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1. WO2020069791 - SÉQUENÇAGE D'ARN PLEINE LONGUEUR

Numéro de publication WO/2020/069791
Date de publication 09.04.2020
N° de la demande internationale PCT/EP2019/071726
Date du dépôt international 13.08.2019
CIB
C12Q 1/6806 2018.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
QPROCÉDÉS DE MESURE OU DE TEST FAISANT INTERVENIR DES ENZYMES, DES ACIDES NUCLÉIQUES OU DES MICRO-ORGANISMES; COMPOSITIONS OU PAPIERS RÉACTIFS À CET EFFET; PROCÉDÉS POUR PRÉPARER CES COMPOSITIONS; PROCÉDÉS DE COMMANDE SENSIBLES AUX CONDITIONS DU MILIEU DANS LES PROCÉDÉS MICROBIOLOGIQUES OU ENZYMOLOGIQUES
1Procédés de mesure ou de test faisant intervenir des enzymes, des acides nucléiques ou des micro-organismes; Compositions à cet effet; Procédés pour préparer ces compositions
68faisant intervenir des acides nucléiques
6806Préparation d’acides nucléiques pour analyse, p.ex. pour test de réaction en chaîne par polymérase
CPC
C12Q 1/6806
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS
1Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms
68involving nucleic acids
6806Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
Déposants
  • MAX-DELBRÜCK-CENTRUM FÜR MOLEKULARE MEDIZIN IN DER HELMHOLTZ-GEMEINSCHAFT [DE]/[DE]
Inventeurs
  • LEGNINI, Ivano
  • ALLES, Jonathan
  • KARAISKOS, Nikolaos
  • AYOUB, Salah
  • RAJEWSKY, Nikolaus
Mandataires
  • VOSSIUS & PARTNER (NO 31)
Données relatives à la priorité
18198248.902.10.2018EP
Langue de publication anglais (EN)
Langue de dépôt anglais (EN)
États désignés
Titre
(EN) FULL-LENGTH RNA SEQUENCING
(FR) SÉQUENÇAGE D'ARN PLEINE LONGUEUR
Abrégé
(EN)
The present disclosure provides a method for analyzing a polyribonucleotide, wherein the polyribonucleotide is an m RNA molecule with a poly(A) tail, said method comprising: (a) obtaining a labeled polyribonucleotide by GI tailing; followed by (b) providing a second molecule comprising a first primer recognition sequence followed by a sequence of C nucleotide residues linked to a sequence of T nucleotide residues; followed by (c) obtaining a complex of said labeled polyribonucleotide and said second molecule; followed by (d) obtaining an extended second molecule by (d1) extending the 3' end of the second molecule by synthesizing a sequence that is complementary to the labeled polyribonucleotide; followed by (d2) extending the 3' end of the second molecule by adding at least 1 to 5 C nucleotide residues, followed by a second primer recognition sequence; said method providing information on entire polyribonucleotides, in particular m RNA isoforms and their respective poly (A) tails.
(FR)
La présente invention concerne un procédé d'analyse d'un polyribonucléotide, le polyribonucléotide étant une molécule d'ARNm avec une queue poly(A), ledit procédé comprenant : (a) l'obtention d'un polyribonucléotide marqué par une extension GI; suivie de (b) la fourniture d'une seconde molécule comprenant une première séquence de reconnaissance d'amorce suivie d'une séquence de résidus de nucléotide C liés à une séquence de résidus de nucléotide T; suivie de (c) l'obtention d'un complexe dudit polyribonucléotide marqué et de ladite seconde molécule; suivie de (d) l'obtention d'une seconde molécule étendue par (d1) l'extension de l'extrémité 3' de la seconde molécule par synthèse d'une séquence qui est complémentaire du polyribonucléotide marqué; suivie de (d2) l'extension de l'extrémité 3' de la seconde molécule par ajout d'au moins 1 à 5 résidus de nucléotide C, suivis d'une seconde séquence de reconnaissance d'amorce; ledit procédé fournissant des informations sur des polyribonucléotides entiers, en particulier des isoformes d'ARNm et leurs queues poly(A) respectives.
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