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1. (WO2014082733) PROCÉDÉ ET OUTILS POUR LA DÉTERMINATION DE LA CONFORMATION ET DE MODIFICATIONS CONFORMATIONNELLES DE PROTÉINES ET DE DÉRIVÉS DE CELLES-CI
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2014/082733    N° de la demande internationale :    PCT/EP2013/003564
Date de publication : 05.06.2014 Date de dépôt international : 26.11.2013
CIB :
G01N 33/68 (2006.01)
Déposants : ETH ZURICH [CH/CH]; Raemistrasse 101/ETH transfer CH-8092 Zurich (CH)
Inventeurs : PICOTTI, Paola; (CH).
FENG, Yuehan; (CH).
DE FRANCESCHI, Giorgia; (IT)
Données relatives à la priorité :
12008011.4 28.11.2012 EP
Titre (EN) METHOD AND TOOLS FOR THE DETERMINATION OF CONFORMATION AND CONFORMATIONAL CHANGES OF PROTEINS AND OF DERIVATIVES THEREOF
(FR) PROCÉDÉ ET OUTILS POUR LA DÉTERMINATION DE LA CONFORMATION ET DE MODIFICATIONS CONFORMATIONNELLES DE PROTÉINES ET DE DÉRIVÉS DE CELLES-CI
Abrégé : front page image
(EN)A Method for the detection of the conformational state of a protein contained in a complex mixture of further proteins and/or other biomolecules, in particular in a complex native biological matrix, is proposed as well as assays for such a method. The method comprises, if needed after an extraction and/or lysis step, the following steps: 1. Limited proteolysis of the complex mixture under a condition where the protein is in the conformational state to be detected leading to a first fragment sample; 2. Denaturation of the first fragment sample to a denaturated first fragment sample; 3. Complete fragmentation of the denaturated first fragment sample in a digestion step to a completely fragmented sample; 4. Analytical analysis of the completely fragmented sample for the determination of fragments characteristic of having been the result both the limited proteolysis of step 1. as well as of the complete fragmentation in the digestion step 3. for the determination of the conformational state.
(FR)L'invention concerne un procédé de détection de l'état conformationnel d'une protéine contenue dans un mélange complexe de protéines supplémentaires et/ou d'autres biomolécules, en particulier dans une matrice biologique endogène complexe, ainsi que des essais pour un tel procédé. Le procédé comprend, si nécessaire après une étape d'extraction et/ou de lyse, les étapes suivantes : 1. la protéolyse limitée du mélange complexe dans une condition où la protéine est à l'état conformationnel à détecter conduisant à un premier échantillon de fragment; 2. la dénaturation du premier échantillon de fragment en un premier échantillon de fragment dénaturé; 3. la fragmentation complète du premier échantillon du fragment dénaturé dans une étape de digestion en un échantillon complètement fragmenté; 4.l'analyse analytique de l'échantillon complètement fragmenté pour la détermination de fragments caractéristiques comme étant le résultat à la fois de la protéolyse limitée de l'étape 1. ainsi que la fragmentation complète de l'étape de digestion 3. pour la détermination de l'état conformationnel.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)