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1. WO2020090839 - ÉLECTRODE AYANT UNE NANOSTRUCTURE AU NIVEAU DE LA POINTE

Numéro de publication WO/2020/090839
Date de publication 07.05.2020
N° de la demande internationale PCT/JP2019/042432
Date du dépôt international 29.10.2019
CIB
C12M 1/34 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
MAPPAREILLAGE POUR L'ENZYMOLOGIE OU LA MICROBIOLOGIE
1Appareillage pour l'enzymologie ou la microbiologie
34Mesure ou test par des moyens de mesure ou de détection des conditions du milieu, p.ex. par des compteurs de colonies
C12Q 1/02 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
QPROCÉDÉS DE MESURE OU DE TEST FAISANT INTERVENIR DES ENZYMES, DES ACIDES NUCLÉIQUES OU DES MICRO-ORGANISMES; COMPOSITIONS OU PAPIERS RÉACTIFS À CET EFFET; PROCÉDÉS POUR PRÉPARER CES COMPOSITIONS; PROCÉDÉS DE COMMANDE SENSIBLES AUX CONDITIONS DU MILIEU DANS LES PROCÉDÉS MICROBIOLOGIQUES OU ENZYMOLOGIQUES
1Procédés de mesure ou de test faisant intervenir des enzymes, des acides nucléiques ou des micro-organismes; Compositions à cet effet; Procédés pour préparer ces compositions
02faisant intervenir des micro-organismes viables
Déposants
  • 株式会社 Ion Chat Research ION CHAT RESEARCH CORPORATE [JP]/[JP]
  • 齋藤 光義 SAITO, Mitsuyoshi [JP]/[JP]
Inventeurs
  • 齋藤 光義 SAITO, Mitsuyoshi
Mandataires
  • 佐伯 拓郎 SAEKI, Takuro
  • 中村 正展 NAKAMURA, Masanobu
  • 佐伯 裕子 SAEKI, Hiroko
  • 牛山 直子 USHIYAMA, Naoko
Données relatives à la priorité
2018-20317129.10.2018JP
Langue de publication japonais (JA)
Langue de dépôt japonais (JA)
États désignés
Titre
(EN) ELECTRODE HAVING NANO STRUCTURE AT TIP
(FR) ÉLECTRODE AYANT UNE NANOSTRUCTURE AU NIVEAU DE LA POINTE
(JA) 先端にナノ構造をもった電極
Abrégé
(EN)
The purpose of the present invention is to provide a method which is designed to form an intracellular recording electrode for a cell by a simple operation which is less invasive to the cell and does not need a magnetic force, and with which the short-term or long-term intracellular potential can be accurately measured. Specifically, provided is a method comprising: securing, to a manipulator or the like, a holder provided on a conductor having a conductive nano structure at a tip; making the tip nano structure part penetrate a cell membrane while adjusting the amount of pressure applied to the target cell, thereby forming an intracellular recording electrode independently secured above the cell; and measuring the intracellular potential. The conductive nano structure at the tip and the conductor main body do not have to be magnetic but may be stuck together by magnetic force or may be formed as one body. When the cell membrane potential of a target cell cultured in a typical culture vessel is recorded, by forming the conductor main body of a magnetic electrode (MagEle) and independently securing same using a ring-shaped magnet that is provided on the lower surface of the culture vessel and that secures a light projection path or a light observation path through the center thereof, measurement of the intracellular potential of the target cell and fluorescent observation of changes in intracellular potential due to a light stimulus or intracellular calcium dynamics can be performed simultaneously.
(FR)
Le but de la présente invention est de fournir un procédé conçu pour former une électrode d'enregistrement intracellulaire pour une cellule par une opération simple, moins invasive vis-à-vis de la cellule, n'ayant pas besoin d'une force magnétique, et pouvant mesurer le potentiel intracellulaire à court terme ou long terme avec précision. Plus particulièrement, l'invention concerne un procédé consistant à fixer, à un manipulateur ou similaire, un élément de support disposé sur un conducteur ayant une nanostructure conductrice au niveau d'une pointe; à amener la partie de nanostructure de ladite pointe à pénétrer dans une membrane cellulaire tout en ajustant la quantité de pression appliquée à la cellule cible, formant ainsi une électrode d'enregistrement intracellulaire fixée indépendamment au-dessus de la cellule; et à mesurer le potentiel intracellulaire. La nanostructure conductrice au niveau de la pointe et du corps principal de conducteur n'a pas besoin d'être magnétique mais peut être collée par une force magnétique ou peut être formée en tant que corps. Lorsque le potentiel de membrane cellulaire d'une cellule cible cultivée dans un récipient de culture ordinaire est enregistré, par la formation du corps principal conducteur d'une électrode magnétique (MagEle), et sa fixation indépendante à l'aide d'un aimant en forme d'anneau disposé sur la surface inférieure du récipient de culture et assurant un trajet de projection de lumière ou un trajet d'observation de lumière à travers son centre, la mesure du potentiel intracellulaire de la cellule cible et l'observation fluorescente de changements de potentiel intracellulaire en raison d'un stimulus lumineux ou d'une dynamique de calcium intracellulaire peuvent être effectués simultanément.
(JA)
本発明は、磁力を必要とせず、細胞への侵襲性が少なく簡便な手法で細胞の細胞内記録電極を形成するための方法であって、しかも正確に短期又は長期の細胞内電位測定が可能な方法を提供することを目的とする。具体的には、先端に導電性ナノ構造を有する導電体に設けたホルダーをマニュピュレーターなどに固定して、対象細胞への加圧程度を調節しながら先端ナノ構造部分を細胞膜に貫通させ、細胞上方に自立固定した細胞内記録電極を形成し、細胞内電位を測定する方法を提供する。先端の導電性ナノ構造及び導電体本体は磁性を有していなくてもよく、一体化されていても、磁力により吸着されていてもよい。また、導電体本体を磁石電極(Magele)で形成し、通常の培養容器に培養した対象細胞の細胞膜電位を記録する場合、培養容器下面に、中央に光投射用又は光観察用経路を確保できるようなリング型磁石を用いて自立固定させることで、対象細胞の細胞内電位測定と同時に光刺激による細胞内電位の変化又は細胞内カルシウム動態などの蛍光観察もできる。
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