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1. (WO2017213209) VECTEUR RECOMBINANT ET PROCÉDÉ DE CRIBLAGE D'UN COMPOSÉ CAPABLE DE SUPPRIMER LE PIÉGEAGE DE L'OXYDE NITRIQUE ET PROCÉDÉ DE MESURE DE LA CONCENTRATION D'OXYDE NITRIQUE DANS UNE CELLULE, LES DEUX À L'AIDE DU MICRO-ORGANISME TRANSFECTÉ AVEC LEDIT VECTEUR
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N° de publication : WO/2017/213209 N° de la demande internationale : PCT/JP2017/021261
Date de publication : 14.12.2017 Date de dépôt international : 08.06.2017
CIB :
C12N 15/09 (2006.01) ,C12N 1/21 (2006.01) ,C12Q 1/02 (2006.01) ,G01N 21/76 (2006.01) ,G01N 21/78 (2006.01) ,G01N 33/50 (2006.01)
Déposants : NATIONAL UNIVERSITY CORPORATION CHIBA UNIVERSITY[JP/JP]; 1-33, Yayoi-cho, Inage-ku, Chiba-shi, Chiba 2638522, JP
Inventeurs : MATSUMOTO Akio; JP
SHIMIZU Takeshi; JP
NODA Masatoshi; JP
Mandataire : IP-ASSIST PATENT OFFICE; 7th-Floor, Taiyo Seimei Sapporo Building, 1, Kita 2-jyo Nishi 3-chome, Chuo-ku, Sapporo-shi, Hokkaido 0600002, JP
Données relatives à la priorité :
2016-11413408.06.2016JP
Titre (EN) RECOMBINANT VECTOR, AND METHOD FOR SCREENING FOR COMPOUND CAPABLE OF SUPPRESSING SCAVENGING OF NITRIC OXIDE AND METHOD FOR MEASURING CONCENTRATION OF NITRIC OXIDE IN CELL BOTH UTILIZING MICROORANISM TRANSFECTED WITH SAID VECTOR
(FR) VECTEUR RECOMBINANT ET PROCÉDÉ DE CRIBLAGE D'UN COMPOSÉ CAPABLE DE SUPPRIMER LE PIÉGEAGE DE L'OXYDE NITRIQUE ET PROCÉDÉ DE MESURE DE LA CONCENTRATION D'OXYDE NITRIQUE DANS UNE CELLULE, LES DEUX À L'AIDE DU MICRO-ORGANISME TRANSFECTÉ AVEC LEDIT VECTEUR
(JA) 組換えベクター、該ベクターで形質転換された微生物を利用した一酸化窒素消去を抑制する化合物のスクリーニング方法及び細胞内一酸化窒素濃度の測定方法
Abrégé : front page image
(EN) [Problem] The present invention addresses the problem of providing a method for screening for a compound capable of reducing the self-defense mechanism of a microorganism against NO, whereby it becomes possible to evaluate many test compounds concurrently in a simple and rapid manner. [Solution] The present invention relates to: a recombinant vector carrying a gene encoding NorR protein, a gene encoding a bioluminescent protein that is under the regulation of an nor operon promoter and a gene encoding a fluorescent protein that is under the regulation of a constitutive promoter; and a method for screening for a compound capable of reducing a self-defense mechanism against NO, in which a microorganism transfected with the vector is used. According to the present invention, it becomes possible to measure the change in concentration of NO in a microbial cell simply, rapidly, with high sensitivity and in a wide dynamic range including an nM-level physiological concentration range, and it also becomes possible to evaluate many test compounds within a short time.
(FR) La présente invention vise à fournir un procédé de criblage d'un composé capable de réduire le mécanisme d'auto-défense d'un micro-organisme contre le NO, permettant d'évaluer de nombreux composés d'essai simultanément de manière simple et rapide. La présente invention concerne par conséquent un vecteur recombinant portant un gène codant pour la protéine NorR, un gène codant pour une protéine bioluminescente qui est sous la régulation d'un promoteur de l'opéron nor et un gène codant pour une protéine fluorescente qui est sous la régulation d'un promoteur constitutif. L'invention concerne en outre un procédé de criblage d'un composé capable de réduire un mécanisme d'auto-défense contre le NO, un micro-organisme transfecté avec le vecteur étant utilisé. Selon la présente invention, il devient possible de mesurer simplement et rapidement la variation de la concentration de NO dans une cellule microbienne, avec une sensibilité élevée et dans une large plage dynamique comprenant une plage de concentrations physiologiques à l'échelle des nM, et il devient également possible d'évaluer de nombreux composés d'essai en peu de temps.
(JA) 【課題】 本発明は、簡便かつ迅速に多数の試験化合物を同時並行で評価することのできる、微生物が持つNOに対する自己防御機構を減弱させる化合物をスクリーニングする方法を提供することを目的とする。 【解決手段】 本発明は、NorRタンパク質をコードする遺伝子と、norオペロンプロモーターの制御下にある生物発光タンパク質をコードする遺伝子と、構成的プロモーターの制御下にある蛍光タンパク質をコードする遺伝子とを含む組換えベクター、及び該ベクターで形質転換した微生物を用いた、NOに対する自己防御機構を減弱させる化合物をスクリーニングする方法に関する。本発明によれば、簡便かつ迅速に、高感度かつnMレベルの生理的な濃度範囲を含む広いダイナミックレンジで微生物細胞内のNO濃度変化を測定することができ、多数の試験化合物を短時間で評価することが可能となる。
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Langue de publication : japonais (JA)
Langue de dépôt : japonais (JA)