin的制备、表征及应用
Abrégé
(EN)
Provided is a method for preparing a recombinant Martentoxin (MarTX toxin for short), the method comprising: connecting a Martentoxin gene and a maltose binding protein with a vector pETDuent-1 to obtain a recombinant expression vector pETDuent-1-MarTX; converting the recombinant expression vector into E.coli Origami B (DE3), and by means of screening, obtaining a strain with a high-efficiency expression level; and by means of inducible expression and affinity chromatography purification, obtaining a recombinant MarTX toxin with a biological activity, which can significantly inhibit a large-conductance, calcium ion- and voltage-activated potassium ion (BK) channel current. Further provided is the use of the MarTX toxin in drug screening of a (α+β4) BK channel current inhibitor.
(FR)
L'invention concerne un procédé de préparation d'une martentoxine de recombinaison (toxine MarTX en abrégé), le procédé comprenant : la liaison d'un gène de martentoxine et d'une protéine de liaison au maltose avec un vecteur pETDuent-1 pour obtenir un vecteur d'expression recombiné pETDuent-1-MarTX ; la conversion du vecteur d'expression recombiné en E.coli Origami B (DE3), et l'obtention d'une souche ayant un niveau d'expression à haut rendement, au moyen d'un criblage ; et l'obtention, au moyen d'une expression inductible et d'une purification par chromatographie d'affinité, d'une toxine MarTX de recombinaison ayant une activité biologique, qui peut inhiber de manière significative une forte conductance, un courant de canal ionique potassique (BK) activé par des ions de calcium et par tension. L'invention concerne en outre l'utilisation de la toxine MarTX dans le criblage de médicament à base d'un inhibiteur de courant de canal BK (α+β4).
(ZH)
提供一种重组Martentoxin(简称MarTX毒素)的制备方法,包括将Martentoxin基因和麦芽糖结合蛋白与载体pETDuent-1连接得到重组表达载体pETDuent-1-MarTX,将该重组表达载体转化至E.coli Origami B(DE3),筛选得到高效表达菌株,通过诱导表达、亲和层析纯化获得了具有生物活性,可显著抑制大电导钙离子和电压激活的钾离子(BK)通道电流的重组MarTX毒素。还提供了所述MarTX毒素在(α+β4)BK通道电流抑制剂的药物筛选中的应用。
Également publié en tant que
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