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1. (WO2016008884) PROCÉDÉ PERMETTANT DE DÉTECTER UNE AMPLIFICATION PAR PCR DANS UN ÉCHANTILLON
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2016/008884    N° de la demande internationale :    PCT/EP2015/066063
Date de publication : 21.01.2016 Date de dépôt international : 14.07.2015
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : IDENTIGEN LIMITED [IE/IE]; Innovation Centre Trinity College Dublin Dublin, 2 (IE)
Inventeurs : HIGGINS, Janika; (IE)
Mandataire : PURDY, Hugh Barry; (IE)
Données relatives à la priorité :
14176969.5 14.07.2014 EP
14188259.7 09.10.2014 EP
Titre (EN) A METHOD FOR DETECTING PCR AMPLIFICATION IN A SAMPLE
(FR) PROCÉDÉ PERMETTANT DE DÉTECTER UNE AMPLIFICATION PAR PCR DANS UN ÉCHANTILLON
Abrégé : front page image
(EN)A method for detecting PCR amplification of a target DNA molecule in a sample is described and employs a forward PCR primer having a sequence that is complementary to the target double stranded nucleic acid and a tail sequence, a reverse PCR primer having a sequence that is complementary to the target double stranded nucleic acid, and a dual labelled probe containing an oligonucleotide sequence identical to the tail sequence of the forward PCR primer oligonucleotide, and a reporter label and a quencher-label separated by a nuclease susceptible cleavage site. The method comprises the steps of incubating the forward and reverse PCR primers and dual labelled probe together, performing at least two rounds of PCR to generate a double stranded nucleic acid comprising the tail region and a sequence complementary to the tail region, and initiating a further round of PCR in which the oligonucleotide probe binds to the sequence complementary to the tail region, whereby the oligonucleotide probe is displaced and cleaved resulting in a detectable signal from the reporter label.
(FR)Cette invention concerne un procédé de détection d'une amplification par PCR d'une molécule d'ADN cible dans un échantillon qui utilise une amorce de PCR sens ayant une séquence qui est complémentaire de l'acide nucléique double brin cible et une séquence de queue, une amorce de PCR inverse ayant une séquence qui est complémentaire de l'acide nucléique double brin cible, et une double sonde marquée contenant une séquence oligonucléotidique identique à la séquence de queue de l'oligonucléotide amorce de PCR sens, et une étiquette rapporteur et une étiquette extincteur séparées par un site de clivage sensible à une nucléase. Le procédé comprend les étapes consistant à incuber les amorces de PCR sens et inverse et la double sonde marquée ensemble, à mettre en œuvre au moins deux tours de PCR pour générer un acide nucléique double brin comprenant la région de queue et une séquence complémentaire de la région de queue, et à lancer un autre tour de PCR pour que la sonde oligonucléotidique se lie à la séquence complémentaire de la région de queue, de façon que la sonde oligonucléotidique soit déplacée et clivée avec pour effet la génération d'un signal détectable émanant de l'étiquette rapporteur.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)