WIPO logo
Mobile | Deutsch | English | Español | 日本語 | 한국어 | Português | Русский | 中文 | العربية |
PATENTSCOPE

Recherche dans les collections de brevets nationales et internationales
World Intellectual Property Organization
Recherche
 
Options de navigation
 
Traduction
 
Options
 
Quoi de neuf
 
Connexion
 
Aide
 
Traduction automatique
1. (WO2016109939) PROCÉDÉ ET RÉACTIF POUR L'ENRICHISSEMENT DE L'ADN TUMORAL CIRCULANT
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2016/109939    N° de la demande internationale :    PCT/CN2015/070188
Date de publication : 14.07.2016 Date de dépôt international : 06.01.2015
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : HAPLOX BIOTECHNOLOGY(SHENZHEN) CO., LTD. [CN/CN]; Rm301, National Supercomputing Center in Shenzhen, Shenzhen Cloud Computing Center, 1068(West) Xueyuan Blvd.,University Town, Xili, Nanshan District Shenzhen, Guangdong 518055 (CN)
Inventeurs : XU, Mingyan; (CN).
ZHANG, Xiaoni; (CN)
Mandataire : DHC IP ATTORNEYS; Suite 2201,Modern International Commercial Building,Cross of Fuhua Road and Jintian Road Futian District Shenzhen, Guangdong 518048 (CN)
Données relatives à la priorité :
Titre (EN) METHOD AND REAGENT FOR ENRICHMENT OF CIRCULATING TUMOR DNA
(FR) PROCÉDÉ ET RÉACTIF POUR L'ENRICHISSEMENT DE L'ADN TUMORAL CIRCULANT
(ZH) 一种富集循环肿瘤DNA的方法和试剂
Abrégé : front page image
(EN)Disclosed in the present invention are a method and a reagent for enrichment of circulating tumor DNA (ctDNA). The method comprises the following steps: mixing a water phase and an oil phase, oscillating to prepare a reaction system of emulsion PCR and performing the emulsion PCR amplification, wherein the water phase comprises the peripheral blood plasma DNA as the template DNA, a forward primer and a reverse primer, dNTPs, PCR buffer and DNA polymerase, adapter sequences are connected to the two ends of the peripheral blood plasma DNA, and the forward primer and the reverse primer are complementarily paired to the adapter sequences of the two ends respectively; separating the water phase and the oil phase after the emulsion PCR amplification to obtain the PCR amplification product of the water phase; capturing the circulating tumor DNA in the PCR amplification product of the water phase by using the probes specifically binding to the circulating tumor DNA. The method of the present invention is capable of capturing the peripheral blood plasma ctDNA effectively and performing a single molecule high-fidelity ultramicro parallel amplification to provide adequate ctDNA used for the subsequent sequencing detection.
(FR)La présente invention concerne un procédé et un réactif pour l'enrichissement de l'ADN tumoral circulant (ADNtc). Le procédé comprend les étapes suivantes consistant à : mélanger une phase aqueuse et une phase huileuse, osciller pour préparer un système réactionnel d'amplification en chaîne par polymérase (PCR) en émulsion et effectuer l'amplification par PCR en émulsion, la phase aqueuse comprenant de l'ADN plasmatique du sang périphérique utilisé comme matrice d'ADN, une amorce sens et une amorce antisens, des dNTP, un tampon de PCR et une ADN polymérase, des séquences d'adaptateur étant reliées aux deux extrémités de l'ADN plasmatique du sang périphérique, et l'amorce sens ainsi que l'amorce antisens étant appariées complémentairement aux séquences d'adaptateur des deux extrémités respectivement ; séparer la phase aqueuse et la phase huileuse après l'amplification par PCR en émulsion pour obtenir le produit d'amplification par PCR de la phase aqueuse ; capturer l'ADN tumoral circulant dans le produit d'amplification par PCR de la phase aqueuse à l'aide de la liaison spécifique des sondes à l'ADN tumoral circulant. Le procédé de la présente invention permet de capturer l'ADNtc plasmatique du sang périphérique de manière efficace et de réaliser une ultramicro-amplification parallèle de haute fidélité d'une molécule unique afin d'obtenir un ADNtc adéquat utilisé pour une détection ultérieure par séquençage.
(ZH)本发明公开了一种富集循环肿瘤DNA的方法和试剂,所述方法包括如下步骤:将水相和油相混合、振荡配成乳液PCR反应体系并进行乳液PCR扩增,其中水相中含有作为模板DNA的外周血液血浆DNA、正反向引物、dNTPs、PCR缓冲液和DNA聚合酶,外周血液血浆DNA的两端连有接头序列,正反向引物分别与两端的接头序列互补配对;乳液PCR扩增后,分离水相和油相,得到水相的PCR扩增产物;使用特异性结合循环肿瘤DNA的探针序列捕获水相的PCR扩增产物中的循环肿瘤DNA。本发明的方法能够有效地捕获外周血液血浆中的ctDNA,并且进行单分子高保真超微量平行扩增,提供了足够量ctDNA以进行后续的测序检测使用。
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : chinois (ZH)
Langue de dépôt : chinois (ZH)