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1. (WO2017139412) VECTEURS ET SYSTÈMES DE CLONAGE ET D'EXPRESSION AMÉLIORÉS

Pub. No.:    WO/2017/139412    International Application No.:    PCT/US2017/017061
Publication Date: Fri Aug 18 01:59:59 CEST 2017 International Filing Date: Thu Feb 09 00:59:59 CET 2017
IPC: C12N 15/11
C12N 15/63
C12N 15/66
C12N 15/70
Applicants: BROOKHAVEN SCIENCE ASSOCIATES, LLC
Inventors: STUDIER, F. William
Title: VECTEURS ET SYSTÈMES DE CLONAGE ET D'EXPRESSION AMÉLIORÉS
Abstract:
La présente invention concerne des vecteurs de clonage, de maintien et d'expression d'une large plage de séquences codantes dans des systèmes d'expression inductibles T7 chez des hôtes d'expression Escherichia coli. Les gènes cibles qui peuvent être maintenus de manière stable et exprimés comprennent ceux qui spécifient des protéines qui sont fortement toxiques pour la cellule hôte. Différentes configurations de vecteurs et d'hôtes d'expression fournissent différents niveaux de transcription et de traduction des gènes cibles et par conséquent différents niveaux d'accumulation des protéines cibles. Les procédés de clonage par ligature asymétrique et co-expression de plus d'une protéine cible dans un vecteur unique sont également décrits, comme le sont les variants de BL21(DE3) présentant une transcription de base inférieure par l'ARN polymérase T7.