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1. (WO2018106678) SYSTÈMES ET PROCÉDÉS D'IMAGERIE INTERFÉROMÉTRIQUE À MODULATION

Pub. No.:    WO/2018/106678    International Application No.:    PCT/US2017/064695
Publication Date: Fri Jun 15 01:59:59 CEST 2018 International Filing Date: Wed Dec 06 00:59:59 CET 2017
IPC: G02B 21/16
G01N 21/64
G02B 21/36
Applicants: MEMORIAL SLOAN KETTERING CANCER CENTER
Inventors: PERTSINIDIS, Alexandros
WANG, Guanshi
Title: SYSTÈMES ET PROCÉDÉS D'IMAGERIE INTERFÉROMÉTRIQUE À MODULATION
Abstract:
L'invention concerne des systèmes et des procédés d'imagerie de très haute résolution monomoléculaire 3D. Les systèmes et procédés selon l'invention utilisent des techniques d'interférométrie à modulation et de détection sensible à la phase qui atteignent une précision de localisation axiale inférieure à 2 nanomètres, laquelle est bien inférieure aux composants protéiques individuels ayant une taille de 5 à 10 nanomètres. Afin d'illustrer la capacité de cette technique à sonder la dynamique de machines macromoléculaires complexes, (1) le déplacement d'ARN polymérases d'E. coli individuelles à sous-unités multiples a été visualisé par le biais du cycle complet de transcription, (2) la cinétique de la transition d'initiation-allongement a été disséquée, (3) les changements conformationnels du complexe d'initiation ouvert au complexe d'allongement ont été analysés, et (4) le devenir des facteurs d'initiation σ70 pendant l'échappement du promoteur a été déterminé. Le système de microscope comprend deux objectifs opposés (OL1, OL2) pour exciter simultanément un échantillon et recueillir la lumière émis par celui-ci. Chaque objectif est couplé à un bras d'un interféromètre de façon que les faisceaux lumineux d'excitation puissent interférer sur le volume de l'échantillon alors que la lumière émise par les échantillons interfère sur un CCD (CCD1, CCD2).