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1. (WO2018198599) PROCÉDÉ D'ISOLEMENT DE GOUTTELETTES POUR ANALYSE DÉRIVÉES D'UNE CELLULE, ET PROCÉDÉ D'ANALYSE DE CELLULES

Pub. No.:    WO/2018/198599    International Application No.:    PCT/JP2018/010971
Publication Date: Fri Nov 02 00:59:59 CET 2018 International Filing Date: Wed Mar 21 00:59:59 CET 2018
IPC: C12Q 1/6806
C12N 15/10
C12Q 1/6848
C12Q 1/6869
Applicants: ENPLAS CORPORATION
株式会社エンプラス
Inventors: SUNAGA Nobuya
砂永 伸也
Title: PROCÉDÉ D'ISOLEMENT DE GOUTTELETTES POUR ANALYSE DÉRIVÉES D'UNE CELLULE, ET PROCÉDÉ D'ANALYSE DE CELLULES
Abstract:
Selon l’invention, afin de fournir un procédé qui, sans affecter une analyse ultérieure, permet d'isoler des gouttelettes devant être fournies en vue d'une analyse, et de fournir un procédé d'analyse, le procédé d'isolement de gouttelettes pour analyse est caractérisé en ce qu'il comprend une étape de formation d'émulsion, une étape d'amplification d'acide nucléique, une étape de détection, une première étape de tri, une étape d'élimination de produit d'amplification, et une seconde étape de tri. À l'étape de formation d'émulsion, un échantillon qui contient des cellules et un solvant de formation d'émulsion sont mis en contact pour former de multiples gouttelettes qui contiennent les cellules dans l'échantillon dans le solvant de formation d'émulsion. À l'étape d'amplification d'acide nucléique, une amorce est utilisée dans les gouttelettes pour effectuer une amplification d'acide nucléique d'acides nucléiques dérivés des cellules. L'amorce présente une séquence complémentaire de celle des acides nucléiques, et une première séquence ajoutée. À l'étape de détection, la présence ou l'absence de produits d'amplification des acides nucléiques dans les gouttelettes est détectée. À la première étape de tri, les gouttelettes dans lesquelles les produits d'amplification des acides nucléiques ont été détectés sont triées. À l'étape d'élimination de produit d'amplification, les produits d'amplification dans les gouttelettes triées sont éliminés des gouttelettes au moyen d'un support immobilisé comprenant une seconde séquence ajoutée immobilisée sur un support, la seconde séquence ajoutée sur le support immobilisé étant la première séquence ajoutée dans l'amorce et/ou une séquence complémentaire de la première séquence ajoutée, les produits d'amplification dans les gouttelettes et les supports immobilisés sont mis en contact, les produits d'amplification sont liés aux supports immobilisés, et par séparation des supports immobilisés des gouttelettes, les produits d'amplification sont éliminés des gouttelettes. À la seconde étape de tri, les gouttelettes à partir desquelles les produits d'amplification ont été éliminés à l'étape d'élimination de produit d'amplification sont triées sous forme de gouttelettes pour analyse.