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1. (WO2017169565) PROCÉDÉ DE MESURE D'UNE PROTÉINE ET D'UN ACIDE NUCLÉIQUE À UNE SENSIBILITÉ ULTRA-ÉLEVÉE
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N° de publication :    WO/2017/169565    N° de la demande internationale :    PCT/JP2017/008982
Date de publication : 05.10.2017 Date de dépôt international : 07.03.2017
CIB :
C12Q 1/32 (2006.01), C12Q 1/68 (2006.01), G01N 33/53 (2006.01), G01N 33/535 (2006.01)
Déposants : ITO Etsuro [JP/JP]; (JP)
Inventeurs : ITO Etsuro; (JP).
MIURA Toshiaki; (JP).
YOSHIMURA Teruki; (JP).
WATABE Satoshi; (JP)
Mandataire : SIKS & CO.; 8th Floor, Kyobashi-Nisshoku Bldg., 8-7, Kyobashi 1-chome, Chuo-ku, Tokyo 1040031 (JP)
Données relatives à la priorité :
2016-068686 30.03.2016 JP
Titre (EN) METHOD FOR MEASURING PROTEIN AND NUCLEIC ACID WITH ULTRAHIGH SENSITIVITY
(FR) PROCÉDÉ DE MESURE D'UNE PROTÉINE ET D'UN ACIDE NUCLÉIQUE À UNE SENSIBILITÉ ULTRA-ÉLEVÉE
(JA) タンパク質及び核酸の超高感度測定方法
Abrégé : front page image
(EN)The present invention pertains to an enzymatic measurement method using an antibody-enzyme complex or a nucleic acid probe measurement method using an enzyme-labeled nucleic acid probe, in both of which the quantification of a product of a reaction by an enzyme in the antibody-enzyme complex or the enzyme-labeled nucleic acid probe is performed by generating thio-NAD(P)H by an enzymatic cycling reaction using NAD(P)H, thio-NAD(P), and a dehydrogenase (DH), and measuring the amount of the generated thio-NAD(P)H or measuring a change in color caused by the generated thio-NAD(P)H. An enzymatic reaction system in which NAD(P) generated from NAD(P)H by the enzymatic cycling reaction is selectively reduced, is caused to coexist with the enzymatic cycling reaction. The present invention also pertains to a kit for enzyme immunoassay, and a kit for nucleic acid probe measurement. In the enzymatic cycling reaction, the detection sensitivity is increased by increasing the amount of thio-NAD(P)H generated per unit time with respect to a predetermined amount of a substrate (reduced type), and combining the same with an enzyme immunoassay, etc., enables quantification, etc., of a protein or nucleic acid with high sensitivity.
(FR)La présente invention concerne un procédé de mesure enzymatique utilisant un complexe anticorps-enzyme ou un procédé de mesure par une sonde d'acide nucléique utilisant une sonde d'acide nucléique marquée par une enzyme, dans les deux cas, la quantification d'un produit d'une réaction par une enzyme dans le complexe anticorps-enzyme ou par la sonde d'acide nucléique marquée par une enzyme est réalisée par la génération de thio-NAD(P)H par une réaction de cyclage enzymatique à l'aide de NAD(P)H, de thio-NAD(P) et d'une déshydrogénase (DH) et par la mesure de la quantité de thio-NAD(P)H généré ou la mesure d'un changement de couleur provoqué par le thio-NAD(P)H généré. Un système de réaction enzymatique dans lequel le NAD(P) généré à partir de NAD(P)H par la réaction de cyclage enzymatique est sélectivement réduit, est amené à coexister avec la réaction de cyclage enzymatique. La présente invention concerne également un kit pour un essai immunologique enzymatique et un kit pour la mesure par une sonde d'acide nucléique. Dans la réaction de cyclage enzymatique, la sensibilité de détection est augmentée par l'augmentation de la quantité de thio-NAD(P)H générée par unité de temps par rapport à une quantité prédéterminée d'un substrat (type réduit) et la combinaison de celle-ci avec un essai immunologique enzymatique, etc. permet la quantification, etc. d'une protéine ou d'un acide nucléique avec une sensibilité élevée.
(JA)本発明は、抗体酵素複合体又は酵素標識核酸プローブの酵素による反応生成物の定量が、NAD(P)H、チオNAD(P)、並びにデヒドロゲナーゼ(DH)を用いた酵素サイクリング反応により、チオNAD(P)Hを生成させ、生成したチオNAD(P)Hの量を測定するか、または生成したチオNAD(P)Hによる色の変化を計測することで行われる、抗体酵素複合体を用いる酵素測定方法又は酵素標識核酸プローブを用いる核酸プローブ測定方法に関する。前記酵素サイクリング反応の系に、前記酵素サイクリング反応でNAD(P)Hから生成した、NAD(P)を選択的に還元する酵素反応系を共存させる。本発明は、酵素免疫測定用キット及び核酸プローブ測定用キットに関する。酵素サイクリング反応系において、一定量の基質(還元型)に対して、単位時間当たりのチオNAD(P)Hの生成量を高くして、検出感度を高め、これを酵素免疫測定法等と組み合わせて、高感度でのタンパク質または核酸の定量等を可能にする。
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : japonais (JA)
Langue de dépôt : japonais (JA)