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1. (WO2018024153) PROCÉDÉ DE PRÉPARATION ET UTILISATION DE LA PROTÉINE E2 RECOMBINANTE DE LA FIÈVRE PORCINE ET VACCIN SOUS-UNITAIRE ASSOCIÉ
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N° de publication : WO/2018/024153 N° de la demande internationale : PCT/CN2017/094651
Date de publication : 08.02.2018 Date de dépôt international : 27.07.2017
CIB :
C12N 15/85 (2006.01) ,C12N 15/40 (2006.01) ,C07K 14/18 (2006.01) ,A61K 39/187 (2006.01) ,A61P 31/14 (2006.01)
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
N
MICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15
Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09
Technologie d'ADN recombinant
63
Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs: Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
79
Vecteurs ou systèmes d'expression spécialement adaptés aux hôtes eucaryotes
85
pour cellules animales
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
N
MICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15
Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09
Technologie d'ADN recombinant
11
Fragments d'ADN ou d'ARN; Leurs formes modifiées
31
Gènes codant pour des protéines microbiennes, p.ex. entérotoxines
33
Gènes codant pour des protéines virales
40
Protéines de virus à ARN, p.ex. flavivirus
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
07
CHIMIE ORGANIQUE
K
PEPTIDES
14
Peptides ayant plus de 20 amino-acides; Gastrines; Somatostatines; Mélanotropines; Leurs dérivés
005
provenant de virus
08
Virus à ARN
18
Togaviridae, p.ex. flavivirus, virus de la peste, virus de la fièvre jaune, virus de l'hépatite C, virus de l'encéphalite japonaise
A NÉCESSITÉS COURANTES DE LA VIE
61
SCIENCES MÉDICALE OU VÉTÉRINAIRE; HYGIÈNE
K
PRÉPARATIONS À USAGE MÉDICAL, DENTAIRE OU POUR LA TOILETTE
39
Préparations médicinales contenant des antigènes ou des anticorps
12
Antigènes viraux
187
Virus du choléra du porc
A NÉCESSITÉS COURANTES DE LA VIE
61
SCIENCES MÉDICALE OU VÉTÉRINAIRE; HYGIÈNE
P
ACTIVITÉ THÉRAPEUTIQUE SPÉCIFIQUE DE COMPOSÉS CHIMIQUES OU DE PRÉPARATIONS MÉDICINALES
31
Agents anti-infectieux, c. à d. antibiotiques, antiseptiques, chimiothérapeutiques
12
Antiviraux
14
pour le traitement des virus ARN
Déposants :
浙江海隆生物科技有限公司 NOVO BIOTECH CORP. [CN/CN]; 中国浙江省绍兴市 滨海新城马欢路398号科创中心2号楼5楼 Floor 5, Building 2, Kechuang Center No. 398, Mahuanlu, Binhaixincheng Shaoxing, Zhejiang 312000, CN
Inventeurs :
钱泓 QIAN, Hong; CN
吴有强 WU, Youqiang; CN
车影 CHE, Ying; CN
吴素芳 WU, Sufang; CN
查银河 ZHA, Yinhe; CN
Mandataire :
北京乾诚五洲知识产权代理有限责任公司 FAITHFULAW INTERNATIONAL IP LAW OFFICE; 中国北京市 西城区北三环中路甲29号3号楼A-1101室 Suite 1101, Block A, Building No. 3 A29, Beisanhuanzhonglu, Xicheng District Beijing 100029, CN
Données relatives à la priorité :
201610625392.X01.08.2016CN
201710409930.602.06.2017CN
Titre (EN) PREPARATION METHOD AND USE OF RECOMBINANT SWINE FEVER E2 PROTEIN AND SUBUNIT VACCINE THEREOF
(FR) PROCÉDÉ DE PRÉPARATION ET UTILISATION DE LA PROTÉINE E2 RECOMBINANTE DE LA FIÈVRE PORCINE ET VACCIN SOUS-UNITAIRE ASSOCIÉ
(ZH) 重组猪瘟E2蛋白及其亚单位疫苗的制备方法和应用
Abrégé :
(EN) Disclosed are a preparation method and use of a recombinant swine fever E2 protein and subunit vaccine thereof. The method for preparing the recombinant swine fever E2 protein comprises the following steps: 1) cloning the swine fever E2 protein coding gene into an eukaryotic expression vector to obtain a recombinant plasmid containing the swine fever E2 protein coding gene; 2) transfecting the recombinant plasmid containing the swine fever E2 protein coding gene into a CHO cell strain; 3) obtaining a highly expressed cell strain by culturing, screening and domestication of the CHO cell strain described in step 2); and 4) fermenting and culturing the cell strain described in step 3), and obtaining the recombinant swine fever E2 protein after purification. The method can harvest the target protein from the cell culture supernatant with a yield of up to 1 g/L, and not only shortens the protein purification time and simplifies the vaccine production steps, but also reduces the vaccine production cost.
(FR) L'invention porte sur un procédé de préparation et sur l'utilisation d'une protéine E2 recombinante de la fièvre porcine et d'un vaccin sous-unitaire correspondant. Le procédé de préparation de la protéine E2 recombinante de la fièvre porcine comprend les étapes suivantes, consistant à :1) cloner le gène codant pour la protéine E2 de la fièvre porcine dans un vecteur d'expression eucaryote pour obtenir un plasmide recombinant contenant le gène codant pour la protéine E2 de la fièvre porcine ; 2) transfecter le plasmide recombinant contenant le gène codant pour la protéine E2 de la fièvre porcine dans une souche de cellules de CHO (ovaire de hamster chinois) ; 3) obtenir une souche cellulaire hautement exprimée par culture, criblage et domestication de la souche de cellules de CHO décrite à l'étape 2) ; et 4) faire fermenter et cultiver la souche cellulaire décrite à l'étape 3) et obtenir la protéine E2 recombinante de la fièvre porcine après purification. Le procédé permet de récolter la protéine cible à partir du surnageant de culture cellulaire à un rendement allant jusqu'à 1 g/L et non seulement raccourcit le temps de purification des protéines et simplifie les étapes de production du vaccin, mais réduit également le coût de production du vaccin.
(ZH) 重组猪瘟E2蛋白及其亚单位疫苗的制备方法和应用,所述重组猪瘟E2蛋白的制备方法包括下列步骤:1)将猪瘟E2蛋白编码基因克隆到真核表达载体中得到含有猪瘟E2蛋白编码基因的重组质粒;2)再将含有猪瘟E2蛋白编码基因的重组质粒转染至CHO细胞株中;3)通过培养、筛选、驯化2)中所述的CHO细胞株得到高度表达的细胞株;以及4)发酵培养3)中所述的细胞株,纯化后得到重组猪瘟E2蛋白。所述方法能够从细胞培养上清中收获目的蛋白,且产量高达1g/L,不仅缩短蛋白纯化时间和简化疫苗生产步骤,也降低疫苗生产成本。
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États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JO, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Langue de publication : chinois (ZH)
Langue de dépôt : chinois (ZH)