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1. (WO2018027236) PROCÉDÉS DE QUANTIFICATION DE LECTURE NUMÉRIQUE D'ACIDES NUCLÉIQUES
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N° de publication : WO/2018/027236 N° de la demande internationale : PCT/US2017/045800
Date de publication : 08.02.2018 Date de dépôt international : 07.08.2017
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01) ,G01N 21/64 (2006.01)
Déposants : ARIZONA BOARD OF REGENTS ON BEHALF OF ARIZONA STATE UNIVERSITY[US/US]; 1475 N Scottsdale Rd Suite 200 Scottsdale, AZ 85257, US
Inventeurs : MARTINEAU, Rhett, L.; US
MELDRUM, Deirdre; US
Mandataire : LIN, Rita; US
Données relatives à la priorité :
62/371,55505.08.2016US
Titre (EN) METHODS FOR DIGITAL READOUT QUANTIFICATION OF NUCLEIC ACIDS
(FR) PROCÉDÉS DE QUANTIFICATION DE LECTURE NUMÉRIQUE D'ACIDES NUCLÉIQUES
Abrégé : front page image
(EN) The invention provides methods for detecting specific nucleic acids using a LAMP reaction and providing a digital readout of the results. One method teaches separating target specificity from indicator detection in a two-stage MTA. During the first stage amplicons incorporating both target sequence and an indicator sequence are synthesized. During the second stage of the reaction, the indicator sequence is targeted and amplified to produce visual results that may be digitalized. Another method teaches a competitive MTA, in which a reference sequence is used to compete against target sequence during amplification producing threshold responses, thus enabling digital readout. Using either method, quantitation is achieved without the need for continuous monitoring of the reaction and the end-point readout is amenable to visual inspection. Methods of the invention are especially useful in circumstances where there is lower or intermittent power supply.
(FR) La présente invention concerne des procédés pour détecter des acides nucléiques spécifiques au moyen d'une réaction LAMP et fournir une lecture numérique des résultats. Un procédé permet la séparation de la spécificité de cible de la détection d'indicateur dans un MTA à deux étapes. Pendant la première étape, des amplicons incorporant à la fois la séquence cible et une séquence d'indicateur sont synthétisés. Pendant la deuxième étape de la réaction, la séquence d'indicateur est ciblée et amplifiée pour produire des résultats visuels qui peuvent être numérisés. Un autre procédé enseigne un MTA compétitif, dans lequel une séquence de référence est utilisée pour entrer en compétition avec une séquence cible pendant l'amplification de façon à produire des réponses de seuil, de façon à permettre une lecture numérique. En utilisant l'un ou l'autre des procédés, une quantification est obtenue sans qu'il soit nécessaire de surveiller en continu la réaction et la lecture du point final est adaptée pour une inspection visuelle. Les procédés de l'invention sont particulièrement utiles dans des circonstances dans le contexte d'une alimentation électrique inférieure ou intermittente.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JO, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)