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1. (WO2014160036) DISPOSITIF DE NANOPIPETTE ET PROCÉDÉ POUR L'ANALYSE SUBCELLULAIRE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2014/160036    N° de la demande internationale :    PCT/US2014/025682
Date de publication : 02.10.2014 Date de dépôt international : 13.03.2014
CIB :
G01N 33/53 (2006.01), C12M 1/34 (2006.01), C12N 5/00 (2006.01)
Déposants : THE REGENTS OF THE UNIVERSITY OF CALIFORNIA [US/US]; 1111 Franklin Street, 12th Floor Oakland, CA 94607-5200 (US)
Inventeurs : ACTIS, Paolo; (GB).
MAALOUF, Michelle, M.; (US).
POURMAND, Nader; (US)
Mandataire : ASTON, David J.; Peters Verny, LLP 425 Sherman Avenue, Suite 230 Palo Alto, CA 94306 (US)
Données relatives à la priorité :
61/781,841 14.03.2013 US
Titre (EN) NANOPIPETTE DEVICE AND METHOD FOR SUBCELLULAR ANALYSIS
(FR) DISPOSITIF DE NANOPIPETTE ET PROCÉDÉ POUR L'ANALYSE SUBCELLULAIRE
Abrégé : front page image
(EN)Described herein are devices and methods for extracting cellular material from living cells and then depositing them into a receptacle in a nanoliter scale. Using a nanopipette integrated into a scanning ion conductance microscope (SICM), extraction of mitochondrial DNA from human BJ fibroblasts and Green Fluorescent Protein (GFP) transcripts from HeLa/GFP cells was achieved with minimal disruption to the cellular milieu and without chemical treatment prior to obtaining the isolated sample. Success of the extraction was confirmed by fluorescence microscopy and PCR analysis of the extracted material. The method and apparatus may be applied to many different cell types and intracellular targets, allowing not only single cell analysis, but single subcellular compartment analysis of materials extracted in their native state.
(FR)La présente invention concerne des dispositifs et des procédés pour l'extraction d'une matière cellulaire à partir de cellules vivantes et puis leur dépôt dans un réceptacle à l'échelle du nanolitre. A l'aide d'une nanopipette intégrée dans un microscope à conductance ionique à balayage (SICM), l'extraction de l'ADN mitochondrial à partir de fibroblastes BJ humains et de transcrits de protéine fluorescente verte (GFP) provenant de cellules HeLa/GFP a été réalisée avec une destruction minimale du milieu cellulaire et sans traitement chimique avant l'obtention de l'échantillon isolé. Le succès de l'extraction a été confirmé par microscopie à fluorescence et analyse par PCR de la matière extraite. Le procédé et l'appareil peuvent être appliqués à de nombreux types cellulaires différents et de nombreuses cibles intracellulaires différentes, permettant non seulement une analyse de cellules isolées, mais une analyse de compartiment subcellulaire isolé de matières extraites à leur état endogène.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)