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1. WO2019110492 - CELLULE DE LEVURE RECOMBINANTE

Numéro de publication WO/2019/110492
Date de publication 13.06.2019
N° de la demande internationale PCT/EP2018/083321
Date du dépôt international 03.12.2018
CIB
C12N 9/12 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
9Enzymes, p.ex. ligases (6.); Proenzymes; Compositions les contenant; Procédés pour préparer, activer, inhiber, séparer ou purifier des enzymes
10Transférases (2.)
12transférant des groupes contenant du phosphore, p.ex. kinases (2.7)
C12N 9/88 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
9Enzymes, p.ex. ligases (6.); Proenzymes; Compositions les contenant; Procédés pour préparer, activer, inhiber, séparer ou purifier des enzymes
88Lyases (4.)
C12N 15/63 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
63Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
C12N 15/81 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
63Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
79Vecteurs ou systèmes d'expression spécialement adaptés aux hôtes eucaryotes
80pour fongi
81pour levures
C12P 7/06 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
PPROCÉDÉS DE FERMENTATION OU PROCÉDÉS UTILISANT DES ENZYMES POUR LA SYNTHÈSE D'UN COMPOSÉ CHIMIQUE DONNÉ OU D'UNE COMPOSITION DONNÉE, OU POUR LA SÉPARATION D'ISOMÈRES OPTIQUES À PARTIR D'UN MÉLANGE RACÉMIQUE
7Préparation de composés organiques contenant de l'oxygène
02contenant un groupe hydroxyle
04acycliques
06Ethanol en tant que produit chimique et non en tant que boisson alcoolique
C12N 1/19 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
1Micro-organismes, p.ex. protozoaires; Compositions les contenant; Procédés de culture ou de conservation de micro-organismes, ou de compositions les contenant; Procédés de préparation ou d'isolement d'une composition contenant un micro-organisme; Leurs milieux de culture
14Fongi ; Leurs milieux de culture
16Levures; Leurs milieux de culture
19modifiés par l'introduction de matériel génétique étranger
CPC
C12N 15/81
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
80for fungi
81for yeasts
C12N 9/1205
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
10Transferases (2.)
12transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
1205Phosphotransferases with an alcohol group as acceptor (2.7.1), e.g. protein kinases
C12N 9/88
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
88Lyases (4.)
C12P 7/06
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
7Preparation of oxygen-containing organic compounds
02containing a hydroxy group
04acyclic
06Ethanol, i.e. non-beverage
C12Y 207/01019
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
YENZYMES
207Transferases transferring phosphorus-containing groups (2.7)
01Phosphotransferases with an alcohol group as acceptor (2.7.1)
01019Phosphoribulokinase (2.7.1.19)
C12Y 401/01039
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
YENZYMES
401Carbon-carbon lyases (4.1)
01Carboxy-lyases (4.1.1)
01039Ribulose-bisphosphate carboxylase (4.1.1.39)
Déposants
  • DSM IP ASSETS B.V. [NL]/[NL]
Inventeurs
  • PAPAPETRIDIS, Ioannis
Mandataires
  • DSM INTELLECTUAL PROPERTY
Données relatives à la priorité
17206139.208.12.2017EP
Langue de publication anglais (EN)
Langue de dépôt anglais (EN)
États désignés
Titre
(EN) RECOMBINANT YEAST CELL
(FR) CELLULE DE LEVURE RECOMBINANTE
Abrégé
(EN)
The present invention describes a recombinant yeast cell functionally expressing one or more heterologous nucleic acid sequences encoding for ribulose-1,5-phosphate carboxylase/oxygenase (EC4.1.1.39; RuBisCO), and optionally one or more molecular chaperones for RuBisCO, and one or more phosphoribulokinases (EC2.7.1.19; PRK), wherein the PRK is under control of a transcriptional activator (TA), such that the PRK is located downstream of a first promoter, which first promoter is induced by said TA, and wherein the expression of said TA is induced by a second promoter. The second promotor may enable higher expression under anaerobic conditions than under aerobic conditions, preferably it has a TA expression ratio (anaerobic/aerobic) of 2 or more. The second promoter may enable expression when the cellular ratio (NADH/NAD+)anaerobic / (NADH/NAD+)aerobic is 2 or more.
(FR)
La présente invention concerne une cellule de levure recombinante exprimant fonctionnellement une ou plusieurs séquences d’acides nucléiques hétérologues codant pour la ribulose-1,5-phosphate carboxylase/oxygénase (EC4.1.1.39 ; RuBisCO), et éventuellement une ou plusieurs chaperonnes moléculaires pour la RuBisCO, et une ou plusieurs phosphoribulokinases (EC2.7.1.19 ; PRK), où la PRK se trouve sous le contrôle d’un activateur de transcription (TA), de sorte que la PRK est située en aval d’un premier promoteur, lequel premier promoteur est induit par ladite TA, et l’expression de ladite TA étant induite par un second promoteur. Le second promoteur peut permettre l’expression supérieure sous des conditions anaérobies par rapport aux conditions aérobies, préférablement il présente un rapport d’expression du TA (anaérobie/aérobie) de 2 ou plus. Le second promoteur peut permettre l’expression lorsque le rapport cellulaire (NADH/NAD+)anaérobie/(NADH/NAD+)aérobie est de 2 ou plus.
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