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1. (WO2017174329) LIGNÉE CELLULAIRE DE MAMMIFÈRE POUR LA PRODUCTION DE PROTÉINE ET LA GÉNÉRATION DE BANQUE

Pub. No.:    WO/2017/174329    International Application No.:    PCT/EP2017/056373
Publication Date: 12 oct. 2017 International Filing Date: 17 mars 2017
IPC: C12N 5/0781
C12N 15/64
C12N 15/90
Applicants: ETH ZURICH
Inventors: REDDY, Sai
KELTON, William
PAROLA, Cristina
MASON, Derek
POGSON, Mark
Title: LIGNÉE CELLULAIRE DE MAMMIFÈRE POUR LA PRODUCTION DE PROTÉINE ET LA GÉNÉRATION DE BANQUE
Abstract:
Un premier aspect de l'invention concerne un procédé de génération d'une lignée cellulaire, comprenant les étapes de (a) fourniture d’une pluralité de lymphocytes B de mammifère, chacun de la pluralité de lymphocytes B comprenant une séquence d'ADN génomique transgénique codant pour une protéine marqueuse insérée dans un locus d'immunoglobuline endogène compris dans ledit lymphocyte B, et la séquence d'ADN génomique transgénique pouvant être soumise à un clivage par une nucléase dirigée sur site, en particulier Cas9 ; (b) remplacement de la séquence d'ADN génomique transgénique codant pour une protéine marqueuse avec une deuxième séquence d'ADN transgénique codant pour une protéine d'intérêt ; (c) le tri de lymphocytes B sur la base de la présence ou de l'absence de la protéine marqueuse ; et (d) la collecte de lymphocytes B dans lesquelles la protéine marqueuse est absente.