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1. (WO2017189844) PROCÉDÉS ET COMPOSITIONS DE TRANSCRIPTOME ARNMI

Pub. No.:    WO/2017/189844    International Application No.:    PCT/US2017/029831
Publication Date: Fri Nov 03 00:59:59 CET 2017 International Filing Date: Fri Apr 28 01:59:59 CEST 2017
IPC: C07H 21/04
C12N 15/11
C12N 15/113
C12N 15/79
C12Q 1/68
C40B 40/08
G01N 33/48
G01N 33/50
Applicants: BIO-RAD LABORATORIES, INC.
Inventors: FU, Rongdian
Title: PROCÉDÉS ET COMPOSITIONS DE TRANSCRIPTOME ARNMI
Abstract:
L'invention concerne des procédés, des polynucléotides, des kits et des mélanges réactionnels pour l'enrichissement de molécules de polynucléotide courtes qui ont une longueur dans une plage de longueur cible désirée. Une enzyme de restriction de type IIS ou de type III est utilisée pour cliver des polynucléotides au niveau de sites de clivage situés à une distance des sites de reconnaissance d'enzyme de restriction. Par exemple, un mélange de polynucléotides peut être formé en insérant des molécules d'ADN entre un site de reconnaissance de l'enzyme de restriction et une région de nucléotides non naturels qui bloquent le clivage par les enzymes de restriction. Si un polynucléotide contient une molécule d'ADN ayant une longueur dans une plage cible, alors le site de clivage se trouvera dans la région de blocage, et le clivage ne se produira pas. Des polynucléotides contenant des molécules d'ADN ayant des longueurs à l'extérieur de la plage cible peuvent être clivés. Par enrichissement sélectif, par PCR ou d'autres moyens, de polynucléotides qui sont intacts, une population concentrée de polynucléotides d'une longueur cible peut être formée.