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1. (WO2015126823) PROCEDES POUR LE SEQUENCAGE DE CELLULES UNIQUES DE MICRO-ARN ET D'AUTRES ARN CELLULAIRES

Pub. No.:    WO/2015/126823    International Application No.:    PCT/US2015/016153
Publication Date: Fri Aug 28 01:59:59 CEST 2015 International Filing Date: Wed Feb 18 00:59:59 CET 2015
IPC: C12N 15/09
Applicants: BOARD OF REGENTS, THE UNIVERSITY OF TEXAS SYSTEM
Inventors: COREY, David
CHU, Yongjun
JANOWSKI, Bethany
Title: PROCEDES POUR LE SEQUENCAGE DE CELLULES UNIQUES DE MICRO-ARN ET D'AUTRES ARN CELLULAIRES
Abstract:
La présente invention concerne des procédés pour le séquençage de cellules uniques de micro-ARN et d'autres d'ARN cellulaires courts et/ou peu abondants. L'invention concerne un procédé de préparation d'un échantillon d'ARN en vue du séquençage, ledit procédé consistant à : (a) prélever un échantillon comprenant des molécules d'ARN ; (b) auto-ligaturer chaque molécule d'ARN de l'échantillon pour former un ARN circulaire ; (c) hybrider un premier ensemble d'amorces aléatoires à l'ARN circulaire; (d) allonger le premier ensemble d'amorces aléatoires ; (e) auto-ligaturer l'ADNc pour former un ADNc circulaire ; (f) hybrider un second ensemble d'amorces aléatoires à l'ADNc circulaire ; et (g) allonger le second ensemble d'amorces aléatoires hybridé à l'ADNc circulaire pour former de l'ADNc double brin. Dans certains aspects, les étapes c) et d) et/ou les étapes (f) et (g) peuvent être mises en oeuvre simultanément. Dans d'autres aspects, les étapes c) et d) et/ou les étapes (f) et (g) peut être mises en oeuvre séquentiellement, en l'absence de manipulation exogène.