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1. (WO2016191757) AUXOTROPHES SYNTHÉTIQUES PRÉSENTANT DES GÈNES ESSENTIELS, DÉPENDANT DES LIGANDS, POUR LA BIOSÉCURITÉ

Pub. No.:    WO/2016/191757    International Application No.:    PCT/US2016/034889
Publication Date: Fri Dec 02 00:59:59 CET 2016 International Filing Date: Sat May 28 01:59:59 CEST 2016
IPC: C12N 15/09
C12N 15/63
C12N 15/70
C12Q 1/02
Applicants: THE REGENTS OF THE UNIVERSITY OF CALIFORNIA
Inventors: ANDERSON, John
LOPEZ, Gabriel
Title: AUXOTROPHES SYNTHÉTIQUES PRÉSENTANT DES GÈNES ESSENTIELS, DÉPENDANT DES LIGANDS, POUR LA BIOSÉCURITÉ
Abstract:
L'invention concerne des auxotrophes synthétiques présentant une ou plusieurs fonctions géniques essentielles, dépendant des ligands, et des procédés de production qui peuvent être utilisés pour la biosécurité. La fonction dépendant des ligands d'un produit génique essentiel peut être produite par une série de mutations dans le cadre de lecture ouvert (ORF) d'un gène essentiel ; des fusions N-terminales, C-terminales ou d'insertion de domaines de liaison de ligand avec gènes essentiels ou un épissage d'intéine génétiquement modifiée dépendant des ligands pour modifier la fonction génique essentielle. Une sélection positive et/ou négative peut être utilisée pour identifier des auxotrophes à partir de bibliothèques créées de mutants. La sélection positive est réalisée par croissance d'une bibliothèque de mutants dans des conditions dans lesquelles la croissance ou la viabilité dépend de la fonction de gènes essentiels mutagénisés. La sélection négative élimine des cellules en croissance constitutive qui ne nécessitent pas de ligand pour la croissance par la croissance de la bibliothèque en l'absence de ligand de complémentation et dans des conditions dans lesquelles les cellules en croissance sont éliminées. Les phénotypes souhaitables sont recueillis après les sélections.