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1. (WO2018067036) PROCÉDÉ DE CULTURE DE CELLULES DE GLANDE SALIVAIRE HUMAINE

Pub. No.:    WO/2018/067036    International Application No.:    PCT/RU2017/000736
Publication Date: Fri Apr 13 01:59:59 CEST 2018 International Filing Date: Wed Oct 04 01:59:59 CEST 2017
IPC: C12N 5/00
Applicants: PIROGOV RUSSIAN NATIONAL RESEARCH MEDICAL UNIVERSITY (RNRMU)
Inventors: PETRAKOVA, Olga Sergeevna
BORISOV, Mikhail Aleksandrovich
VOROTELYAK, Ekaterina Andreevna
GVAZAVA, Inessa Givievna
ROGOVAYA, Olga Sergeevna
VASILIEV, Andrey Valentinovich
Title: PROCÉDÉ DE CULTURE DE CELLULES DE GLANDE SALIVAIRE HUMAINE
Abstract:
La présente invention est destinée à augmenter le nombre de repiquages de cellules de glande salivaire humaine, à maintenir leur état non différencié et leur potentiel élevé de prolifération pendant la culture. Le procédé de culture de cellules progénitrices épithéliales de glande salivaire humaine comprend : (a) l'obtention de cellules progénitrices épithéliales de glande salivaire humaine à partir d'un organisme receveur; (b) le transfert des cellules dans un milieu de kératinocytes épidermiques PCT et leur culture dans des flacons de culture assurant une adhésion cellulaire à 37°C avec addition de 5 % de CO2 et un changement de milieu tous les 2-4 jours jusqu'à ce qu'une monocouche soit atteinte; (c) repiquage des cellules à un rapport de dilution de 1:3-1:5, comprenant l'élimination des cellules de la surface du flacon de culture à l'aide d'une solution d'EDTA-trypsine et le transfert dans les nouveaux flacons de culture; (d) nouvelle culture des cellules comme défini dans la revendication (b) avec un changement de milieu dans le procédé tous les 2 à 4 jours et un repiquage jusqu'à ce qu'une monocouche soit atteinte, comme défini dans la revendication (c) à un rapport de dilution maximal de 1:2-1:3, le premier changement de milieu après chaque repiquage devant être effectué dans les 8-24 heures.