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1. (WO2018040961) MÉTHODE DE CONSTRUCTION D'UNE BIBLIOTHÈQUE ET MÉTHODE DE TYPAGE DE SNP

Pub. No.:    WO/2018/040961    International Application No.:    PCT/CN2017/098213
Publication Date: Fri Mar 09 00:59:59 CET 2018 International Filing Date: Tue Aug 22 01:59:59 CEST 2017
IPC: C12Q 1/68
Applicants: GUANGZHOU CONSIDERIN GENE & HEALTH TECHNOLOGY CO., LTD
广州康昕瑞基因健康科技有限公司
Inventors: SHENG, Sitong
盛司潼
HUANG, Siqiang
黄思强
WEI, Ming
卫明
Title: MÉTHODE DE CONSTRUCTION D'UNE BIBLIOTHÈQUE ET MÉTHODE DE TYPAGE DE SNP
Abstract:
L'invention concerne une méthode de construction d'une bibliothèque consistant à : A. amplifier par PCR un échantillon à séquencer contenant un site SNP à détecter en utilisant un jeu d'amorces d'amplification spécifique pour obtenir un produit d'amplification ; au moins une amorce du jeu d'amorces contient une séquence de reconnaissance d'enzyme de restriction de type IIS et le produit d'amplification contient un site de clivage d'enzyme de restriction de type IIS, et la distance entre le site de clivage d'enzyme de restriction de type IIS et le site SNP à détecter est de 0 à 5 bases ; B. utiliser l'enzyme de restriction de type IIS pour cliver le produit d'amplification pour obtenir un premier fragment d'acide nucléique contenant le site SNP à détecter, et former une première extrémité par clivage enzymatique du premier fragment d'acide nucléique ; et C. ligaturer le premier fragment d'acide nucléique avec un lieur de séquençage au niveau de la première extrémité du premier fragment sous une ligase pour obtenir une molécule de bibliothèque. L'invention concerne également une méthode de typage de SNP. La méthode réduit le délai de détection de certains sites, améliore la précision de la détection, et unifie les amorces de séquençage pour détecter de multiples sites dans le même système.